本文主要研究内容
作者连凯琪,周玲玲,王英杰,李翠,宋玉伟,张明亮（2019）在《猪IgG1-Fc基因的克隆、原核表达及表达条件优化》一文中研究指出：为了探索猪IgG1-Fc(pIgG1-Fc)基因在大肠杆菌中的高效表达,首先通过反转录PCR(RT-PCR)扩增pIgG1-Fc基因,并构建重组表达质粒pET30a(+)-pIgG1-Fc,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达,然后通过优化异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导浓度、菌体培养温度及菌体培养时间,实现pIgG1-Fc重组蛋白的高效表达。结果表明,成功克隆了pIgG1-Fc的基因666 bp,共编码222个氨基酸;重组原核表达质粒pET30a(+)-pIgG1-Fc经过酶切和测序证明构建正确,重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中能够表达,表达的融合蛋白分子量约为36 ku。其最佳表达条件如下:在25℃条件下加入终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导6 h可形成大量包涵体蛋白。pIgG1-Fc基因被成功克隆并原核表达,为进一步研究该蛋白的功能及实现其他蛋白与pIgG1-Fc融合后原核表达奠定了基础,为制备能与猪IgG1结合的二抗提供了材料。
Abstract
wei le tan suo zhu IgG1-Fc(pIgG1-Fc)ji yin zai da chang gan jun zhong de gao xiao biao da ,shou xian tong guo fan zhuai lu PCR(RT-PCR)kuo zeng pIgG1-Fcji yin ,bing gou jian chong zu biao da zhi li pET30a(+)-pIgG1-Fc,zhuai hua dao da chang gan jun BL21(DE3)zhong jin hang yuan he biao da ,ran hou tong guo you hua yi bing ji liu dai ban ru tang gan (IPTG)you dao nong du 、jun ti pei yang wen du ji jun ti pei yang shi jian ,shi xian pIgG1-Fcchong zu dan bai de gao xiao biao da 。jie guo biao ming ,cheng gong ke long le pIgG1-Fcde ji yin 666 bp,gong bian ma 222ge an ji suan ;chong zu yuan he biao da zhi li pET30a(+)-pIgG1-Fcjing guo mei qie he ce xu zheng ming gou jian zheng que ,chong zu zhi li zai da chang gan jun BL21(DE3)zhong neng gou biao da ,biao da de rong ge dan bai fen zi liang yao wei 36 ku。ji zui jia biao da tiao jian ru xia :zai 25℃tiao jian xia jia ru zhong nong du wei 1 mmol/Lde IPTGyou dao 6 hke xing cheng da liang bao han ti dan bai 。pIgG1-Fcji yin bei cheng gong ke long bing yuan he biao da ,wei jin yi bu yan jiu gai dan bai de gong neng ji shi xian ji ta dan bai yu pIgG1-Fcrong ge hou yuan he biao da dian ding le ji chu ,wei zhi bei neng yu zhu IgG1jie ge de er kang di gong le cai liao 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自江苏农业科学的连凯琪,周玲玲,王英杰,李翠,宋玉伟,张明亮，发表于刊物江苏农业科学2019年15期论文，是一篇关于原核表达论文,包涵体论文,融合蛋白论文,江苏农业科学2019年15期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自江苏农业科学2019年15期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：原核表达论文; 包涵体论文; 融合蛋白论文; 江苏农业科学2019年15期论文;