罗氏海盘车(Asterias rolleston)腕再生过程及其再生机理的组织学研究

罗氏海盘车(Asterias rolleston)腕再生过程及其再生机理的组织学研究

论文摘要

再生是指通过形成新的组织或器官来替代因受伤而丢失或损害的组织或器官的修复及复原过程。海盘车等棘皮动物具有极其惊人的再生能力,可以快速且完整地再生出非自然丢失的腕,是研究再生过程的理想实验动物模型。对海盘车器官再生机理的研究,不仅有助于我们更好地理解其他后口动物的再生过程与机理,为脊椎动物的再生研究提供思路与理论参照,而且对于进一步研究和揭示高等脊椎动物以及人的再生机理,也具有重要的指导价值,对于早日查清高等脊椎动物和人的再生过程和再生机理将具有重大的科学意义。 本文以成体罗氏海盘车腕为材料,利用断腕创伤手术和组织化学技术对罗氏海盘车腕的再生过程进行了跟踪研究。结果表明,在人工饲养条件下,创伤罗氏海盘车腕的再生速率约为0.27 mm/d。罗氏海盘车的腕再生分为三个阶段:伤口愈合阶段、早期再生阶段和晚期再生阶段。其中伤口愈合阶段发生于断腕创伤后的3-5天,此阶段罗氏海盘车腕的再生速度基本为零,包括真皮层肌肉细胞、表皮层细胞、体腔上皮细胞和真皮层间质细胞的脱分化、增殖、迁移及组织重排;早期再生阶段发生于断腕创伤后的6-8天,此阶段罗氏海盘车的腕再生速度很慢,主要是表皮层和体腔上皮细胞的脱分化和增殖,与其诱导产生的真皮层脱分化细胞共同形成多个干细胞原基样结构(blastema-like structure);晚期再生阶段约为断腕后的9天至数月,此阶段罗氏海盘车的腕再生速度加快且基本保持稳定,主要是表皮层、体腔上皮、真皮层细胞的脱分化、增殖和大量干细胞原基样结构的形成,以及干细胞原基样结构的再分化、广泛的形态形成、顶端的逐步生长、再生新腕的完全发育等,约60天以后再生腕的生长速度趋于平缓,直到创伤腕再生结束。 成体罗氏海盘车腕体壁结构包括表皮层、体腔上皮及其内侧的真皮层细胞

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 第一章 棘皮动物再生的研究进展
  • 1 概述
  • 2 棘皮动物再生的研究近况
  • 2.1 棘皮动物再生现象
  • 2.1.1 腕的再生
  • 2.1.2 外附属物的再生
  • 2.1.3 内脏的再生
  • 2.1.4 肌肉的再生
  • 2.1.5 幼虫的再生
  • 2.2 棘皮动物再生的组织学及细胞学研究
  • 2.2.1 再生的三个阶段
  • 2.2.2 再生机理
  • 2.2.3 细胞增殖、迁移、分化所起的作用
  • 2.2.4 神经系统在再生中的作用
  • 2.3 棘皮动物再生的分子研究
  • 3 棘皮动物再生的研究意义
  • 4 结语
  • 第二章 罗氏海盘车(Asterias Rollestoni)器官水平的腕再生过程研究
  • 1 实验材料
  • 2 实验方法
  • 3 实验结果
  • 3.1 罗氏海盘车器官水平腕的再生趋势
  • 3.2 罗氏海盘车器官水平腕再生平均速度
  • 4 实验讨论
  • 5 实验结论
  • 第三章 罗氏海盘车(Asterias Rollestoni)组织水平的腕再生过程研究
  • 1 实验用品
  • 1.1 实验材料
  • 1.2 实验仪器
  • 1.3 实验药品
  • 1.4 常用溶液配方
  • 1.4.1 Bouin氏液
  • 1.4.2 苏木素
  • 1.4.3 伊红
  • 1.4.4 10g/L EDTA-Na
  • 1.4.5 蛋白甘油
  • 2 实验方法
  • 2.1 断腕处理
  • 2.2 材料固定处理
  • 2.3 腕段的脱钙处理
  • 2.4 梯度酒精脱水
  • 2.5 透明、浸蜡与包埋
  • 2.6 石蜡切片
  • 2.7 苏木素与伊红的染色(H.E)
  • 2.7.1 切片脱蜡
  • 2.7.2 切片复水
  • 2.7.3 苏木素染色
  • 2.7.4 切片脱水
  • 2.7.5 伊红染色
  • 2.7.6 切片透明
  • 2.8 封片并观察
  • 3 实验结果
  • 3.1 罗氏海盘车创伤腕的伤口愈合过程
  • 3.2 罗氏海盘车创伤腕顶端新腕芽的形成及延长过程
  • 3.3 罗氏海盘车创伤残腕的延长过程
  • 4 实验讨论
  • 4.1 罗氏海盘车创伤腕的伤口愈合过程
  • 4.2 罗氏海盘车创伤腕的再生过程
  • 5 实验结论
  • 第四章 罗氏海盘车(Asterias Rollestoni)组织水平的腕再生方式及机理的初步研究
  • 1 实验用品
  • 1.1 实验材料
  • 1.2 实验仪器
  • 1.3 实验药品
  • 1.4 常用溶液配方
  • 1.4.1 PBS缓冲液
  • 1.4.2 5%戊二醛
  • 2 实验方法
  • 2.1 光镜观察
  • 2.2 电镜观察
  • 2.2.1 断腕处理
  • 2.2.2 材料固定处理
  • 2.2.3 腕段的脱钙处理
  • 2.2.4 电镜切片观察
  • 3 实验结果
  • 3.1 创伤前后罗氏海盘车腕体壁结构的变化
  • 3.2 罗氏海盘车创伤腕中脱分化细胞增殖方式及机制
  • 3.2.1 创伤腕中脱分化细胞的出现及其增殖方式
  • 3.2.2 腕再生过程中细胞超微结构的变化
  • 3.3 罗氏海盘车创伤腕伤口愈合方式
  • 3.3.1 创伤腕伤口处细胞的集聚方式
  • 3.3.2 创伤腕近伤口处肌肉细胞的脱分化
  • 3.3.3 创伤腕近伤口处表皮层和体腔上皮的再生
  • 3.4 罗氏海盘车创伤腕的新腕芽形成及延长方式
  • 3.5 罗氏海盘车创伤残腕的延长方式
  • 4 实验讨论
  • 4.1 罗氏海盘车腕再生的三个阶段
  • 4.2 罗氏海盘车腕再生过程中脱分化细胞的来源及其增殖模式
  • 4.3 罗氏海盘车腕再生过程中干细胞原基样结构的形成模式
  • 4.4 罗氏海盘车腕再生过程中干细胞原基样结构的再分化模式
  • 4.5 罗氏海盘车创伤腕的再生方式
  • 4.6 罗氏海盘车创伤腕的伤口愈合机制
  • 4.7 罗氏海盘车创伤腕的残腕延长机制
  • 4.8 罗氏海盘车创伤腕的新腕芽生长与延长机制
  • 5 实验结论
  • 参考文献
  • 致谢
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