大白菜抗芜菁花叶病毒(TuMV)遗传规律及过氧化氢等保护酶与抗病性关系的研究

大白菜抗芜菁花叶病毒(TuMV)遗传规律及过氧化氢等保护酶与抗病性关系的研究

论文摘要

大白菜(Brassica campestris L. ssp. pekinensis Lour)是十字花科芸薹属植物,亦称结球白菜,是原产于我国最重要的蔬菜之一。芜菁花叶病毒病(TuMV)是大白菜生产中危害最严重的病害之一。研究大白菜抗TuMV的遗传、生理和分子机理,可为大白菜抗TuMV育种奠定基础。本论文利用对TuMV抗、感表现不同的大白菜纯系材料为亲本,进行了大白菜的抗性遗传规律,过氧化氢代谢相关酶比活性和H2O2含量以及CAT的表达差异研究,具体研究结果如下:1、分别以大白菜对TuMV抗原材料8407和高抗材料73,感病材料冠291和春月黄为亲本,配制4个F1杂交组合,并在此基础上构建F2群体。采用摩擦接种法对上述亲本及其F1、F2代群体接种TuMV-C4,采用生物学观察的方法,根据病情分级和归类标准对大白菜对TuMV的抗性进行鉴定。结果表明,在8407×冠291的群体中,大白菜对TuMV抗性表现为受单显性基因控制;但在8407×春月黄的群体中,则表现为由受一对隐性基因控制。在73×春月黄的群体中,大白菜对TuMV抗性表现为由一对隐性基因控制,而在73×冠291组成的群体中,则表现为由两对隐性基因控制。2、选取对TuMV不同抗、感特性的8407、河304、冠291和春月黄为试验材料,于苗期接种TuMV-C4,通过测定接种后24d内SOD、POD、CAT三种过氧化氢代谢相关酶活性和H2O2含量等指标,发现H2O2、CAT与大白菜的TuMV抗性关系较为紧密,其次是POD,而SOD与TuMV抗性的关系不大。大白菜接种TuMV后, POD、CAT的活性及H2O2含量的变化在不同材料之间存在明显差异。抗病材料在接种病毒后,POD、CAT的活性及H2O2含量虽有变化,但均能逐渐恢复正常;感病材料在接种病毒后,POD、CAT的活性及H2O2含量均有较大变化,且始终无法恢复正常。3、植物材料同第二部分,用标准曲线法对大白菜CAT1~3目的基因进行荧光定量PCR分析,根据三个CAT基因的相对表达量差异推断出,苗期叶片中对CAT总活性贡献较大的可能是CAT2和CAT3,而且CAT基因的荧光定量RT-PCR结果与CAT酶活性测定结果趋势基本一致,表明大白菜被TuMV浸染后,过氧化氢酶在抗病毒进程中发挥了重要的作用。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 1 前言
  • 1.1 本研究的目的
  • 1.2 大白菜抗 TuMV 研究进展
  • 1.2.1 TuMV 特性
  • 1.2.2 TuMV 的株系分化
  • 1.2.3 TuMV 侵染过程
  • 1.2.4 TuMV 致病机理初探及植物对病毒的抗性反应
  • 1.2.5 TuMV 检测技术
  • 1.2.6 大白菜抗 TuMV 遗传规律研究进展
  • 2O2在植物抗病反应中的作用'>1.3 H2O2在植物抗病反应中的作用
  • 1.4 芸薹属植物 TuMV 抗性与 SOD、POD、CAT 三种过氧化氢代谢相关酶活性的关系
  • 1.4.1 TuMV 侵染对超氧化物歧化酶(SOD)的影响
  • 1.4.2 TuMV 侵染对过氧化物酶(POD)活性的影响
  • 1.4.3 TuMV 侵染对过氧化氢酶(CAT)活性的影响
  • 1.5 荧光定量 PCR 检测
  • 1.6 本研究的内容和意义
  • 2 材料与方法
  • 2.1 大白菜对芜菁花叶病毒病抗性遗传的研究
  • 2.1.1 植物材料
  • 2.1.2 抗病性鉴定方法
  • 2.2 大白菜叶片中 SOD 等三种过氧化氢代谢相关酶比活性及 H2O2含量变化与 TuMV 侵染关系的研究
  • 2.3 大白菜 CAT 基因的荧光定量 RT-PCR 研究
  • 3 结果与分析
  • 3.1 大白菜对芜菁花叶病毒病抗性遗传分析
  • 3.2 大白菜叶片中 SOD 等三种过氧化氢代谢相关酶比活性及 H2O2含量变化与 TuMV 侵染的关系
  • 3.3 大白菜 CAT 基因的荧光定量 RT-PCR 分析
  • 4 讨论
  • 4.1 大白菜对芜菁花叶病毒病抗性遗传的讨论
  • 4.2 接种病毒后大白菜叶片中 SOD 等酶活性和 H2O2含量变化的讨论
  • 4.3 大白菜 CAT 基因的荧光定量 RT-PCR 分析的讨论
  • 5 结论
  • 附录
  • 参考文献
  • 致谢
  • 攻读硕士学位期间发表的论文
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