大鼠杏仁体和海马结构内CREB对应激刺激的调节作用

论文题目: 大鼠杏仁体和海马结构内CREB对应激刺激的调节作用

论文类型: 博士论文

论文专业: 解剖与组织胚胎学

作者: 高璐

导师: 彭裕文,李瑞锡,王劼

关键词: 杏仁体,海马结构,强迫性游泳,受体,谷氨酸能神经元,大鼠

文献来源: 复旦大学

发表年度: 2005

论文摘要: 杏仁体(amygdala, AM)和海马结构(hippocampal formation, HF)是与情绪活动和学习记忆相关的重要结构,AM和HF内的转录因子cAMP反应元件结合蛋白(CREB)被证实在记忆调节过程中发挥了重要作用。CREB是一种核蛋白,是刺激诱导转录因子的主要成员,多种刺激都可导致CREB的活化,形成磷酸化的CREB(pCREB)。神经生理及神经药理学的研究表明,在突触可塑性的长时程效应阶段,CREB可调节基因转录、参与蛋白质合成,从而维持突触效率的长期持续改变。但是形态上,目前还不清楚AM、HF等脑区内的CREB究竟在哪类神经元中表达而发挥作用。为此本实验准备进一步探讨:① 应激刺激后AM和HF内pCREB表达量的变化;② pCREB在什么神经元中表达;③ pCREB的表达与NMDA受体活性的关系。本实验作了如下工作: 1.对SD大鼠强迫性游泳(FS),建立情绪性应激刺激动物模型,以正常同类大鼠为对照,用免疫细胞化学单标法、蛋白免疫印迹实验,以抗pCREB抗体观察检测pCREB免疫阳性神经元在对照组和实验组大鼠AM各亚核团和HF内的分布特征及变化规律;用免疫细胞化学双标法和免疫电镜,以抗pCREB、抗Glu和抗PV抗体,分析了表达pCREB神经元的类型。结果显示:①FS刺激后,pCREB免疫阳性细胞核在AM的外测核(LA)、基底外侧核(BL)、中央核(Ce)以及HF的齿状回(DG)和CA3区的数量明显增加。FS 1h后Ce内pCREB阳性细胞核数目最多,为1082±229个/mm~2;而LA内的pCREB阳性细胞核数目变化最大,对照组为578±106个/mm~2;而FS 15min后则为1078±338个/mm~2。在DG颗粒细胞层内,对照组的pCREB阳性细胞核数目很少,成线状散在分布;而FS后pCREB阳性细胞核的数目明显增多,成带状密布于整个DG颗粒细胞层。FS后,AM各亚核团内pCREB免疫阳性细胞核的变化趋势具有时间相关性,本实验观察到,LA内的pCREB表达量在FS后15min达到高峰,而Ce内的pCREB则在FS后1h表达量最高。免疫蛋白印迹的实验结果与上述变化密切相关,显示,FS刺激后AM各亚核和HF内pCREB总蛋白量都明显增加。②免疫细胞化学双标结果显示,在LA、BL、Ce、DG和CA3区中,呈绿色荧光的pCREB免疫阳性神经元细胞核,位于呈红色Glu免疫阳性的神经元胞质内,而未见其在

论文目录:

