雷公藤多甙防治大鼠EAE疗效及机制探讨

论文摘要

目的：观察雷公藤多甙（tripterygium wifordii polyglycosidium，TWP）对Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE）干预的影响，比较两组不同剂量TWP与泼尼松（prednisone，PRD）的疗效差别，探讨其可能的免疫调节机制。方法：用豚鼠脊髓匀浆（guinea pig spinal cord homogenate，GP-SCH）+完全福氏佐剂（complete freund’s adguvant，CFA）十百日咳疫苗原浆液（pertussis vaccine，PV）致敏Wistar大鼠，建立EAE模型。并选用TWP、PRD干预治疗。65只Wistar大鼠随机分成5组：对照组5只（用生理盐水代替GP-SCH），EAE组、TWPⅠ组（EAE+TWP10mg／kg·d）、TWPⅡ组（EAE+TWP 30 mg／kg·d）和PRD组（EAE+PRD 5mg／kg·d）各15只。TWPⅠ组、TWPⅡ组、PRD组大鼠在抗原免疫后第1天开始，分别给予相应药物干预，每天一次，直到处死前一天。对照组在免疫后15天全部处死。其余四组在抗原免疫后根据处死时间不同又各自在组内分为第11天、第15天、第21天处死三个亚组。观察各组大鼠发病情况并进行神经功能评分。取大鼠脑和脊髓组织切片进行检测：采用苏木素—伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色+罗克沙尔坚牢蓝（luxol fast blue，LFB）髓鞘染色，在光镜下进行炎性病灶计数。免疫组化方法检测各组大鼠脑组织内核转录因子-κB p65 （nuclear factor KappaB，NF-κB p65）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）的表达情况。采用SPSS13.0软件包进行统计学分析。结果：1．对照组大鼠发病率为0％。EAE组大鼠发病率为93.3％，约抗原免疫后11天开始发病，第15天临床症状达高峰。从发病开始，持续10～12天后病情缓解。免疫后第15天组织病理学改变也最明显。光镜下可见中枢神经系统（central nervous，CNS）白质内小血管周围袖套样炎性细胞浸润，部分可见神经元变性、坏死以及脱髓鞘改变。干预组大鼠发病率较低（TWPⅠ组73.3％，TWPⅡ组53.5％，PRD组46.7％），潜伏期相对延长1～2天。临床症状明显减轻。CNS内炎性病灶明显减少（干预组与EAE组比较有显著差异，P＜0.05；TWPⅡ组、PRD组分别与TWPⅠ组比较有显著差异，P＜0.05；TWPⅡ组与PRD组比较无显著差异，P＞0.05）。2．EAE组：与对照组比较，第11天EAE组大鼠脑组织内NF-κB p65、TNF-α表达水平明显增高，差异有显著性（P＜0.05）。与第11天比较，第15天大鼠脑组织内NF-κB p65、TNF-α表达水平明显增高，差异有显著性（P＜0.05）。与第15天比较，第21天NF-κB p65、TNF-α表达水平明显降低，差异有显著性（P＜0.05）。3．TWPⅠ组、TWPⅡ组、PRD组：与对照组比较，第11天各干预组大鼠脑组织内NF-κB p65、TNF-α表达水平明显增高，差异有显著性（P＜0.05）。与第11天比较，第15天大鼠脑组织内NF-κB p65、TNF-α表达水平明显增高，差异有显著性（P＜0.05）。与第15天比较，第21天NF-κB p65、TNF-α表达水平明显降低，差异有显著性（P＜0.05）。与同期EAE组比较，各干预组大鼠脑组织内NF-κB p65、TNF-α表达水平明显降低，差异有显著性（P＜0.05）。与同期TWPⅠ组比较，TWPⅡ组、PRD组大鼠脑组织内NF-κB p65、TNF-α表达水平降低更明显，均有显著性差异（P＜0.05）。TWPⅡ组与PRD组比较，差异无显著性（P＞0.05）。结论：1．NF-κB p65、TNF-α可能参与EAE发病。2．TWP能有效干预EAE大鼠发病，在一定程度上呈剂量相关性，其机制可能与下调NF-κB p65、TNF-α表达有关。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩写词简表
• 前言
• 第一章 材料与方法
• 1.1 实验材料和仪器
• 1.2 实验步骤和方法
• 1.3 统计分析
• 第二章 结果
• 2.1 临床发病情况及神经功能评分
• 2.2 病理观察结果
• 2.3 免疫组化结果
• 2.4 图和表
• 第三章 讨论
• 3.1 Wistar大鼠EAE模型的特点
• 3.2 NF-κB p56的生物学特性及对EAE模型的影响
• 3.3 TNF-α的生物学特性及对EAE模型的影响
• 3.4 雷公藤、泼尼松对EAE模型的影响
• 第四章 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