胡柚平衡糖尿病ICR小鼠血糖功能及其途径的初步研究

论文摘要

胡柚为我国特有的柑橘品种,风味独特,营养丰富。民间关于糖尿病人吃胡柚血糖不会升高的说法早有流传,但是一直没有科学依据。本工作初步研究了胡柚平衡血糖的功效及其作用原理。通过高效液相色谱等方法测定胡柚果肉中的糖类物质和类黄酮化合物含量（干物质含量）：总糖520.07±23.70mg/g,葡萄糖94.05±5.28mg/g,蔗糖308.38±10.02mg/g,果糖116.80±4.12mg/g；总黄酮11.03±0.13mg/g,橙皮苷2.23±0.09mg/g,柚皮苷2.79±O.02mg/g.表明胡柚含有大量的使血糖升高的物质和较丰富的类黄酮化合物。以四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠为实验对象,研究食用不同剂量的胡柚果肉对糖尿病小鼠空腹血糖和肝糖原含量、肝脏各项氧化指标（超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）含量）、糖尿病小鼠生长情况和脏器指数的影响。结果表明虽然胡柚含有大量升高血糖的物质,但是糖尿病小鼠每日食用4g/kg（相当于成人每日食用2个胡柚）以下的胡柚仍可保持血糖平衡,改善受损的口服糖耐量。每日食用8g/kg（相当于成人每日食用4个胡柚）以下的胡柚能增加肝糖原的含量,降低肝脏／体重比,减少脂肪在肝脏的堆积。每日食用8g/kg（相当于成人每日食用4个胡柚）以下的胡柚能增加肝组织中SOD和GSH-Px活力,4g/kg（相当于成人每日食用2个胡柚）以下的胡柚能将SOD活力恢复到正常水平,2g/kg（相当于成人每日食用1个胡柚）以下的胡柚能将GSH-Px舌力恢复到正常水平,同时降低MDA含量。动物实验结果表明适量食用胡柚能够平衡糖尿病小鼠的血糖,增加肝糖原的贮存,改善肝脏氧化应激。将胡柚果肉分成5个不同极性的组分,通过α-葡萄糖苷酶抑制剂模型,考察各组分对α-葡萄糖苷酶活性的影响。结果表明正丁醇组分对α-葡萄糖苷酶具有一定的抑制作用,抑制类型为竞争性抑制,半抑制浓度（IC50）为25.42±0.45mg/ml.通过3T3-L1脂肪细胞模型,考察胡柚极性组分对脂肪细胞摄取和消耗葡萄糖以及脂肪细胞白介素-6（IL-6）、游离脂肪酸（FFA）水平的影响。二氯甲烷组分、水组分（>10mg/L）和乙酸乙酯组分（100mg/L）能够促进脂肪细胞葡萄糖的摄取；正丁醇组分、水组分和橙皮苷（>1mg/L的）均能显著降低脂肪细胞IL-6水平,二氯甲烷组分和乙酸乙酯组分（>10mg/L的）能够显著降低脂肪细胞IL-6水平；二氯甲烷组分、乙酸乙酯组分、水组分（>10mg/L的）和柚皮苷（100mg/L）能够降低脂肪细胞FFA水平。结果表明胡柚中某些组分能够促进脂肪细胞对葡萄糖的摄取,降低脂肪细胞炎症因子水平。通过本研究工作,证实胡柚具有平衡血糖的功能,能够增加糖尿病小鼠肝糖原的贮存、改善肝脏的氧化应激,糖尿病患者可以适量食用胡柚（成人每天1-2个）。胡柚平衡血糖的功能可能是通过：促进脂肪细胞对葡萄糖的吸收、降低脂肪细胞IL-6和FFA水平等方面发挥作用的。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 縮略词
• 第一章 文献综述
• 1 胡柚
• 2 柑橘属植物与糖尿病研究进展
• 2.1 柑橘属植物的抗糖尿病功能
• 2.2 柑橘中降血糖成分的研究进展
• 2.2.1 柑橘果实精油降血糖作用研究
• 2.2.2 柑橘果实类黄酮化合物的降血糖作用研究
• 2.2.3 柑橘果实膳食纤维的降血糖作用研究
• 2.2.4 柑橘中其他物质的降血糖作用研究
• 3 控制血糖成分的筛选
• 3.1 离体模型
• 3.1.1 酶抑制剂模型
• 3.1.2 细胞模型
