王咸寿唐敏王小英冯秋芳
(海南海口医学院生物技术专业实验室571199)
【摘要】目的探讨海南省屯昌县育龄夫妇β-地中海贫血(β-地贫)的基因分型及频率情况。方法以血液学表型MCV≤85f1的受检者为疑似地贫患者，应用荧光PCR溶解曲线法分别分析疑似地贫患者的β-基因突变类型。结果1000例受检样本中，经基因检测检出β-地贫基因阳性59例,检出率为5.90%。通过溶解曲线分析，发现5种常见类型：CD41/42(-TTCT)，-28(A＞G)，IVS-Ⅱ-654，CD71-72(+A)，CD17(A＞T)。结论海南省屯昌县β-地中海贫血携带率比较高，应加强该地区地贫婚前及孕前的筛查，以降低地贫重症患儿的出生，提高该地区人口质量。
【关键词】β-地中海贫血基因型基因突变
【中图分类号】R556【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）18-0123-02
地中海贫血(Thalassemia,简称地贫)是由于珠蛋白基因发生缺陷，致使珠蛋白链合成减少或缺如而导致的一组严重危害人类健康的遗传性疾病。我国南方的广大地区是地贫的高发区，其中尤以广西、广东、海南为甚。地中海贫血基因携带者婚配的下一代有1/4的机会罹患严重溶血性贫血症状的重型地中海贫血。目前，对重型地中海贫血尚无有效的治疗方法，只有通过遗传筛查和产前基因诊断，预防血红蛋白Bart's水肿胎儿和重型β地中海贫血患儿的出生，是控制该病发生的唯一有效措施[1-3]。为此，本研究对地中海贫血基因携带者进行了筛查和基因分型检测，旨在研究海南屯昌县地中海贫血的发病情况及其基因型分布情况，为地贫的预防及控制提供科学的依据。
1研究对象与方法
1.1研究对象
收集2013年5月至2013年7月在海南省屯昌县计划生育服务站接受优生优育服务项目的育龄夫妇外周血液样本共1000例。
1.2方法
1.2.1血细胞分析应用血细胞分析仪检测全血样本的红细胞平均体积(MCV)，应用毛细血管电泳法进行血红蛋白A2(HbA2)的测定。以血液学表型MCV≤85f1的受检者为疑似地贫患者，对疑似地贫患者进行基因检测。
1.2.2β-地贫的基因检测采用荧光PCR溶解曲线法对中国人群常见的β-珠蛋白基因的23个位点的24种突变，其余操作程序及结果分析均按照试剂盒(购自厦门致善生物有限公司)使用说明书进行操作。
2结果
2.1β-地贫基因携带率
1000例受检者经血液学表型初筛检出疑似地贫患者399例,后者经基因分析检出β-地贫基因阳性59例,检出率为5.90%，其中男性携带者为24例，女性携带者为35例，女性的携带率要高于男性。其中各种类型及基因突变频率见表1。
表159例β-地贫样本基因类型及频率分布表
3讨论
β-地中海贫血是由于β-珠蛋白链合成减少或缺失所引起的一种常染色体不完全显性遗传病。地中海贫血作为婚检产检必查项目，是因为地贫儿的出生会给家庭及夫妻带来严重的经济负担和心理压力，特别是重度β-地中海贫血儿，其刚出生时并无表现出明显的症状，但约三个月后则多表现为慢性进行性溶血性贫血，并渐渐引起一系列慢性症状飞[4]。而目前对于地贫患者又无有效的根治方法，因而关键措施是进行预防筛查，通过婚前、孕期或产前夫妇双方的筛查，从而降低起其发病率。
从本次筛查结果来看，海南省屯昌地区β-地贫基因的携带率为5.90%。其中以CD41/42杂合子突变频率最高(84.75%)，其次是-28突变(8.47%)，再次是IVS-Ⅱ-654、CD71-72和CD17的突变类型。提示此5种突变位点为海南地区最常见的β地中海贫血基因突变类型，与周代锋[5]、刘秀莲[6][7]等的报道相似。
目前，很多实验室采用MCV降低结合HbA2降低进行β-地贫的筛查，常以HbA2≥3.5%作为筛查β-地贫的临界值[8]。本研究应用MCV≤85的筛查标准进行β-地贫的筛查，初筛阳性率为39.90%，经基因检测，在399份疑似病例中共检出59份β-地贫样本，二者的结果较为一致。经基因检测阳性的59例β-地贫中绝大部分(91.53%)β-地贫标本HbA2水平升高，约有8.47%的β-地贫标本HbA2水平正常。此结果说明HbA2值在筛查中具有一定的应用性与局限性。
综上所述，海南省屯昌县育龄人群β-地贫具有较高的携带率，应加强该地区地贫预防和控制工作，加强地贫婚前及孕前的筛查，以降低地贫重症患儿的出生，对提高该地区人口质量具有重要的意义。
参考文献
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[6]刘秀莲,王洁,杨春,等.海口地区地中海贫血基因分型及频率的研究[J].中国优生与遗传杂志,2012,20(9):22-23.
[7]刘秀莲，王洁,赵振东等.海口地区89例地中海贫血基因型的研究[J].生命科学研究,2012，16(5)：420-422.
[8]刘丹，李雪丹.MCV、MCH、RBC计数和血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的诊断价值[J].中国妇幼保健，2010,25(13)：1857-1859.
基金:海南省重点科技项目((No.ZDXM20100096)资助