小花假泽兰化学成分及其抑菌活性的研究

小花假泽兰化学成分及其抑菌活性的研究

论文摘要

为了有效地利用和发展小花假泽兰,从而为开发出新型的植物源杀菌剂提供理论依据,本论文在前人研究的基础上对小花假泽兰化学成分及其抑菌活性的研究及取得的主要结果有以下几方面:1.采用试管预试法对小花假泽兰全株的化学成分进行了系统预试。初步确定其含有甾体、萜类、黄酮及其苷类、糖及其苷、氨基酸、内酯,香豆素及苷类和挥发油等化学成分,可能含有生物碱、蒽醌及其苷类、酚类等化学成分,不含皂苷。2.用工业乙醇在反应釜中对90 kg粉碎的小花假泽兰全株常温搅拌提取,浓缩所得浸膏(10 kg),将其水悬浮后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取,浓缩回收溶剂分别得石油醚萃取物(898.39 g)、氯仿萃取物(760.34 g)、乙酸乙酯萃取物(666.76 g)、正丁醇萃取物(876.75 g)。3.以生长速率法和盆栽法测定上述各萃取浸膏的抑菌作用。结果表明氯仿萃取物对番茄灰霉病菌、小麦纹枯病菌、苹果炭疽病菌、玉米大斑病菌等7种供试病原菌的抑制作用相对较强。当供试浓度为植物样品干样0.1g/mL时,其对小麦纹枯病菌和番茄灰霉病菌的抑制率都达100%。盆栽实验结果也表明氯仿萃取物对小麦白粉具有较好的保护作用,在5 mg/mL供试浓度下其防治效果为66.42%.4.采用活性跟踪法,以小麦纹枯病菌和番茄灰霉病菌为指示病菌对活性较高的氯仿萃取物通过硅胶柱,Sephadex LH-20柱柱层析,重结晶,HPLC制备等方法进行了分离纯化。从中分离得到9个化合物,其编号和质量依次为:化合物Ⅰ(740 mg)、Ⅱ(25 mg)、Ⅲ(10 mg)、Ⅳ(40 mg)、Ⅴ(580 mg)、Ⅵ(20 mg)、Ⅶ(5 mg)、Ⅷ(7 mg)、Ⅸ(500 mg)。对其进行了化学定性反应和光谱测定(IR、EI MS、1H NMR、13C NMR、DEPT),并鉴定出其中4个化合物的结构分别为:豆甾醇,去氧薇甘菊内酯、二氢薇甘菊内酯和β-谷甾醇。5.采用水蒸气蒸馏法、溶剂提取法和超临界CO2萃取法,以提取率为指标,对小花假泽兰全株精油提取工艺进行了研究。结果三种方法的提取率分别为:0.67%,1.10%和5.41%,发现超临界CO2萃取在合适的条件下提取率最高为5.41%.并用GC-MS联用法分析了水蒸气蒸馏精油成分,其主要成分为22,23-二羟基豆甾烷醇(7.34%)、氧化丁子香烯(3.34%)、罗汉柏烯(2.92%)、Cubenol(2.81%)、十六碳酸甲基酯(2.2%)等。6.采用离体法和果实针刺法测定了水蒸气蒸馏精油的抑菌活性,发现其对供试病原菌均有一定的抑制作用,当浓度达1.0 mg/mL时,对小麦赤霉、小麦纹枯和番茄灰霉病菌的抑制率均达90%以上;此外,其对番茄灰霉病菌也具有明显的保护效果,在1.0~2.0 mg/mL剂量下,保护作用的防治效果均在60%以上。7.离体孢子萌发法对分离的部分化合物进行抑菌活性测定,结果表明不同单体化合物对2种供试病原菌孢子萌发均有一定的抑制作用,当浓度为0.50 mg·mL-1时,化合物Ⅰ和Ⅴ对番茄灰霉病菌孢子萌发有较强的抑制作用,其抑制率为92.34%和85.48%,化合物Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅷ对玉米大斑病菌孢子萌发也有较好的抑制效果,其抑制率分别为83.81%、76.38%、68.88%和76.73%。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 第一章 文献综述
  • 1.1 引言
  • 1.2 菊科植物研究概述
  • 1.2.1 菊科植物简介
  • 1.2.2 菊科植物活性成分研究概述
  • 1.3 植物源农用抑菌活性成分研究概况
  • 1.3.1 萜类和挥发油类
  • 1.3.2 生物碱类
  • 1.3.3 黄酮类化合物
  • 1.3.4 酚类、醇类
  • 1.3.5 有机酸类
  • 1.3.6 甾体及皂苷类
  • 1.3.7 其他物质
  • 1.4 小花假泽兰及其化学成分和生物活性研究概述
  • 1.4.1 小花假泽兰的植物学特性及地理分布
  • 1.4.2 小花假泽兰化学成分研究概述
  • 1.4.3 小花假泽兰生物活性研究进展
  • 1.5 问题的提出
  • 1.6 论文的设计思路
  • 第二章 材料与方法
  • 2.1 试验材料
  • 2.1.1 供试材料
  • 2.1.2 供试菌种和植物
  • 2.1.3 试验主要试剂
  • 2.1.4 试验主要仪器
  • 2.2 试验方法
  • 2.2.1 小花假泽兰化学成分系统预试
  • 2.2.2 小花假泽兰化学成分提取、分离方法
  • 2.2.3 小花假泽兰化学成分精油提取方法
  • 2.2.4 化合物结构鉴定方法
  • 2.2.5 精油成分GC-MS 联用分析方法
  • 2.2.6 小花假泽兰抑菌活性测定方法
  • 第三章 结果与分析
  • 3.2 小花假泽兰提取、分离及纯化结果
  • 3.2.1 样品提取及萃取结果
  • 3.2.2 分离、纯化结果
  • 3.2.3 化合物结构波谱解析
  • 3.3 小花假泽兰精油提取结果
  • 3.3.1 提取工艺结果
  • 3.3.2 溶剂提取法所得精油结果
  • 3.4 抑菌活性测定结果
  • 3.4.1 小花假泽兰乙醇提取物各萃取部分的抑菌活性
  • 3.4.2 氯仿萃取物柱层析馏分的抑菌活性
  • 3.4.3 小花假泽兰全株精油的抑菌活性结果
  • 3.4.4 单体化合物的抑菌活性
  • 第四章 讨论
  • 4.1 植物成分分离、纯化值得注意的问题
  • 4.2 超临界法提取精油明显优于常规提取法
  • 4.3 小花假泽兰全株精油有必要进一步研究
  • 4.4 小花假泽兰抑菌活性成分分离中活性跟踪指示菌种的推测
  • 4.5 小花假泽兰抑菌活性有待于进一步研究
  • 4.6 关于小花假泽兰综合利用的思考
  • 4.7 结构表征
  • 4.8 有待于进一步解决的问题
  • 4.8.1 化合物提取分离鉴定方面存在的问题
  • 4.8.2 精油研究方面存在的问题
  • 4.8.3 单体化合物的抑菌活性需要进一步研究
  • 第五章 结论
  • 参考文献
  • 附图
  • 致谢
  • 作者简介
  • 相关论文文献

    标签:;  ;  ;  ;  

    小花假泽兰化学成分及其抑菌活性的研究
    下载Doc文档

    猜你喜欢