本文主要研究内容
作者于蒙蒙（2019）在《B亚型禽偏肺病毒的分离鉴定及致病性研究》一文中研究指出：禽偏肺病毒(Avian Metapneumovrus,aMPV)的自然宿主是火鸡,其次是鸡。aMPV感染火鸡导致火鸡鼻气管炎(Turkey rhinotracheitis,TRT),引起火鸡严重的呼吸道疾病。aMPV感染鸡导致鸡的肿头综合症(Swollen head syndrome,SHS),单一感染时死亡率较低(5%~10%),但引起产蛋量下降(10%~30%),其更大的危害在于aMPV感染后,常继发其它细菌感染,引起严重的呼吸道症状,死亡率高达25%。目前,除大洋洲以外的世界各地均有该病的报道。我国首次在1999年分离到aMPV,随后流行病学调查表明,我国部分养殖场aMPV的感染率相当高,该病对我国养禽业的危害日益加重。由于aMPV分离非常困难,所以国内关于aMPV的分子生物学特征及致病性鲜有研究,不利于该病的有效防控。本研究将疑似肿头综合症的鸡的鼻甲骨和肺脏研磨后分别种于Vero细胞,盲传5代,观察到有一份接种鼻甲骨样品的Vero细胞变圆、聚堆形成合胞体,具有aMPV典型的细胞病变(CPE)特征,将其命名为LN16。电镜观察负染的LN16分离株的病毒粒子呈现多形性,直径约为50-200 nm,偶见直径为500 nm的病毒粒子,具有典型的副黏病毒的形态特征;亚型特异性的RTPCR检测结果显示,LN16分离株仅扩增出了B亚型特异性条带;进一步扩增和测定了LN16分离株的G基因序列,分析表明其G基因与B亚型aMPV的同源性均高于93.8%,而与A、C和D亚型aMPV的同源性都低于63.7%;进一步利用B亚型aMPV特异性的阳性血清进行间接免疫荧光实验,结果显示感染LN16的Vero细胞有特异性的绿色荧光信号。综合以上结果,表明LN16分离株为B亚型aMPV。为了解LN16分离株的分子特征,设计合成了7对引物测定其全基因组序列。测序结果显示,LN16分离株基因组全长为13,513 bp,编码9个蛋白。将其全基因组序列提交至GenBank(登陆号:MH745147),该序列是第一个鸡源的B亚型aMPV的全基因组序列。与火鸡源B亚型aMPV分离株序列比较发现,LN16分离株的全基因组序列与火鸡源的同源性为97.6%,8个编码基因的同源性为95.1%-98.4%,相对保守,但基因间隔区出现碱基的插入和删除,存在明显差异。为了进一步评价LN16分离株对鸡的致病性,将LN16分别感染3、6、9和15周龄的SPF鸡。观察发现,感染后3-6 d的SPF鸡均出现流鼻涕、甩头、流眼泪及精神萎靡等临床症状,各组的发病率均在70%及以上;感染后2-5 d的SPF鸡出现排毒,第4 d排毒率最高,达到83.6%;感染后的2-5 d,在鼻甲骨、气管、喉头等上呼吸道组织中检测到病毒,偶尔也在免疫器官胸腺中检测到病毒;感染组SPF鸡的胸腺出血,鼻甲骨和肺脏出现炎症等病理变化。这些结果表明,LN16分离株对SPF鸡有明显的致病性。本研究成功地从发病鸡群中分离到一株B亚型aMPV,扩增获得首个鸡源B亚型aMPV的全基因组序列,该分离株对不同日龄的SPF鸡有明显的致病性,这些研究结果丰富了aMPV的流行病学资料,同时也为疫苗等防控产品的研制奠定了基础。
Abstract
qin pian fei bing du (Avian Metapneumovrus,aMPV)de zi ran su zhu shi huo ji ,ji ci shi ji 。aMPVgan ran huo ji dao zhi huo ji bi qi guan yan (Turkey rhinotracheitis,TRT),yin qi huo ji yan chong de hu xi dao ji bing 。aMPVgan ran ji dao zhi ji de zhong tou zeng ge zheng (Swollen head syndrome,SHS),chan yi gan ran shi si wang lv jiao di (5%~10%),dan yin qi chan dan liang xia jiang (10%~30%),ji geng da de wei hai zai yu aMPVgan ran hou ,chang ji fa ji ta xi jun gan ran ,yin qi yan chong de hu xi dao zheng zhuang ,si wang lv gao da 25%。mu qian ,chu da xiang zhou yi wai de shi jie ge de jun you gai bing de bao dao 。wo guo shou ci zai 1999nian fen li dao aMPV,sui hou liu hang bing xue diao cha biao ming ,wo guo bu fen yang shi chang aMPVde gan ran lv xiang dang gao ,gai bing dui wo guo yang qin ye de wei hai ri yi jia chong 。you yu aMPVfen li fei chang kun nan ,suo yi guo nei guan yu aMPVde fen zi sheng wu xue te zheng ji zhi bing xing xian you yan jiu ,bu li yu gai bing de you xiao fang kong 。ben yan jiu jiang yi shi zhong tou zeng ge zheng de ji de bi jia gu he fei zang yan mo hou fen bie chong yu Veroxi bao ,mang chuan 5dai ,guan cha dao you yi fen jie chong bi jia gu yang pin de Veroxi bao bian yuan 、ju dui xing cheng ge bao ti ,ju you aMPVdian xing de xi bao bing bian (CPE)te zheng ,jiang ji ming ming wei LN16。