论文摘要
目的:研究宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)大鼠出生后不同阶段胰岛功能以及胰岛素敏感性的变化特点,探讨IUGR与2型糖尿病之间的内在联系。方法:1、采用营养不良法(妊娠11天起予正常50%饲料)建立IUGR大鼠模型,以出生后不同阶段(1天、3周、7周、10周、15周及36周)雄性大鼠为研究对象,通过称量体重、胰重,并计算胰重/体重比值等手段,观察其生长发育状况。2、运用抗胰岛素抗体免疫组化染色法,对IUGR大鼠出生不同阶段胰腺组织进行形态学及量化分析,了解不同阶段胰岛形态和胰岛素表达的变化。3、采用腹腔糖耐量试验(intraperitoneal glucose tolerance test,IPGTT)及胰岛素释放试验(insulin releasing test,IRT),测定糖负荷后不同时点血糖和胰岛素的水平,检测IUGR大鼠出生不同阶段糖耐量及胰岛素释放的变化。4、以胰岛分离纯化技术获得IUGR大鼠出生不同阶段的胰岛,进行胰岛体外葡萄糖刺激下胰岛素释放(glucose-stimulated insulinsecretion,GSIS)试验,采用放射免疫法(Radioimmunoassay,RIA)检测上清中胰岛素浓度,以评价胰岛体外分泌功能。5、运用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerasechain reaction,RT-PCR)对第36周IUGR大鼠胰腺组织胰岛素合成相关基因进行检测,以进一步探讨胰岛细胞功能异常的机制。6、采用腹腔胰岛素耐量试验(insulin tolerance test,ITT),测定胰岛素负荷后不同时点的血糖值,以了解IUGR大鼠出生不同阶段胰岛素敏感性的变化。结果:1、IUGR组大鼠出生时体重、胰重和胰重/体重比值均显著低于正常组(P<0.001);出生后体重逐渐追赶,但胰重及胰重/体重比值始终低于正常组(P<0.05)。2、IUGR组新生鼠胰腺组织中胰岛素阳性表达细胞面积及胰岛素染色阳性率均明显小于正常组(P<0.01);胰岛素阳性染色面积随年龄逐渐增大,至36周时IUGR组大鼠胰岛素阳性面积与正常组已无明显差异,但胰岛平均染色光密度显著降低(P<0.05)。3、IUGR组新生鼠空腹血糖及胰岛素水平均低于正常新生鼠,但糖负荷后120min和180min血糖值明显高于正常组(P<0.05)。随年龄增长,IUGR组大鼠逐渐出现糖耐量减退,表现为糖负荷后血糖下降减慢,胰岛素早期出现代偿分泌增多,以15周为著(P<0.05),后期(36周)则分泌减少。4、胰岛体外GSIS功能检测结果提示,15周起IUGR组大鼠胰岛体外胰岛素刺激指数明显低于正常组(P<0.01)。5、对胰岛素合成相关基因检测发现,第36周IUGR组大鼠胰腺组织胰岛素基因1(Insulin1)表达明显减少(P<0.05),但其他基因[胰岛素基因2(Insulin2)、胰-十二指肠同源盒基因-1(pancreaticduodenal homeobox-1,PDX-1)]表达无明显差异。6、IUGR组大鼠第10周起即出现给予胰岛素负荷后血糖值下降迟滞于正常组(P<0.05),且随年龄增长逐渐明显。结论:1、IUGR大鼠胰腺发育受损,胰岛β细胞功能减退,随年龄增长逐渐出现糖耐量减低及胰岛素敏感性下降。2、IUGR大鼠后期胰岛素分泌减少可能与胰腺组织Insulinl基因表达下调有关。
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