论文摘要
近几十年来,全球肥胖人口的比例逐年上升。肥胖不仅与许多疾病密切相关,而且还带来许多社会和心理问题,影响生活质量,降低预期寿命。各国学者和临床医师投入大量精力致力于肥胖症的研究,以寻找治疗肥胖症的新方法与新途径。 近 20 年来,许多临床报道表明,针刺治疗肥胖症具有一定疗效,但在作用机理方面研究较少。目前认为,电针治疗肥胖的机制主要是调节植物神经功能改变和神经肽的释放。不同穴位和刺激频率可以特异性地调节神经肽的释放。中医理论把足三里（ST36）定位于足阳明胃经之合穴,把三阴交（SP6）定位于足太阴脾经,针刺足三里对于胃肠运动的研究也有许多,但是对于电针能否调节外周脑肠肽的释放目前还是知之甚少。另外,解偶联蛋白 3（ucoupling protein 3, UCP3）作为增加能量消耗、减轻体重的新靶点是否参与电针减肥的机制目前还未有报道。 本研究使用食源性肥胖症（diet-induced obesity,DIO）大鼠模型和慢性饥饿（food-restriction,FR）大鼠模型,应用韩氏穴位神经刺激仪（Han’s Acupoint Nerve Stimulator,HANS）对大鼠模型进行电针治疗,观察大鼠的摄食量和体重变化,并检测胃内 ghrelin 的表达,下丘脑中神经肽 Y（NPY）、刺鼠相关蛋白（AgRP）基因的表达,腓肠肌中 UCP3的蛋白和基因的表达,以探讨肥胖产生和电针治疗的神经肽机制和能量代谢机制。 结果如下: 1.电针对食源性肥胖大鼠的作用 1.1 食源性肥胖大鼠的特征 100 只刚断乳、健康雄性 SD 大鼠,体重 4050g。将大鼠随机分为高脂饲料组（n=80）和普通对照组（n=20）。高脂饲料喂养组给予自制高脂饲料,普通对照组给予基础大鼠饲料。16 周后,高脂饲料组中,有 30 只成为食源性肥胖（DIO）大鼠,平均体重为 643.1±9.1g,明显高于普通对照组（573.9±10.4g,P<0.001）;10只低体重大鼠作为肥胖抵抗（diet resistant,DR）大鼠,平均体重为 473.4±8.0g,2明显低于普通对照组（P<0.001）。DIO 大鼠的平均体重比 DR 大鼠高出 35.8%。在第 17-20 周,DIO 大鼠日平均能量摄入（146.3±4.7 kcal/d）显著高于普通饲料组大鼠（119.7±2.3 kcal/d,P<0.001）和 DR 大鼠（102.0±4.2 kcal/d,P<0.01） 。DIO 大鼠体脂含量（肾周脂肪和大网膜脂肪）占体重的百分比（2.83±0.3%）明显高于普通饲料组大鼠（1.37±0.2%,P<0.001,n=5）和 DR 大鼠（1.7±0.2%,P<0.001,n=5）。DIO 大鼠血液中甘油三酯的含量（2.48±0.3mmol/l）显著高于 DR大鼠（1.26±0.2mmol/l P<0.05,n=5）。DIO 大鼠血糖升高不明显。免疫组织化学方法检测 DIO 大鼠胃体内 ghrelin 的表达（积分光密度值）显著低于 DR 组（22.1±8.4 vs. 56.4±8.0,P<0.05,n=5）。RT-PCR 结果显示 DIO 大鼠下丘脑中 NPY 和AgRP mRNA 比 DR 组都有所升高但无显著性差异。1.2 电针抑制 DIO 大鼠体重及摄食量经过 2Hz 电针治疗 4 周后, 电针治疗组的体重变化率（电针后体重-电针前体重/电针前体重×100%）与束缚组及对照组相比均有显著性差异 （分别为 P<0.05 和P<0.001,n=10）。电针组（2Hz EA group）体重下降至 683.5±13.13g,变化率为-0.3±0.8%;束缚组（restrain group）体重为 703.0±13.06g,变化率为 2.9±0.7%;对照组（control group）体重为 753.0±23.29g,变化率为 9.9±0.6%。束缚组体重明显低于对照组（P<0.05,n=10）。2Hz 电针组和束缚组的日平均摄食量分别为 23.3±0.4g 和 24.3±0.4g,都明显低于对照组（28.15±0.4g,P<0.001,n=10）。但 2Hz电针组和束缚组相比并无显著性差异。1.3 电针对 DIO 大鼠体脂、血脂、血糖的作用肾周和大网膜脂肪占体重的百分比,在电针治疗之后虽有减少的趋势,但没有显著性差别。血浆中甘油三酯的变化和外周脂肪相似。血糖在各组间无显著性差别。1.4 电针对 DIO 大鼠下丘脑内 NPY 及 AgRP mRNA 表达的影响电针之后 DIO 大鼠脑内 NPY mRNA 明显较对照组减少（0.42±0.02 vs. 0.52±0.01, P<0.05n,=5）,但是与束缚组相比无显著性差异。与对照组相比AgRP mRNA也有下降的趋势（0.47±0.05 vs. 0.57±0.01,n=5）,但无显著性差别。1.5 电针下调 DIO 大鼠胃中 ghrelin 的表达2Hz 电针组大鼠胃体内 ghrelin 免疫阳性细胞的积分光密度值较束缚组显著降低（22.1±8.4 vs. 56.4±8.0, P<0.05,n=5）。而束缚组和对照组之间无显著性差别 。2.电针对慢性饥饿大鼠的作用2.1 慢性饥饿大鼠的特征饥饿大鼠每天禁食 23h,给食 1h。给食 1 小时内的摄食量在前三天几乎增加一倍:从 4.540±0.39 g/h 增加到 9.000±0.33 g/h,明显高于普通对照组（3.0±1.2g3/h）。饥饿大鼠 1 小时内的摄食量为普通对照组大鼠全天摄食量的近 40%。饥饿大鼠的肾周脂肪占体重的百分比（0.17±0.02%）显著低于普通对照组大鼠（0.67±0.06%,P<0.001,n=5）。饥饿大鼠的血糖含量（6.50±0.2mmol/l）也显著低于普通对照组大鼠（9.32±0.62mmol/l）。血中甘油三酯下降并不显著。免疫组织化学结果显示饥饿大鼠胃体内的 ghrelin 比普通对照组显著增加（144.2±12.99vs.54.06±12.51,P<0.01,n=5）,RT-PCR 结果显示饥饿大鼠下丘脑中 NPY mRNA的含量显著高于普通对照组(0.54±0.01 vs. 0.42±0.02,P<0.01,n=5