dian jing guan cha fu ran de LN16fen li zhu de bing du li zi cheng xian duo xing xing ,zhi jing yao wei 50-200 nm,ou jian zhi jing wei 500 nmde bing du li zi ,ju you dian xing de fu nian bing du de xing tai te zheng ;ya xing te yi xing de RTPCRjian ce jie guo xian shi ,LN16fen li zhu jin kuo zeng chu le Bya xing te yi xing tiao dai ;jin yi bu kuo zeng he ce ding le LN16fen li zhu de Gji yin xu lie ,fen xi biao ming ji Gji yin yu Bya xing aMPVde tong yuan xing jun gao yu 93.8%,er yu A、Che Dya xing aMPVde tong yuan xing dou di yu 63.7%;jin yi bu li yong Bya xing aMPVte yi xing de yang xing xie qing jin hang jian jie mian yi ying guang shi yan ,jie guo xian shi gan ran LN16de Veroxi bao you te yi xing de lu se ying guang xin hao 。zeng ge yi shang jie guo ,biao ming LN16fen li zhu wei Bya xing aMPV。wei le jie LN16fen li zhu de fen zi te zheng ,she ji ge cheng le 7dui yin wu ce ding ji quan ji yin zu xu lie 。ce xu jie guo xian shi ,LN16fen li zhu ji yin zu quan chang wei 13,513 bp,bian ma 9ge dan bai 。jiang ji quan ji yin zu xu lie di jiao zhi GenBank(deng liu hao :MH745147),gai xu lie shi di yi ge ji yuan de Bya xing aMPVde quan ji yin zu xu lie 。yu huo ji yuan Bya xing aMPVfen li zhu xu lie bi jiao fa xian ,LN16fen li zhu de quan ji yin zu xu lie yu huo ji yuan de tong yuan xing wei 97.6%,8ge bian ma ji yin de tong yuan xing wei 95.1%-98.4%,xiang dui bao shou ,dan ji yin jian ge ou chu xian jian ji de cha ru he shan chu ,cun zai ming xian cha yi 。wei le jin yi bu ping jia LN16fen li zhu dui ji de zhi bing xing ,jiang LN16fen bie gan ran 3、6、9he 15zhou ling de SPFji 。guan cha fa xian ,gan ran hou 3-6 dde SPFji jun chu xian liu bi ti 、shuai tou 、liu yan lei ji jing shen wei mi deng lin chuang zheng zhuang ,ge zu de fa bing lv jun zai 70%ji yi shang ;gan ran hou 2-5 dde SPFji chu xian pai du ,di 4 dpai du lv zui gao ,da dao 83.6%;gan ran hou de 2-5 d,zai bi jia gu 、qi guan 、hou tou deng shang hu xi dao zu zhi zhong jian ce dao bing du ,ou er ye zai mian yi qi guan xiong xian zhong jian ce dao bing du ;gan ran zu SPFji de xiong xian chu xie ,bi jia gu he fei zang chu xian yan zheng deng bing li bian hua 。zhe xie jie guo biao ming ,LN16fen li zhu dui SPFji you ming xian de zhi bing xing 。ben yan jiu cheng gong de cong fa bing ji qun zhong fen li dao yi zhu Bya xing aMPV,kuo zeng huo de shou ge ji yuan Bya xing aMPVde quan ji yin zu xu lie ,gai fen li zhu dui bu tong ri ling de SPFji you ming xian de zhi bing xing ,zhe xie yan jiu jie guo feng fu le aMPVde liu hang bing xue zi liao ,tong shi ye wei yi miao deng fang kong chan pin de yan zhi dian ding le ji chu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国农业科学院的于蒙蒙，发表于刊物中国农业科学院2019-07-05论文，是一篇关于亚型禽偏肺病毒论文,肿头综合症论文,分离鉴定论文,致病性论文,中国农业科学院2019-07-05论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国农业科学院2019-07-05论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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