高效液相色谱法在环境无机元素和植物活性成分测定中的应用研究

论文摘要

硼和硒都是生命必需的微量营养素,摄取过多或过少都不利于机体的健康,而环境中硼与硒的丰度最终决定了日常饮食的摄入量,因此建立一种适用于环境中硼、硒测定的分析方法尤为重要。银杏中的银杏酸具有致过敏性,是银杏叶提取物及制剂中的限量物质；同时,银杏酸又具有特定的抗菌、消炎、抗病毒等药理活性。因此开发一种简便、可靠的银杏酸分析方法是很重要的。本文应用HPLC法分别测定环境中的微量无机元素（硼和硒）以及银杏植物中的活性成分银杏酸。首先应用柱前衍生化-HPLC法对环境样品中的硼与硒进行了测定。以变色酸作为衍生化试剂,以水-甲醇（41：59）二元体系作为流动相,紫外检测波长为350nm,对样品中的硼进行测定。该法在0-6×10-5mol/L浓度范围内线性良好,硼的检出限为1×10-7mol/L,灵敏度较高。以DAN作为衍生化试剂,以环己烷-THF（97.5：2.5）二元体系作为流动相,荧光检测条件为激发波长380nm,发射波长为530nm,对样品中的硒进行测定。该法在0.25-2×10-9mol/L浓度范围内线性良好,硒的检出限为1.7x10-11mol/L,灵敏度较高。干扰试验中分别就常见的共存元素对硼、硒测定的影响进行了考察。在此基础上,应用优化后的方法测定了河流水样,测得硼含量在5.5～20.1μg/L之间,硒含量在2.0～5.5μg/L之间,与文献值相符。此外还测定了土壤样品中的微量硒,结果较满意。其次对银杏植物中银杏酸的HPLC分析方法进行研究。采用以甲醇为提取溶剂回流提取银杏酸,以正己烷为纯化试剂一次液液萃取的前处理方法制备了银杏酸样品,除杂效果理想。分别考察了流动相组成及pH值、检测波长等对各种银杏酸在色谱柱中分离效果的影响。优化后的色谱条件为：在C18柱为固定相的反相HPLC体系中,以甲醇-水（88：12,含5%乙酸）为流动相,310nm为银杏酸的检测波长。在一定的浓度范围内,5种银杏酸的线性良好,检出限在0.26-1.37mg/L之间,灵敏度高。样品的加标回收率为97.3%～102.6%,RSD为6.83%（n=5）,说明该法重复性好。运用该法分别测定了银杏叶、外种皮、白果以及银杏叶制剂中的银杏酸含量。实际测得外种皮中银杏酸含量最高,其次是银杏叶,白果中的银杏酸含量最低,结果与文献相符。研究表明该法简便、灵敏,适用于银杏酸样品的测定。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 符号说明
• 第Ⅰ部分 环境中微量元素硼、硒的HPLC分析法研究
• 第一章 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 硼的性状、用途与分析
• 1.2.1 硼及硼化合物的结构和性质
• 1.2.2 硼的应用、生理功能及毒性
• 1.3. 硒的性状、用途与分析
• 1.3.1 硒及硒化合物的结构和性质
• 1.3.2 硒的应用、生理功能及毒性
• 1.4 硼、硒的主要检测方法
• 1.4.1 分光光度法
• 1.4.2 荧光光度法
• 1.4.3 电化学分析法
• 1.4.4 原子吸收光谱法
• 1.4.5 电感耦合等离子体原子发射光谱/质谱法
• 1.4.6 中子活化分析法
• 1.5. 高效液相色谱法
• 1.5.1 柱前衍生化-高效液相色谱法的产生
• 1.5.2 柱前衍生化原理与方法分类
• 1.5.3 硼、硒分析中常用的衍生化试剂
• 1.5.4 联用技术的发展
• 1.6. 选题目的和内容
• 参考文献
• 第二章 硼的柱前衍生化-高效液相色谱法的研究
• 引言
• 2.1 实验方法
• 2.1.1 仪器与试剂
• 2.1.2 样品与流动相制备
• 2.1.3 色谱条件
• 2.1.4 实验流程
• 2.1.5 实验原理
• 2.1.6 定量方法
• 2.2 方法优化
• 2.2.1 流动相研究
• 2.3 方法学考察
• 2.3.1 标准曲线
• 2.3.2 检出限与重现性
• 2.4 干扰元素的允许量研究
• 2.5 环境水样中的硼测定
• 2.6 本章小结
• 参考文献
• 第三章 硒的柱前衍生化-高效液相色谱法的研究
• 引言
• 3.1 实验方法
• 3.1.1 仪器与试剂
• 3.1.2 样品与流动相制备
• 3.1.3 色谱条件
• 3.1.4 实验流程
• 3.1.5 实验原理
• 3.1.6 定量方法
• 3.2 方法优化
• 3.2.1 流动相研究
• 3.3 方法学考察
• 3.3.1 标准曲线
• 3.3.2 检出限与重现性
• 3.4 干扰元素的允许量研究
• 3.5 环境样品中的硒测定
• 3.5.1 河流中的硒含量测定
• 3.5.2 土壤样品中的硒含量测定
• 3.6 本章小结
• 参考文献
• 第四章 论文总结
• 4.1 本研究的成果
• 4.2 论文的不足与值得再深入研究的问题
• 第Ⅱ部分 银杏植物中银杏酸的HPLC测定研究
• 第一章 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 银杏酸的结构及毒性、用途
• 1.3 银杏酸的化学及光谱性质
• 1.4 银杏酸的主要检测方法
• 1.4.1 荧光分光光度法/紫外分光光度法
• 1.4.2 薄层色谱法（TLC）
• 1.4.3 气相色谱法（GC）
• 1.4.4 液相色谱法（LC）
• 1.5 高效液相色谱法（HPLC）
• 1.5.1 色谱条件
• 1.5.2 样品的前处理方法
• 1.5.3 银杏酸HPLC分析的检测方式
• 1.6 选题目的和内容
• 参考文献
• 第二章 银杏酸提取纯化及HPLC分析的应用研究
• 引言
• 2.1 实验方法
• 2.1.1 仪器与试剂
• 2.1.2 样品与流动相制备
• 2.1.3 色谱条件
• 2.1.4 实验流程
• 2.1.5 定量方法
• 2.2 方法优化
• 2.2.1 前处理方法的研究
• 2.2.2 色谱条件的选择
• 2.3 方法学考察
• 2.3.1 标准曲线
• 2.3.2 检出限与重现性
• 2.3.4 加标回收率
• 2.4 银杏酸样品测定
• 2.5 本章小结
• 参考文献
• 第三章 论文总结
• 3.1 本研究的成果
• 3.2 论文的不足与值得再深入研究的问题
• 硕士期间发表及待发表的文章
• 致谢