论文摘要
背景:尿道下裂（Hypospadias）是小儿最常见的泌尿生殖道先天畸形。由于阴茎及前尿道发育不全,尿道开口异常伴阴茎下弯畸形,导致患儿不能站立排尿,并影响成年后性功能及生育力。手术矫正畸形是本病的唯一治疗措施,但术后并发症发生率较高,是患儿及家长的心患。为此,有关尿道下裂病因的研究受到学者们关注,以期通过尿道下裂病因学的研究寻找其预防、治疗学突破。尿道下裂发病率约1/200～1/300,而且有逐年增加趋势,大量研究提示其发病率的增加与环境雌激素污染密切相关。邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）是一种广泛应用于塑料及化工产业的增塑剂,在医疗工作和日常生活中被大量应用,已构成我国严重的“白色污染”。DEHP进入环境后不易被降解,能蓄积于人体产生雌激素样生物活性。课题组前期研究已发现DEHP可损害实验动物睾丸及附睾功能导致小鼠隐睾畸形,可同时伴有尿道下裂的产生。虽有文献报道DEHP能诱发实验动物的尿道下裂,但是未就其机制深入研究。因此,本课题针对DEHP对外生殖器的毒性损伤,研究其致畸机制,为进一步防治尿道下裂发生提供科学依据。目的:利用DEHP的外生殖器的毒性损伤,诱导胎鼠尿道下裂:体内外观察阴茎发育情况,检测细胞凋亡改变、TGF-β1及ATF3等在阴茎组织中的表达;对比尿道下裂患者与正常儿童包皮TGF-β1表达差异,深入探讨尿道下裂发生机制。方法:1.将C57BL/6及KM孕鼠分为对照组与DEHP处理组,DEHP处理组分为100 mg/kg·d、200 mg/kg·d与500 mg/kg·d三个剂量组(DEHP100,DEHP200,DEHP500),于妊娠12.5d～17.5d（GD12.5～17.5）期间灌胃;对照组于同期用0.1mL玉米油灌胃。于GD19剖腹取出胎鼠,对比观察胎鼠阴茎与尿道发育;尿道橡胶管型重塑胎鼠尿路情况,测量尿道长度;统计尿道下裂发生率。采用整体原位杂交（WISH）技术检测胎鼠阴茎中TGF-β1 mRNA的表达。2.获取上述各组胎鼠及幼年鼠阴茎,运用免疫荧光、RT-PCR、western blot技术检测TGF-β1与ATF3的表达;经TUNEL染色观察阴茎内细胞凋亡情况,检测凋亡相关蛋白:Bcl-2、Bax及P53的表达。3.取正常GD12.5胎鼠阴茎体外培养,分别经不同剂量的MEHP、TGF-β1细胞因子及MEHP+TGF-β1单克隆抗体干预,观察阴茎发育情况,运用RT-PCR对比TGF-β1与ATF3基因表达的变化。4.取尿道下裂病人与正常儿童包皮,采用免疫组化、RT-PCR及荧光实时PCR方法检测TGF-β1表达,对比其差异。结果:1.DEHP成功诱导出尿道下裂小鼠动物模型,尿道下裂表现为阴茎体变短、尿道开口异位、包皮分裂,DEHP100、DEHP200与DEHP500尿道下裂发生率分别为7.1%、14.0%和75.7%;实验组雄性胎鼠体重及肛门尿道口距离（AGD）均值随DEHP剂量增加而逐渐减小（p＜0.05）;尿道橡胶管型显示尿道下裂胎鼠尿道变短,尤以前尿道明显,中高剂量组尿道长度较对照组明显缩短（p＜0.001）;阴茎连续切片显示实验组尿道轴偏向阴茎腹侧,尿道板向腹侧隆起及融合过程落后。WISH检测发现胎鼠阴茎中TGF-β1 mRNA特异表达于尿道板及尿道上皮。2.RT-PCR、免疫荧光及western blot均显示在胎鼠阴茎内,TGF-β1与ATF3 mRNA与蛋白的表达随DEHP剂量的增加而逐渐增强,而在生后20d及40d小鼠阴茎内,TGF-β1 mRNA的表达显著低于正常对照;阴茎细胞的凋亡减少伴P53表达下降,而Bcl-2/Bax比值无明显变化。3.体外培养条件下胎鼠阴茎能够较好生长,MEHP及TGF-β1细胞因子能显著抑制阴茎发育。MEHP不能上调TGF-β1及ATF3 mRNA的表达,TGF-β1细胞因子也不能上调ATF3 mRNA的表达,TGF-β1抗体不能抑制ATF3 mRNA的表达。4.尿道下裂患儿包皮中TGF-β1表达具有低于正常儿童趋势。结论:DEHP诱导胎鼠尿道下裂可能与其上调TGF-β1及ATF3表达有关,TGF-β1及ATF3的异常表达可能是尿道下裂发生机制的关键环节,但TGF-β1可能不与ATF3产生信号传导。
