环孢素A固体脂质纳米粒制备工艺优化及性能研究

论文摘要

固体脂质纳米粒具有良好的缓释效果、适合多种途径给药等优点,近年来已成为研究热点。本论文以甘油三硬脂酸酯为主要基质载体,临床免疫抑制药物CsA为模型药物,以溶剂扩散法制备载环孢素A固体脂质纳米粒。利用Ca2+与载药纳米粒胶体溶液中海藻酸钠发生配位反应形成海藻酸钙凝胶,从而在低离心转速下分离纳米粒并简便准确测定药物包封率。本实验首先以响应面法对影响固体脂质纳米粒包封率的制备工艺实行优化,确定达到最高药物包封率时的制备条件；其次研究了固体脂质纳米粒的性质包括表面形态、平均粒径、表面Zeta电位；然后考察了固体脂质纳米粒的稳定性,探讨了保存条件；最后对固体脂质纳米粒的体外释药性能进行了研究。本文为环孢素A固体脂质纳米粒的临床应用提供了一定的理论和实验基础。得到以下主要结论：1. Plackeet-Burman实验确定水和制备温度是制备固体脂质纳米粒8个主要因素条件中对CsA-SLN包封率影响最显著的两个因子。最陡爬坡实验逼近包封率的最大中心区域,确定中心点为：海藻酸钠0.11g,水60ml,制备温度35℃。最后由Box-Behnken实验确定优化因子工艺条件：海藻酸钠0.1132g,水52.77ml,制备温度34.55℃。验证实验表明在优化因子工艺条件下,CsA-SLN实际测得药物包封率平均值为82.45%,与预测值83.98%接近。2.在最优工艺条件下,纳米粒形态呈规整棒状,单分散性好,测得平均粒径为181.3nm,表面电位-57.0mV。3.影响因素实验证明环孢素A固体脂质纳米粒分散液属于热力学不稳定体系,高温和光照对纳米粒的储存都有一定的影响。长期稳定性实验表明,CsA-SLN适宜在低温避光条件下保存。4.体外释药实验证实了环孢素A固体脂质纳米粒具有缓释效果,体外释药分为突释和缓释两个阶段,在不同释放介质中,环孢素A固体脂质纳米粒释药速率大小顺序为：模拟肠液>模拟胃液>0.1%SDS溶液。在0.1%SDS溶液、模拟胃液和模拟肠液中,环孢素A固体脂质纳米粒释药机制均以Fikc扩散为主,骨架溶蚀释药为辅。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 目录
• 第一章 绪论
• 1.1 环孢素A简介
• 1.1.1 环孢素A的结构和理化性质
• 1.1.2 环孢素A的应用
• 1.1.3 环孢素A免疫抑制机理
• 1.1.4 环孢素A的体内作用特点及不良反应
• 1.2 环孢素A新剂型研究进展
• 1.2.1 环孢素A微乳剂
• 1.2.2 环孢素A微球
• 1.2.3 环孢素A脂质体
• 1.2.4 环孢素A纳米粒
• 1.3 固体脂质纳米粒制备材料、方法以及分离
• 1.3.1 固体脂质纳米粒的制备材料
• 1.3.2 固体脂质纳米粒的制备方法
• 1.3.3 固体脂质纳米粒的分离
• 1.4 海藻酸钠简介
• 1.5 响应面法优化
• 1.5.1 Plackett-Burman实验
• 1.5.2 最陡爬坡实验
• 1.5.3 Box-Benhnken实验
• 1.6 论文工作设想
• 第二章 载环孢素A SLN药物含量和包封率测定方法的建立
• 2.1 实验
• 2.1.1 实验材料
• 2.1.2 实验仪器
• 2.1.3 实验方法
• 2.2 结果与讨论
• 2.2.1 色谱条件
• 2.2.2 标准曲线的制备
• 2.2.3 回收率
• 2.2.4 精密度
• 2.2.5 包封率和载药量测定方法的建立
• 2.3 本章结论
• 第三章 环孢素A固体脂质纳米粒制备工艺条件筛选
• 3.1 实验
• 3.1.1 实验材料
• 3.1.2 实验仪器
• 3.1.3 实验方法
• 3.2 结果与讨论
• 3.2.1 海藻酸钠对SLN平均粒径和包封率的影响
• 3.2.2 水用量对SLN平均粒径和包封率的影响
• 3.2.3 吐温20对SLN平均粒径和包封率的影响
• 3.2.4 乙醇和丙酮对SLN平均粒径和包封率的影响
• 3.2.5 甘油三硬酯酸酯对SLN平均粒径和包封率的影响
• 3.2.6 制备温度对SLN平均粒径和包封率的影响
• 3.2.7 搅拌速度对SLN平均粒径和包封率的影响
• 3.2.8 环孢素A加入量对SLN平均粒径和包封率的影响
• 3.3 本章结论
• 第四章 响应面法优化环孢素A固体脂质纳米粒制备工艺
• 4.1 实验
• 4.1.1 实验材料
• 4.1.2 实验仪器
• 4.2 实验设计
• 4.2.1 Plackeet-Burman实验
• 4.2.2 最陡爬坡实验
• 4.2.3 Box-Behnken实验
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 Plackeet-Burman法确定影响包封率显著因子
• 4.3.2 最陡爬坡实验
• 4.3.3 Box-Behnken实验设计及响应面分析
• 4.4 验证实验
• 4.5 本章结论
• 第五章 环孢素A固体脂质纳米粒性质及稳定性研究
• 5.1 实验
• 5.1.1 实验材料
• 5.1.2 实验仪器
• 5.1.3 实验方法
• 5.2 结果与讨论
• 5.2.1 水相中海藻酸钠对环孢素A固体脂质纳米粒形态的影响
• 5.2.2 环孢素A固体脂质纳米粒平均粒径和Zeta电位的测定
• 5.2.3 影响因素实验
• 5.2.4 长期稳定性实验
• 5.3 本章结论
• 第六章 环孢素A固体脂质纳米粒体外释放性能研究
• 6.1 实验
• 6.1.1 实验材料
• 6.1.2 实验仪器
• 6.1.3 实验方法
• 6.2 结果与讨论
• 6.2.1 释放介质的选择
• 6.2.2 释放曲线
• 6.2.3 环孢素A固体脂质纳米粒体外释药动力学拟合
• 6.3 本章结论
• 总结
• 一 结论
• 二 创新点
• 三 不足和后续工作建议
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间取得的科研成果
• 致谢