经典Wnt信号关键基因在人早期牙齿发育中的表达检测

论文摘要

经典Wnt信号通路在小鼠早期牙齿发育过程中起着关键的作用,人们在小鼠磨牙或门牙中的分子生物学机制方面已经做了大量的研究。为了进一步探索经典Wnt信号通路在早期人类牙齿发生发育过程中所起的调控作用以及可能的分子机制,本实验首次检测了在人类牙胚发育早期的门牙和磨牙中经典Wnt信号通路中关键基因中的表达模式,这些基因包括：LRP6, FRZB, SFRP5, APC, DVL2以及TCF7。可以用相互比较的方法比对一些基因在小鼠牙胚相应发育时期的表达模式,以进一步揭示Wnt信号通路在不同物种中的表达调控机制。也可以通过检测某几个基因在人牙胚中的表达情况,来预测这些基因的相互联系。研究表明在帽状期以及钟状期有些基因在小鼠与人类中的表达模式相近,但个别基因的表达模式仍存在差异,比如Frzb信号在小鼠牙胚钟状期出现不了,而人类的FRZB信号无论是在门牙还是磨牙钟状期均在内釉上皮大量表达,提示两物种间可能有潜在的差别。在人类牙齿发育的钟状期APC, DVL2, TCF7在内釉上皮有大量表达,且表达区域相近,此结果和这三个因子在细胞内有紧密联系相吻合,从另一个角度验证了Wnt信号的在胞内传递的连续性。而受体LRP6基因的微弱表达以及Wnt信号拮抗物的大量表达,提示其相互之间亦可能存在明显的拮抗作用。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 中文文摘
• 目录
• 绪论
• 1.1. 牙齿发育
• 1.1.1 哺乳动物早期牙齿发育
• 1.1.2 哺乳动物牙齿发育的分子机制
• 1.2 Wnt信号通路
• 1.2.1 Sfrp家族
• 1.2.2 APC家族
• 1.2.3 DVL家族
• 1.2.4 其它关键因子在牙齿发育中的作用
• 1.3 RNA原位杂交技术
• 1.4 本研究的创新之处及意义
• 第一章 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 主要仪器
• 1.1.2 主要药品
• 1.1.3 菌株和载体
• 1.1.4 软件
• 1.1.5 常用培养基和缓冲液
• 1.1.6 原位杂交试剂
• 1.2 方法
• 1.2.1 DNA模板的制备
• 1.2.2 RNA探针的转录
• 1.2.3 探针的回收
• 1.2.4 RNA电泳
• 1.2.5 胚胎取材、切片及原位杂交
• 第二章 结果与分析
• 2.1 质粒的酶切线性化
• 2.2 探针的转录
• 2.3 原位杂交结果
• 2.3.1 LRP6在人类牙胚中的表达
• 2.3.2 FRZB在人类牙胚中的表达
• 2.3.3 SFRP5在人牙胚中的表达
• 2.3.4 APC在人牙胚中的表达情况
• 2.3.5 DVL2在人牙胚中的表达情况
• 2.3.6 TCF7在人牙胚中的表达情况
• 第三章 讨论
• 3.1 LRP6 FRZB SFRP5等在人类牙胚中的表达模式以及它们之间可能存在的联系
• 3.2 DVL2,APC等在人类牙胚中的表达模式以及它们之间可能存在的联系
• 3.3 TCF7等在人类牙胚中的表达模式及相关推测
• 第四章 结论
• 附录
• 参考文献
• 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果
• 致谢
• 个人简历