论文摘要
研究目的和背景:活性氧（ROS）是生物体内的主要自由基,是一组含有化学性质活泼的含氧功能基团的化合物。它包括超氧化物、含氮氧化物、氢氧根基团、单线态氧及其它分子结构,如过氧化氢（H2O2）、过氧化亚硝酸盐,对大多数细胞都具有毒性作用。正常情况下,机体内ROS的产生和清除处于动态平衡状态。当机体处于氧化应激状态时,体内组织细胞ROS量会升高,超过机体的清除能力,导致组织脂质过氧化水平升高,引起DNA氧化损伤和蛋白质的表达异常,对机体造成损害。它在许多心肌损伤性疾病如心肌缺血再灌注损伤、心力衰竭、高血压病的发生发展过程中,扮演着重要角色。H2O2作为一种活性氧形式,具有强烈引发脂质过氧化的作用,几乎可与任何细胞成分发生反应,引起链式脂质过氧化反应,造成心肌细胞的凋亡和功能失调。姜黄素（curcumine）是从姜科植物姜黄（Curcuma longa L.）根茎中提取出来的一种酚类色素成分,由于其色泽稳定且毒性很低,目前已广泛应用于食品添加剂和染料中。众多的研究结果提示,姜黄素是以保护正常细胞免受各种不良因素的损伤为基础,发挥其抗炎、抗动脉粥样硬化、抗肿瘤、抗氧化等一系列药理作用,目前最引人注目的也是得到较多实验证明的是其自由基清除作用。姜黄素作为一种氧自由基清除剂,能显著的抑制活性氧,如超氧阴离子、过氧化氢、亚硝酸盐基团的产生。姜黄素对过氧化氢诱导的人成纤维细胞、内皮细胞损伤能发挥强有力的拮抗效应。姜黄素可使异丙肾上腺素诱导的大鼠心电图缺血性改变减轻,提高大鼠心肌耐缺氧能力,对大鼠心肌的缺血性损伤具有一定的保护作用,推测该保护作用的机制可能与其清除自由基功能有关。但到目前为止,姜黄素在体外细胞水平上,对心肌缺血性损伤的作用和机制并未得到证实。本实验拟通过乳鼠心肌细胞的体外培养,建立过氧化氢心肌损伤模型,观察姜黄素对过氧化氢诱导的乳鼠心肌细胞氧化损伤的作用,从而为姜黄素防治心血管疾病提供实验依据。研究方法:（1）进行乳鼠心肌细胞原代培养,随机分为空白对照组、氧化损伤对照组和不同浓度的姜黄素组;（2）使用MTT比色法（四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法）测定心肌细胞活性;（3）使用试剂盒进行心肌细胞乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）活性测定;（4）流式细胞术检测细胞凋亡。研究结果:（1）与正常组心肌细胞比较,H2O2组心肌细胞存活力明显下降,其OD值明显低于正常对照组;除低剂量姜黄素组外,中、高剂量姜黄素组能显著地提高H2O2所致心肌细胞损伤的心肌存活率,且随着姜黄素浓度的增加,心肌细胞的OD值逐渐升高。（2）H2O2组的SOD活性明显低于正常对照组,而MDA及LDH显著高于正常对照组;所有剂量姜黄素组均能减少H2O2损伤的心肌细胞LDH和MDA的生成,提高SOD的活性,上述变化随姜黄素剂量的增加而更趋明显。（3）H2O2损伤组心肌细胞凋亡率明显高于正常对照组,而H2O2和50μmol/L姜黄素同时作用组,细胞凋亡率比H2O2损伤组明显下降。结论:姜黄素对H2O2损伤的心肌细胞具有保护作用,并呈剂量依赖性,其作用机制可能与姜黄素清除氧自由基有关。