论文摘要
目的：本课题旨在研究顺铂联合凋亡诱导核苷P5，共同作用于卵巢癌细胞顺铂敏感株COC1和顺铂耐药亚株COC1／DDP，观察P5是否对卵巢癌细胞敏感株具有化疗增敏作用及对耐药株具有逆转耐药作用，以及其作用与药物剂量的关系，为逆转卵巢癌顺铂耐药提供实验依据，为临床改善卵巢癌患者的预后提供新方法。方法第一部分：以台盼蓝活细胞计数法、MTT法、Hoechst染色法及流式细胞仪检测等方法，观察P5对卵巢癌细胞敏感株COC1的生长抑制作用及其对卵巢癌顺铂化疗的增敏作用；第二部分：以台盼蓝活细胞计数法、MTT法、Hoechst染色法及流式细胞仪检测等方法，观察P5对卵巢癌细胞顺铂耐药株COC1／DDP的逆转耐药作用。结果第一部分1．COC1细胞株顺铂IC50值为2.51μg／ml，P5对COC1细胞生长无明显抑制作用；2．小剂量P5（25μg／ml）和大剂量P5（200μg／ml）分别联合顺铂共同作用于COC1，发现COC1顺铂IC50值由2.5μg／ml降至1.57μg／ml～1.51μg／ml：3．Hoechst染色法观察，小剂量P5（25μg／ml）和大剂量P5（200μg／ml）联合顺铂作用于COC1细胞株，细胞凋亡明显增加；4．流式细胞仪分析发现，小剂量P5联合顺铂作用于COC1细胞，与单纯顺铂或单纯P5作用相比，COC1细胞凋亡率增加，G1期细胞比例相对减少，S期、G2／M期细胞比例相对增加；大剂量P5联合顺铂作用下，COC1细胞大量死亡破碎。第二部分1．COC1／DDP细胞株顺铂IC50值为4.96μg／ml；P5对COC1／DDP细胞生长无明显抑制作用；2．小剂量P5（25μg／ml）和大剂量P5（200μg／ml）分别联合顺铂共同作用于COC1／DDP细胞，顺铂IC50值由4.96μg／ml降至2.54μg／ml～2.3μg／ml，接近顺铂敏感细胞株IC50值；3．Hoechst染色法观察，小剂量P5（25μg／ml）和大剂量P5（200μg／ml）联合顺铂分别作用于COC1／DDP细胞株，细胞凋亡明显增加；4．流式细胞仪分析发现，COC1／DDP的细胞凋亡率为0.06％；G1期细胞比例为37.97％，S期细胞比例为53.75％，G2／M期细胞比例为8.28％。小剂量P5作用于COC1／DDP细胞，细胞凋亡率改变很小，但S期细胞比例减少，G1或G2／M期细胞比例增加。顺铂作用于COC1／DDP细胞，细胞凋亡率无明显增加，S期细胞比例相对增加，G1期与G2／M期细胞比例减少；小剂量P5联合顺铂作用，COC1／DDP细胞凋亡率增加，G1期细胞比例相对增加，S期、G2／M期细胞比例相对减少；大剂量P5联合顺铂作用下，COC1／DDP凋亡率显著增加，G1期细胞比例明显减少，S期、G2／M期细胞比例相对增加。结论第一部分1．单纯P5对COC1细胞没有抑制作用；2．小剂量P5（25μg／ml）与大剂量P5（200μg／ml）均能增加COC1细胞对顺铂的敏感性，其中以大剂量P5增敏作用更加明显；3．P5顺铂化疗增敏作用机制与其增加肿瘤细胞凋亡、调节肿瘤细胞周期分布有关。第二部分1．单纯P5对COC1／DDP细胞没有抑制作用；2．小剂量P5（25μg／ml）与大剂量P5（200μg／ml）均有逆转COC1／DDP细胞顺铂耐药作用，其中以大剂量P5逆转耐药作用更加显著；3．P5对COC1／DDP顺铂耐药的逆转作用与其增加耐药肿瘤细胞凋亡、调节细胞周期分布有关。