湖南野生假俭草组织培养再生体系的研究

论文摘要

本试验以湖南野生假俭草（Eremochloa ophiuroides）的茎段为外植体,研究假俭草茎段丛生芽和愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、无菌苗的生根以及炼苗移栽过程中,不同消毒处理、不同基本培养基、不同激素浓度及配比等条件对假俭草组织培养再生体系建立的影响,找出了适宜假俭草快速繁殖及再生体系建立的最优条件。研究结果表明：1.外植体消毒：选择生长活跃期的幼嫩茎段为外植体,在经过预处理后,用75%酒精消毒45 s,再结合加有约0.1% Tween-80的0.1%升汞消毒10min,褐化率与污染率较低,分别为12.5%、6.3%,成活率较高,达81.3%。2.丛生芽的诱导与增殖：诱导茎段产生丛生芽的最适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.4 mg/L。在此培养基下,丛生芽诱导率达90.0%,新芽粗状叶大,生长旺盛；在丛生芽的增殖培养中,添加1.0 mg/L 6-BA与0.2 mg/L IBA的MS培养基增殖效果最佳。在此浓度配比下,芽苗生长健壮,植株增殖生长快,叶片绿色,增殖系数达到3.13。3.愈伤组织诱导与继代：暗培养条件下,在MS+2,4-D 2 mg/L+6-BA0.4 mg/L愈伤组织培养基上,愈伤组织诱导率高,达到64.6%。在此培养基上继代增殖,愈伤组织生长快,淡黄色,结构致密,容易分化,不出现纤毛结构。4.愈伤组织分化：诱导假俭草愈伤组织芽的分化时,采用MS+NAA 0.08 mg/L+6-BA 0.8 mg/L+CH 500 mg/L+蔗糖35g/L,愈伤组织的分化率达95.0%。5.根的诱导：诱导生根的最佳培养基是1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.5 mg/L,此培养基上生根率达到100%,根生长健壮。6.炼苗移栽：选取健壮幼苗移栽,并经驯化炼苗15天后,移栽到温室大棚土壤中,移栽成活率达80%。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 引言
• 1 文献综述
• 1.1 植物组织培养及其理论基础
• 1.1.1 植物组织培养概述
• 1.1.2 植物组织培养理论基础
• 1.2 草坪草组织培养研究进展
• 1.2.1 愈伤组织诱导培养
• 1.2.2 花药离体培养
• 1.2.3 悬浮细胞培养
• 1.2.4 原生质体培养
• 1.2.5 胚胎培养
• 1.2.6 茎尖分生组织培养
• 1.3 假俭草概述
• 1.4 假俭草相关研究进展
• 1.5 研究的目的和意义
• 2 材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.2 技术路线
• 2.3 试验方法
• 2.3.1 外植体的选择
• 2.3.2 外植体的消毒处理
• 2.3.3 培养基及培养条件
• 2.3.4 丛生芽的诱导
• 2.3.5 愈伤组织的诱导与分化
• 2.3.6 生根培养
• 2.3.7 炼苗移栽
• 2.3.8 数据的统计与分析
• 3 结果与分析
• 3.1 外植体的消毒
• 3.2 丛生芽的诱导与增殖
• 3.2.1 不同浓度的激素对丛生芽诱导的影响
• 3.2.2 不同6-BA与IBA浓度配比对丛生芽诱导的影响
• 3.2.3 不同6-BA与NAA浓度配比对芽苗增殖的影响
• 3.3 愈伤组织的诱导与分化
• 3.3.1 基本培养基的筛选
• 3.3.2 不同培养条件对愈伤组织诱导的影响
• 3.3.3 不同浓度激素及配比对愈伤组织诱导的影响
• 3.3.4 愈伤组织的继代增殖
• 3.3.5 不同培养基及CH浓度对愈伤组织分化的影响
• 3.3.6 不同6-BA、KT浓度对愈伤组织分化的影响
• 3.3.7 不同NAA与6-BA浓度配比对愈伤组织分化的影响
• 3.3.8 不同蔗糖浓度对愈伤组织分化的影响
• 3.4 再生植株的生根和炼苗移栽
• 3.4.1 芽苗诱导生根
• 3.4.2 炼苗移栽
• 4 结论与讨论
• 4.1 结论
• 4.2 讨论
• 4.2.1 外植体的选择与消毒
• 4.2.2 假俭草丛生芽的诱导
• 4.2.3 假俭草愈伤组织的诱导与分化
• 4.2.4 假俭草组织培养中的褐化
• 4.3 本研究的创新点和不足之处
• 4.3.1 创新点
• 4.3.2 本研究的不足处及今后的研究
• 参考文献
• 附录Ⅰ 主要英文缩略词
• 附录Ⅱ 图版
• 附录Ⅱ 攻读硕士学位期间发表论文
• 致谢