新疆石榴果实提取物体外抗MCF-7人乳腺癌细胞作用的研究

论文摘要

目的:测定四种新疆石榴的物理品质和几种主要营养成分,制备石榴果实多酚提取物并优化新疆石榴皮多酚类成分的最佳提取工艺,对新疆石榴果实提取物进行体外抗乳腺癌作用测定,并初步探讨抗肿瘤机理。方法:①测定四种新疆石榴的物理品质（果形指数、平均单果重、百粒浆果重、籽粒色泽、皮色）和几种主要营养成分（可溶性固形物浓度、pH值、总糖、维生素C、黄酮）。②在单因素实验基础上,以多酚得率为指标,采用正交试验设计优化新疆石榴皮多酚类成分的提取工艺。③采用MTT比色法、流式细胞检测术等方法观察新疆石榴果实提取物对MCF-7人乳腺癌细胞的形态学影响,检测体外增殖抑制率、细胞周期和凋亡等,以探讨其体外抗肿瘤作用及初步的作用机制。结果:①四种石榴物理品质的差异:和田甜石榴的果形指数和平均单果重最大;和田酸石榴的百粒浆果重最大;四种石榴籽粒色泽相近,其中和田酸石榴皮色最为鲜艳。对于所测的营养成分中,可溶性固形物为喀什酸石榴>喀什甜石榴=和田甜石榴>和田酸石榴;pH值和总糖均为和田甜石榴>喀什甜石榴>喀什酸石榴>和田酸石榴;维生素C和黄酮均为喀什甜石榴>和田甜石榴>喀什酸石榴>和田酸石榴。②优选出的最佳提取工艺为:乙醇浓度为60%,提取温度为室温,料液比l:24,浸提0.5小时。③MTT比色试验结果表明,八种石榴提取物在高浓度（8mg/ml）作用MCF-7细胞24h、48h、72h,抑制率在65.96%～99.34%之间,具有明显抑制MCF-7细胞生长作用（p<0.05）。④流式细胞仪的分析结果表明,P-1使MCF-7细胞生长停滞在GO/G1期而诱导MCF-7细胞凋亡。Annexin V-FITC/PI双染结果显示,P-1在0.5mg/ml时作用48h诱发46.9%MCF-7细胞凋亡,2mg/ml时诱发62.4%MCF-7细胞凋亡,8mg/ml时诱发70.3%MCF-7细胞凋亡,说明P-1具有诱导MCF-7细胞凋亡的作用。结论:①喀什石榴各种营养成分含量优于和田石榴,为今后进一步开发石榴资源提供理论依据。②优化的提取工艺稳定、可行。③八种石榴提取物均有不同程度抑制MCF-7细胞增殖作用,其中P-1的抗乳腺癌作用机制可能是诱导MCF-7细胞凋亡。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 实验内容
• 1. 新疆石榴果实多酚提取物的制备
• 1.1 引言
• 1.2 材料、仪器与试剂
• 1.3 试验方法与结果
• 1.4 讨论
• 2. 新疆石榴果实提取物体外抗MCF-7 人乳腺癌细胞作用的研究
• 2.1 引言
• 2.2 材料与仪器
• 2.3 实验流程、实验原理及实验方法
• 2.4 实验结果
• 2.5 讨论
• 小结
• 致谢
• 参考文献
• 综述 石榴的药理研究进展
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文
• 导师评阅表