对氧磷和马拉氧磷抑制11种生物AChE的恢复和老化研究

论文摘要

本文用对氧磷和马拉氧磷抑制抗性小菜蛾、敏感小菜蛾、斜纹夜蛾、家蝇、黄曲条跳甲、菜蛾绒茧蜂、蝶蛹金小蜂、龟纹瓢虫、小白鼠、鲫鱼、牛蛙共十一种生物的AChE,测定了对氧磷和马拉氧磷抑制这十一种AChE的毒力,计算出了I50和I90；再用I90浓度的对氧磷和马拉氧磷分别抑制这十一种AChE,用固相萃取柱去掉残留农药后,直接通过测定不同时间的酶活计算出了它们的恢复常数；以不同的时间间隔用终浓度为0.1mmol/L的TMB-4重活化这些中毒AChE,测定活化后的酶活计算出了老化常数（所有反应均在25℃进行）。主要得出了以下结论：1.这11种AChE对对氧磷敏感性的差异比对马拉氧磷敏感性的差异要大很多；2.小白鼠AChE对对氧磷很敏感而对马拉氧磷敏感性很低；3.磷酰化AChE的恢复常数和老化常数,与AChE对有机磷杀虫剂的敏感性无关,所以不能作为判断害虫抗药性强弱的标准；4.鞘翅目昆虫磷酰化AChE的恢复能力可能比其它品种的昆虫磷酰化AChE要强；5.哺乳动物磷酰化AChE的恢复能力比昆虫磷酰化AChE要强很多；6.马拉氧磷抑制AChE比对氧磷抑制对应材料AChE的老化常数要大,说明有机磷杀虫剂的种类与磷酰化AChE的老化常数有很大影响；7.对氧磷和马拉氧磷抑制昆虫AChE的老化常数均比相应的恢复常数要大,说明有机磷中毒的昆虫AChE更容易发生老化反应。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1. 前言
• 1.1 乙酰胆碱酯酶的研究概述
• 1.1.1 胆碱酯酶的种类及分布
• 1.1.2 AChE的结构与生理功能
• 1.1.3 AChE的生理功能及应用
• 1.2 AChE与害虫抗药性的关系
• 1.3 解毒剂对中毒AChE的复活作用
• 1.4 中毒AChE的恢复和老化作用研究
• 1.5 本实验的研究意义
• 2. 实验材料与方法
• 2.1 供试药剂与材料
• 2.1.1 生物材料
• 2.1.2 化学试剂
• 2.1.3 主要仪器设备
• 2.1.4 PBS缓冲液的配制
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 AChE的制备
• 2.2.2 AChE活性的测定方法
• 2.2.3 对氧磷和马拉氧磷对AChE的毒力测定
• s）测定'>2.2.4 对氧磷和马拉氧磷抑制AChE的恢复常数（K_s）测定
• a）测定'>2.2.5 对氧磷和马拉氧磷抑制AchE的老化常数（K_a）测定
• 3. 结果与分析
• 3.1 对氧磷和马拉氧磷对AChE的毒力测定
• 3.1.1 对氧磷对AChE的毒力测定
• 3.1.2 马拉氧磷对AChE的毒力测定
• s）测定'>3.2 对氧磷和马拉氧磷抑制AChE的恢复常数（K_s）测定
• s）测定'>3.2.1 对氧磷抑制AChE的恢复常数（K_s）测定
• s）测定'>3.2.2 马拉氧磷抑制AChE的恢复常数（K_s）测定
• a）测定'>3.3 对氧磷和马拉氧磷抑制AChE的老化常数（K_a）测定
• a）测定'>3.3.1 对氧磷抑制AChE的老化常数（K_a）测定
• a）测定'>3.3.2 马拉氧磷抑制AChE的老化常数（K_a）测定
• 3.4 小结
• 4. 结论与讨论
• 4.1 结论
• 4.2 讨论
• 参考文献
• 致谢