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逼尿肌不稳定中Ryanodine受体通道与自发兴奋收缩关系的实验研究

2020-11-22阅读(790)

逼尿肌不稳定中Ryanodine受体通道与自发兴奋收缩关系的实验研究

论文摘要

目的:逼尿肌不稳定（detrusor instability;DI）中存在诸多因素变化,很多研究提示这种自发兴奋和收缩活性的升高有一定肌源性基础。逼尿肌肌浆网上的ryanodine受体（ryanodine receptor;RyR）是平滑肌细胞兴奋-收缩耦联中一个重要的有调节作用的Ca2+通道,它的作用包括在局部释放短暂的钙闪烁(Ca2+sparks),钙闪烁激活细胞膜上钙依赖钾通道(Ca2+-activated K+channel;Kca)和负反馈调节电压依赖型Ca2+通道(voltage-dependent Ca2+ channel;VDCC),从而也相应的调节逼尿肌的自发性收缩。在本研究中,比较分析了近端尿路结扎法及远端尿路结扎法形成两种梗阻后模型的特点,为DI模型选择应用提供依据;在引入cocktail神经受体阻滞剂混合液的基础上,调查它对DI离体逼尿肌自发收缩的改变特征,为真正形成去神经影响的肌源性收缩研究提供更好的基础;考察了RyR通道的mRNA、蛋白表达改变和RyR的相应功能变化,探讨它的改变与DI中膀胱自发收缩升高之间的可能联系。 材料和方法:①通过近端及远端尿道结扎两种方法形成Wistar大鼠的下尿路梗阻,约8周后进行充盈性膀胱测压确认DI大鼠模型。统计比较两种方法和正常对照的膀胱湿重、DI大鼠数量、被排除大鼠的数量（包括死亡、感染、结石和漏尿）、非DI大鼠数量、膀胱容量、最大膀胱压指标。②新鲜摘取大鼠膀胱,分离获得离体平滑细肌条,进行一定初张力下的等长收缩实验,收缩纪录包括电刺激下的收缩反应和不同混合液、试剂干预下离体孵浴的逼尿肌条自发收缩变化特征。③通过RT-PCR实验测定DI逼尿肌组织的RyR亚型表达;半定量RT-PCR实验和western blot分析确认RyR的mRNA及蛋白两种水平的表达在DI与正常对照之间的差异。 结果:①近端尿道结扎法DI模型的成功率高于远端尿道结扎法,但无统计差异;在排除的因素中,死亡、感染及结石的情况相似,而漏尿发生近端法显著低于远端法。②两方法DI模型的膀胱湿重、容量及最大膀胱压指标与正常对照组比,都存在差异

论文目录

  • 目录
  • 图形 索引
  • 表格 索引
  • 缩略词 索引
  • LOSS OF RYANODINE RECEPTER CHANNEL ASSOClATED WITH OVERACTlVE URINARY BLADDER SMOOTH MUSCLE CONTRACTIONS IN DETRUSOR INSTABILITY MODEL
  • ABSTRACT
  • 逼尿肌不稳定中RYANODINE受体通道与自发兴奋收缩关系的实验研究
  • 摘要
  • 逼尿肌不稳定中RYANODINE受体通道与自发兴奋收缩关系的实验研究
  • 前言
  • 第一部分 逼尿肌不稳定与自发兴奋收缩变化的研究
  • 材料与方法
  • 一、实验材料
  • 二、实验方法
  • 结果
  • 一、DI模型实验结果
  • 二、逼尿肌离体收缩实验结果
  • 讨论
  • 一、逼尿肌不稳定模型
  • 二、离体DI逼尿肌自发收缩特点及Cocktail混合液的影响
  • 结论
  • 第二部分 逼尿肌不稳定中RYANODINE受体表达变化的研究
  • 材料与方法
  • 一、实验材料
  • 二、实验方法
  • 结果
  • 一、RyR钙通道的mRNA表达
  • 二、RyR钙通道的蛋白表达结果
  • 讨论
  • 一、RyR的功能特点及参与的细胞信号传递过程
  • 二、DI逼尿肌组织中RyR表达改变可能的意义
  • 结论
  • 第三部分 RYR功能变化与逼尿肌自发兴奋收缩关系的研究
  • 材料与方法
  • 一、实验材料
  • 二、实验方法
  • 结果
  • 一、Nimodipine对自发收缩影响的结果
  • 二、Ryanodine对自发收缩影响的结果
  • 三、Caffeine对自发收缩影响的结果
  • 讨论
  • 一、VDCC通道与离体逼尿肌自发收缩
  • 二、RyR通道与离体逼尿肌自发收缩
  • 三、RyR通道功能异常与自发兴奋收缩升高的可能机制
  • 结论
  • 照片
  • 1.模型制作
  • 2.膀胱测压
  • 3.RyR表达
  • 4.机能实验
  • 致谢
  • 参考文献
  • 文献综述 RYANODINE受体在逼尿肌兴奋收缩中作用的研究进展
  • 摘要：
  • 1.Ryanodine受体钙通道
  • 2.膀胱平滑肌的兴奋收缩过程
  • 3.RyR在膀胱平滑肌兴奋收缩中参与机制
  • 4.RyR产生的钙闪烁在膀平滑肌的特征及调节
  • 5.展望
  • 参考文献
  • 攻读硕士学位期间以第一作者撰写论文情况

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