英文缩略词

中文摘要

英文摘要

引言

第一部分 强迫性游泳后大鼠杏仁体和海马结构内pCREB免疫阳性物质的表达

前言

材料和方法

1 实验对象

2 动物模型

3 实验分组

4 免疫细胞化学实验

4.1 组织准备

4.2 试剂

4.3 酶免疫细胞化学单标法

4.4 荧光免疫细胞双标法

4.5 电镜的酶免疫细胞化学实验

5 蛋白免疫印迹

5.1 裂解组织提取蛋白

5.2 蛋白浓度测定

5.3 SDS-聚丙酰胺凝胶电泳

6.统计学处理

结果

1.AM和HF内pCREB免疫阳性细胞核

1.1 正常组脑内pCREB免疫阳性细胞核

1.1.1 AM

1.1.2 HF

1.1.3 大脑皮质

1.2 FS后AM和AM等脑区pCREB免疫阳性物质表达上调

1.2.1 AM

1.2.2 HF

1.2.3 大脑皮质

2.AM和HF神经元内pCREB免疫阳性物质与神经递质共表达

2.1 Glu-免疫阳性神经元

2.2 PV-免疫阳性神经元

2.3 pCREB免疫阳性物质与Glu共存

2.4 pCREB免疫阳性物质不与PV共存

3 免疫电镜

3.1 pCREB免疫阳性细胞的超微结构

3.2 pCREB和PV免疫双标的超微结构

讨论

第二部分 谷氨酸抑制剂对于大鼠FST行为的影响及pCREB表达的变化

前言

材料和方法

1 实验对象

2 动物模型

3 实验分组

4 免疫细胞化学实验

4.1 组织准备

4.2 酶免疫细胞化学实验

5 蛋白免疫印迹

5.1 裂解组织提取蛋白

5.2 蛋白浓度测定

5.3 SDS-聚丙酰胺凝胶电泳

6 统计学分析

结果

1 谷氨酸抑制剂对大鼠FST的影响

2 谷氨酸抑制剂对HF和AM内pCREB水平的影响

2.1 免疫细胞化学实验结果

2.2 蛋白免疫印迹结果

讨论

小结

参考文献

综述

在学期间发表论文

致谢

论文独创性声明

发布时间: 2005-09-19

参考文献

• [1].人类基因CREB4和4.10的克隆和功能研究[D]. 曹根涛.复旦大学2004
• [2].NR2B介导的泛素-蛋白酶体系统成分的功能障碍对CREB活性的影响[D]. 谢敏.华中师范大学2014
• [3].舒郁颗粒对抑郁模型大鼠行为学及海马组织内BDNF、CREB、Bcl-2表达的影响[D]. 应达时.长春中医药大学2015
• [4].CREB-1载体的构建及其对HSC中内源性TGF-β3分泌的影响[D]. 黄金明.华中科技大学2012
• [5].视黄酸调节促肾上腺皮质激素释放激素转录的分子机制[D]. 赵君.中国科学技术大学2013
• [6].US28调节MIE基因介导的人巨细胞病毒活化的通路研究[D]. 温冬青.中国人民解放军军事医学科学院2009

相关论文

• [1].海马NMDA受体对严重烫伤HPA轴兴奋性的影响及其机制研究[D]. 陆建华.第三军医大学2002
• [2].酒精依赖大鼠脑CREB信号通路及血浆应激激素水平变化的研究[D]. 李菁.南京医科大学2003
• [3].大鼠脑纹状体边缘区逃避性学习记忆功能机制的研究[D]. 江刚.第一军医大学2004
• [4].急、慢性铅暴露引起仔鼠海马NMDAR亚单位、[Ca～（2+）]_i、凋亡的变化与学习记忆损伤的关系[D]. 高明奇.中国医科大学2004
• [5].抗抑郁药帕罗西汀对应激所致大鼠海马组织学和行为学改变的影响及与CREB相关信号通路的关系[D]. 郑晖.汕头大学2005
• [6].大鼠脑纹状体边缘区多巴胺受体及其与学习记忆功能的研究[D]. 陈立学.第一军医大学2005
• [7].应激对大鼠海马CA1区突触可塑性及学习记忆影响的研究[D]. 杨建立.中南大学2006
• [8].大鼠海马和杏仁体记忆相关受体和基因的研究[D]. 张雪寒.复旦大学2005
• [9].杏仁体基底外侧核β受体在声音条件性恐惧记忆中的作用[D]. 刘欣秋.复旦大学2005
• [10].ERK-CREB信号传导通路参与神经病理性疼痛的形成与维持[D]. 宋雪松.吉林大学2007

标签：杏仁体论文;  海马结构论文;  强迫性游泳论文;  受体论文;  谷氨酸能神经元论文;  大鼠论文;