论文目录
相关论文文献
- [1].氧气面罩用于创口保护对尿道下裂修补术患儿术后的影响[J]. 中国乡村医药 2019(24)
- [2].尿道下裂的基因特点及其研究进展[J]. 国际生殖健康/计划生育杂志 2019(03)
- [3].青春期前尿道下裂儿童的性激素水平调查及临床意义[J]. 名医 2019(11)
- [4].重型尿道下裂治疗策略[J]. 临床小儿外科杂志 2018(08)
- [5].尿道下裂患儿术前心理状况的探究[J]. 医学信息 2018(22)
- [6].尿道下裂术后尿道瘘的原因分析与护理对策[J]. 实用临床护理学电子杂志 2017(01)
- [7].舒适护理用于尿道下裂修补术患者中的临床效果观察[J]. 医疗装备 2015(09)
- [8].尿道下裂术后发生尿道瘘的相关因素及护理干预效果[J]. 中国医药指南 2015(08)
- [9].男性尿道下裂相关基因研究进展[J]. 北京医学 2015(10)
- [10].尿道下裂,整形手术解决难言之隐[J]. 家庭医学(下半月) 2009(07)
- [11].尿道板纵切卷管尿道成形术在尿道下裂治疗中的应用分析[J]. 中国民康医学 2017(21)
- [12].322例尿道下裂患者的染色体核型分析[J]. 中国优生与遗传杂志 2018(06)
- [13].重度尿道下裂54例治疗体会[J]. 临床医学研究与实践 2017(17)
- [14].两种分期手术模式对治疗小儿重度尿道下裂的临床应用研究[J]. 中国医疗美容 2017(06)
- [15].改良包皮岛状皮瓣尿道成形术对小儿重度尿道下裂预后的影响[J]. 中国妇幼保健 2016(19)
- [16].重视影响尿道下裂长期疗效的几个重要问题[J]. 发育医学电子杂志 2016(02)
- [17].尿道下裂术后包扎拆除时机的探讨[J]. 微创泌尿外科杂志 2015(01)
- [18].尿道下裂术后尿道瘘发生因素分析与护理干预效果[J]. 中国乡村医药 2013(18)
- [19].80例儿童尿道下裂经尿道成形术治疗的疗效观察[J]. 中外医疗 2012(31)
- [20].《尿道下裂学》新近出版[J]. 现代泌尿外科杂志 2008(06)
- [21].《尿道下裂学》书讯[J]. 中华男科学杂志 2008(12)
- [22].尿道板重建 包皮瓣耦合尿道成形在重型尿道下裂中的应用及疗效[J]. 中国药物与临床 2019(24)
- [23].尿道下裂发病机制研究进展[J]. 贵州医药 2018(08)
- [24].优质护理对尿道下裂患儿预后的影响探讨[J]. 实用临床护理学电子杂志 2018(46)
- [25].护理干预对改善尿道下裂患儿家属负性情绪的影响分析[J]. 继续医学教育 2016(12)
- [26].单纯性尿道下裂发病影响因素病例对照研究[J]. 中国公共卫生 2012(06)
- [27].尿道下裂术后尿瘘的治疗[J]. 中国社区医师(医学专业) 2011(03)
- [28].尿道下裂患儿临床特征及危险因素分析[J]. 临床小儿外科杂志 2019(10)
- [29].尿道下裂发病危险因素的研究现状[J]. 新疆医学 2018(02)
- [30].有关尿道下裂治疗的争议与手术方法的选择[J]. 临床小儿外科杂志 2016(05)
标签：尿道下裂论文;