本文主要研究内容
作者张志恒（2019）在《骨关节炎损伤机制及Ⅱ型胶原代谢产物浓度变化的研究》一文中研究指出：骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是一种常发生于老年动物的慢性、退行性骨关节疾病,也称退行性关节炎、增生性关节炎。它以软骨渐进性变性、软骨边缘骨赘形成及软骨下骨重塑为特点。主要临床表现为关节肿胀、慢性疼痛、僵硬且活动受限。OA常发于老龄动物,膝关节是骨关节炎最常波及的关节。兽医临床工作中,OA的确诊通常基于影像学检查(如X线片)和临床症状,但目前仍缺少可有效诊断OA的生物标志物。先前研究多集中于某一时间点的单一标志物,并没有对OA中这些标志物的变化趋势进行研究。因此,本研究分为离体试验、在体试验和临床试验三个部分,以SD大鼠和奶牛为研究对象,研究OA软骨损伤机制及骨关节炎发病过程中PⅡCP、CTX-Ⅱ和C2C生物标志物浓度变化。为筛选OA分子标志物提供理论依据,以实现OA病情的评估及早期诊断,为奶牛OA快速诊断技术提供理论基础,增加生产性能。本试验通过体内外方法模拟OA发生。离体试验使用14-24 d幼鼠进行软骨培养,试验前对细胞进行饥饿处理,使其同步化。之后,加入IL-1β处理软骨细胞0 h、12 h、24 h和48h诱导炎症模型模拟离体OA。通过Western-blot方法检测NF-κb信号转导通路及基质降解相关产物MMP-3、MMP-13、iNOS、p65和p-p65的蛋白变化;免疫荧光法检测p65核转位;生化试剂盒检测NO的浓度;使用ELISA方法检测细胞培养上清中Ⅱ型胶原相关分子标志物(CTX-Ⅱ、C2C和PⅡCP)含量变化趋势,探究OA时软骨损伤机制并初筛变化显著指标。在体试验分为两组,假手术组(Sham组)仅切开关节囊后缝合,手术组(ACLT组)切开关节囊后切断前十字韧带。两组于术后0、2、4、6、8、10周采样,取右后肢胫骨用于制作病理组织学、番红O切片;取血清,用于检测血清CTX-Ⅱ、C2C、PⅡCP的浓度。应用试验完达山奶牛场奶牛,进行跛行分级后分成两组:正常组和OA组,取血清检测CTX-Ⅱ、C2C、ⅡCP的浓度含量变化。使用Spearman方法分析标志物与疾病严重的的相关性,使用ROC曲线分析标志物对于诊断OA的价值。结果发现:1.IL-1β可以诱导NF-κb通路激活,继而引起软骨细胞产生炎症反应。2.软骨细胞产生炎症反应时,NF-κb通路的激活可以诱导MMP-3、MMP-13、iNOS的表达增加,使CTX-Ⅱ和C2C的浓度增加,导致细胞外基质发生破坏。3.ACLT模型中,随时间延长软骨基质破坏加重,血清CTX-Ⅱ和C2C的浓度也增加,且软骨OARSI评分变化与CTX-Ⅱ和C2C的浓度趋势存在相关性。4.ROC分析结果显示,CTX-Ⅱ和C2C诊断牛OA的AUC值较高,诊断价值较大。试验结果表明:IL-1β刺激软骨细胞后,NF-κb通路被激活,诱导通路下游联级反应,造成软骨损伤,导致Ⅱ型胶原降解增加。而且,ACLT大鼠血清中C2C和CTX-Ⅱ的浓度随软骨损伤程度加重而增加,其可作为诊断OA的潜在分子标志物;此外,OA牛血清中C2C和CTX-Ⅱ的含量也较正常增加,对于诊断奶牛OA价值较大。
Abstract
gu guan jie yan (Osteoarthritis,OA)shi yi chong chang fa sheng yu lao nian dong wu de man xing 、tui hang xing gu guan jie ji bing ,ye chen tui hang xing guan jie yan 、zeng sheng xing guan jie yan 。ta yi ruan gu jian jin xing bian xing 、ruan gu bian yuan gu zhui xing cheng ji ruan gu xia gu chong su wei te dian 。zhu yao lin chuang biao xian wei guan jie zhong zhang 、man xing teng tong 、jiang ying ju huo dong shou xian 。OAchang fa yu lao ling dong wu ,xi guan jie shi gu guan jie yan zui chang bo ji de guan jie 。shou yi lin chuang gong zuo zhong ,OAde que zhen tong chang ji yu ying xiang xue jian cha (ru Xxian pian )he lin chuang zheng zhuang ,dan mu qian reng que shao ke you xiao zhen duan OAde sheng wu biao zhi wu 。xian qian yan jiu duo ji zhong yu mou yi shi jian dian de chan yi biao zhi wu ,bing mei you dui OAzhong zhe xie biao zhi wu de bian hua qu shi jin hang yan jiu 。yin ci ,ben yan jiu fen wei li ti shi yan 、zai ti shi yan he lin chuang shi yan san ge bu fen ,yi SDda shu he nai niu wei yan jiu dui xiang ,yan jiu OAruan gu sun shang ji zhi ji gu guan jie yan fa bing guo cheng zhong PⅡCP、CTX-Ⅱhe C2Csheng wu biao zhi wu nong du bian hua 。wei shai shua OAfen zi biao zhi wu di gong li lun yi ju ,yi shi xian OAbing qing de ping gu ji zao ji zhen duan ,wei nai niu OAkuai su zhen duan ji shu di gong li lun ji chu ,zeng jia sheng chan xing neng 。ben shi yan tong guo ti nei wai fang fa mo ni OAfa sheng 。