软肝冲剂抗纤维化作用及对TGF-β1调节的实验研究

论文摘要

目的研究软肝冲剂对免疫损伤性肝纤维化大鼠的治疗作用，并通过研究其对肝组织转化生长因子—β1（TGF-β1）的调节，来探讨软肝冲剂抗纤维化的可能机理。方法大鼠115只随机分为正常对照组、模型对照组、秋水仙碱组以及软肝冲剂大、中、小剂量治疗组。免疫损伤性肝纤维化大鼠以未灭活猪血清腹腔注射的方法造模，共10周。秋水仙碱组及软肝冲剂治疗组从实验第5周开始灌胃给药治疗，剂量为秋水仙碱0.1mg／kg体重，日1次；软肝冲剂大、中、小剂量组分别为软肝冲剂7.5g／kg，5.5g／kg，3.5g／kg，日1次，均连续给药5周。实验第10周末，各组停止腹腔注射猪血清，除秋水仙碱组及软肝冲剂治疗组各留5只大鼠待第15周末观察肝脏组织学形态外，其余全部处死并开始各项指标的检测。实验主要观察指标为肝脏形态学、组织学改变，肝组织炎症活动度与肝纤维化程度；血清学指标测定肝功能情况及肝纤维化情况，免疫组化法测定TGF-β1，原位杂交法测定TGF-β1mRNA的表达，以及RT-PCR法对TGF-β1的定量检测。结果模型组肝组织炎症活动度计分及肝纤维化程度计较正常组显著升高（P＜0.01），软肝冲剂组和秋水仙碱组大鼠肝组织炎症活动度计分及肝纤维化程度计分均较模型组明显降低（P＜0.05；P＜0.01），其中软肝冲剂大剂量组炎症活动度计分降低最为明显（P＜0.01）；软肝冲剂大剂量组炎症活动度计分较软肝冲剂中、小剂量组和秋水仙碱组显著降低（P＜0.01；P＜0.05），但肝纤维化程度计分在软肝冲剂大、中、小剂量组及秋水仙碱组之间无显著差异（P＞0.05）。模型组大鼠肝组织中TGF-β1及TGFβ1mRNA的表达显著高于正常组（P＜0.01，P＜0.01）；软肝冲剂组及秋水仙碱均能明显降低免疫损伤性肝纤维化大鼠肝组织内TGF-β1水平及TGFβ1mRNA的表达（P＜0.01，P＜0.01），但软肝冲剂组效果优于秋水仙碱组（P＜0.01，P＜0.01）。结论①软肝冲剂具有抗纤维化作用，并有保护肝组织及肝细胞的功能；②肝纤维化大鼠组织中TGF-β1水平及TGF-β1mRNA表达增加；说明TGF-β1与肝纤维化的发生发展密切相关；③软肝冲剂能够降低肝组织中TGF-β1水平，是软肝冲剂抗纤维化作用的可能途径之一。一．前言肝纤维化（liver fibrosis）为慢性肝病共有的病理改变，是指肝细胞发生炎症及坏死刺激时，肝脏内纤维结缔组织异常增生的过程，其中有25-40％可最终发展为肝硬化。因此，有效地预防、逆转肝纤维化是防止肝硬化发生的一个重要环节。随着分子生物学和肝细胞分离技术的进步，现已认识到，肝纤维化的发病机制为细胞外基质（ECM）的合成与降解失调，ECM的过度沉积。当ECM合成亢进、降解抑制时，就出现肝纤维化过程，反之则纤维化可消退，因此认为肝纤维化是可逆性病变。肝纤维化的形成过程受多种因子的调节和制约，相互作用

论文目录

• Abstract
• 摘要
• 一.前言
• 二.材料与方法
• 1.材料:
• 1.1 实验动物:
• 1.2 实验药物:
• 1.3 实验试剂:
• 1.4 实验仪器与设备
• 2.实验方法
• 2.1 动物分组:
• 2.2 动物模型的建立
• 2.3 各组处理方法
• 3.观察指标及测定
• 3.1 肝脏大体变化:
• 3.2 形态学指标:
• 3.3 肝炎炎症活动度及肝纤维化程度评分:
• 3.4 血清学指标:
• 3.5 免疫组化指标:
• 3.6 原位杂交指标:
• 3.7 TGF-β1核酸扩增（RT-PCR）实时荧光定量检测:
• 4.数据统计:
• 三、结果与分析
• 1.抗纤维化作用与肝脏保护作用:
• 1.1 大鼠的一般状态及生存情况
• 1.2 肝脏大体变化:
• 1.3 肝脏形态学指标:
• 1.4 肝脏炎症活动度与肝纤维化程度评分:
• 1.5 肝功能血清学指标,具体结构见表5:
• 2.对TGF-β1的调节作用:
• 2.1 TGF-β1免疫组化结果:
• 2.2 TGFβ1的原位杂交结果
• 2.3 TGF-β1mRNA的RT-PCR结果:
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 综述
• 肝纤维化与相关生长因子概述
• 生长因子在肝纤维化中的作用
• 转化生长因子—β1（Transforming growth factor-β1）
• 血小板衍生生长因子（platelet-dervied growth factor,PDGF）
• 胰岛素样生长因子IGF（Insulin-like growth factor）
• 肝细胞生长因子（Hepatocyte growth factor）
• 表皮生长因子（Epidermal growth factor,EGF）
• 成纤维细胞生长因子（Fibroblast growth factor,FGF）
• 研究展望
• 参考文献
• 附图
• 个人简历
• 发表学术文章题录