• 3.2 整体模型
• 4 立题依据、意义和主要研究内容
• 4.1 立题依据和意义
• 4.2 主要研究内容
• 第二章 胡柚主要成分含量的测定及不同极性组分分离
• 1 材料与方法
• 1.1 材料与试剂
• 1.1.1 材料
• 1.1.2 试剂
• 1.1.3 仪器与设备
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 胡柚中糖类物质含量的测定
• 1.2.2 胡柚中黄酮类化合物含量的测定
• 1.2.3 胡柚中不同极性组分的粗分离
• 2 结果与讨论
• 2.1 胡柚果肉中糖类物质的含量
• 2.2 胡柚果肉中黄酮类物质的含量
• 2.3 胡柚不同极性组分的含量
• 3 结论
• 第三章 胡柚对糖尿病小鼠平衡血糖作用的研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料与试剂
• 1.1.1 材料
• 1.1.2 试剂
• 1.1.3 仪器与设备
• 1.2 方法
• 1.2.1 糖尿病小鼠模型的建立
• 1.2.1.1 模型的建立
• 1.2.1.2 实验动物分组
• 1.2.2 糖耐量试验
• 1.2.3 主要生化指标的测定
• 1.2.4 统计方法
• 2 结果与讨论
• 2.1 胡柚对糖尿病小鼠空腹血糖和糖耐量的影响
• 2.1.1 胡柚对糖尿病小鼠空腹血糖的影响
• 2.1.2 胡柚对糖尿病小鼠糖耐量的影响
• 2.2 胡柚对糖尿病小鼠体重的影响
• 2.3 胡柚对糖尿病小鼠肝脏/体重比值的影响
• 2.4 胡柚对糖尿病小鼠肝糖原含量的影响
• 2.5 胡柚对肝脏氧化应激的影响
• 2.5.1 胡柚对糖尿病小鼠肝脏蛋白质浓度的影响
• 2.5.2 胡柚对糖尿病小鼠肝脏组织中SOD、GSH-Px活力和MDA含量的影响
• 3 结论
• 第四章 胡柚对A-葡萄糖苷酶活性的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 试剂
• 1.3 仪器与设备
• 1.4 方法
• 1.4.1 α-葡萄糖苷酶反应体系的建立
• 1.4.2 抑制剂浓度对α-葡萄糖苷酶活性的影响
• 1.4.3 抑制剂作用时间对α-葡萄糖苷酶活性的影响
• 1.4.4 抑制作用类型的确定
• 2 结果与讨论
• 2.1 胡柚不同极性组分对α-葡萄糖苷酶的抑制作用
• 2.2 正丁醇组分浓度对α-葡萄糖苷酶活性的影响
• 2.3 抑制剂作用时间对α-葡萄糖苷酶活性的影响
• 2.4 胡柚正丁醇组分对α-葡萄糖苷酶的抑制作用类型
• 3 结论
• 第五章 脂肪细胞模型对胡柚中平衡血糖组分的筛选
• 1 材料与方法
• 1.1 材料与试剂
• 1.1.1 材料
• 1.1.2 试剂
• 1.1.3 仪器与设备
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 胡柚不同极性组分对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取的影响
• 1.2.2 胡柚不同极性组分对3T3-L1脂肪细胞IL-6和FFA含量的影响
• 1.2.3 统计方法
• 2 结果与讨论
• 2.1 3T3-L1前脂肪细胞和诱导分化后的形态变化
• 2.2 胡柚不同极性组分对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取的影响
• 2.3 胡柚不同极性组分对3T3-L1脂肪细胞IL-6和FFA含量的影响
• 2.3.1 胡柚不同极性组分对3T3-L1脂肪细胞IL-6含量的影响
• 2.3.2 胡柚不同极性组分对3T3-L1脂肪细胞FFA含量的影响
• 3 结论
• 参考文献
• 全文结论
• 致谢