li ti shi yan shi yong 14-24 dyou shu jin hang ruan gu pei yang ,shi yan qian dui xi bao jin hang ji e chu li ,shi ji tong bu hua 。zhi hou ,jia ru IL-1βchu li ruan gu xi bao 0 h、12 h、24 hhe 48hyou dao yan zheng mo xing mo ni li ti OA。tong guo Western-blotfang fa jian ce NF-κbxin hao zhuai dao tong lu ji ji zhi jiang jie xiang guan chan wu MMP-3、MMP-13、iNOS、p65he p-p65de dan bai bian hua ;mian yi ying guang fa jian ce p65he zhuai wei ;sheng hua shi ji he jian ce NOde nong du ;shi yong ELISAfang fa jian ce xi bao pei yang shang qing zhong Ⅱxing jiao yuan xiang guan fen zi biao zhi wu (CTX-Ⅱ、C2Che PⅡCP)han liang bian hua qu shi ,tan jiu OAshi ruan gu sun shang ji zhi bing chu shai bian hua xian zhe zhi biao 。zai ti shi yan fen wei liang zu ,jia shou shu zu (Shamzu )jin qie kai guan jie nang hou feng ge ,shou shu zu (ACLTzu )qie kai guan jie nang hou qie duan qian shi zi ren dai 。liang zu yu shu hou 0、2、4、6、8、10zhou cai yang ,qu you hou zhi jing gu yong yu zhi zuo bing li zu zhi xue 、fan gong Oqie pian ;qu xie qing ,yong yu jian ce xie qing CTX-Ⅱ、C2C、PⅡCPde nong du 。ying yong shi yan wan da shan nai niu chang nai niu ,jin hang bo hang fen ji hou fen cheng liang zu :zheng chang zu he OAzu ,qu xie qing jian ce CTX-Ⅱ、C2C、ⅡCPde nong du han liang bian hua 。shi yong Spearmanfang fa fen xi biao zhi wu yu ji bing yan chong de de xiang guan xing ,shi yong ROCqu xian fen xi biao zhi wu dui yu zhen duan OAde jia zhi 。jie guo fa xian :1.IL-1βke yi you dao NF-κbtong lu ji huo ,ji er yin qi ruan gu xi bao chan sheng yan zheng fan ying 。2.ruan gu xi bao chan sheng yan zheng fan ying shi ,NF-κbtong lu de ji huo ke yi you dao MMP-3、MMP-13、iNOSde biao da zeng jia ,shi CTX-Ⅱhe C2Cde nong du zeng jia ,dao zhi xi bao wai ji zhi fa sheng po huai 。3.ACLTmo xing zhong ,sui shi jian yan chang ruan gu ji zhi po huai jia chong ,xie qing CTX-Ⅱhe C2Cde nong du ye zeng jia ,ju ruan gu OARSIping fen bian hua yu CTX-Ⅱhe C2Cde nong du qu shi cun zai xiang guan xing 。4.ROCfen xi jie guo xian shi ,CTX-Ⅱhe C2Czhen duan niu OAde AUCzhi jiao gao ,zhen duan jia zhi jiao da 。shi yan jie guo biao ming :IL-1βci ji ruan gu xi bao hou ,NF-κbtong lu bei ji huo ,you dao tong lu xia you lian ji fan ying ,zao cheng ruan gu sun shang ,dao zhi Ⅱxing jiao yuan jiang jie zeng jia 。er ju ,ACLTda shu xie qing zhong C2Che CTX-Ⅱde nong du sui ruan gu sun shang cheng du jia chong er zeng jia ,ji ke zuo wei zhen duan OAde qian zai fen zi biao zhi wu ;ci wai ,OAniu xie qing zhong C2Che CTX-Ⅱde han liang ye jiao zheng chang zeng jia ,dui yu zhen duan nai niu OAjia zhi jiao da 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自东北农业大学的张志恒，发表于刊物东北农业大学2019-08-27论文，是一篇关于骨关节炎论文,生物标志物论文,东北农业大学2019-08-27论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自东北农业大学2019-08-27论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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