论文摘要
研究背景多发性硬化（Multiple Sclerosis ,MS）是中枢神经系统（central nervous system ,CNS）常见的炎性脱髓鞘疾病,受累人群以中、青年居多,而且导致严重的功能残障,因此,深入研究其发病机制及开拓新的治疗方法,具有重要的临床意义。长期以来,在关于多发性硬化（Multiple Sclerosis, MS）的发病机制的众多学说中,普遍为大家所接受的是以辅助性T淋巴细胞Th1/Th2平衡失调为理论基础的白介素12（interleukin-12,IL-12）/干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）轴学说,该学说认为IL-12和Th1细胞在MS的免疫病理机制中起着核心作用。但是该学说尚不能解释疾病发生的全貌。近来研究发现,白介素23（interleukin-23,IL-23）/白介素17（interleukin-17,IL-17）炎性轴则能更科学地阐明MS的发病机制,该学说认为由炎性细胞产生的IL-23刺激Th0细胞向一种过去不为人知的新Th细胞亚型（命名为Th17/ThIL-17细胞）分化,Th17/ThIL-17细胞产生致炎性细胞因子IL-17,后者具有强烈的致炎作用,从而导致MS或实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE）发生。研究发现钾离子通道阻滞剂（potassium channel blockers ,PCB）能够影响炎性细胞活性和功能,从而起到调节炎症作用。大剂量甲基强的松龙（methylprednisolone,MP）是多发性硬化急性发作期最常使用的药物,实验发现能明显抑制EAE的诱导,临床也证明甲基强的松龙能够改善多发性硬化患者发作期症状,然而其具体的作用机制仍然存在争论。目的本研究试图探讨IL-23/IL-17轴在EAE的发病机制中的作用,通过钾离子通道阻滞剂4-氨基吡啶（4-aminopyridine ,4-AP）和糖皮质激素MP干预EAE大鼠,探讨4-AP是否通过抑制IL-23/IL-17轴而起到调节炎症作用,MP的抗炎作用是否与影响IL-23/IL-17轴有关,以期为钾离子通道阻滞剂和MP在MS治疗中的临床运用提供新的理论和实验依据。方法运用豚鼠脊髓匀浆和完全弗氏佐剂制成油包水抗原乳剂,并注射百日咳杆菌建立EAE大鼠模型。通过HE染色和电镜观察判断模型成功与否。分别设立正常组,EAE模型组, 4-AP和MP干预组,通过神经功能缺损评分判断大鼠临床症状改善情况;RT-PCR检测大鼠脑组织IL-12和IL-23的亚基IL-23P19、IL-12P40、IL-12P35以及毒性T细胞相关抗原8（Cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 8 CTLA-8,IL-17前体） mRNA水平;ELISA方法检测大鼠脑组织细胞因子IL-17水平。结果1、EAE组大鼠的脑组织中IL-23P19、IL-12P40、IL-12P35、CTLA-8mRNA表达以及IL-17细胞因子水平均比正常组增高（P < 0.05）。2、4-AP干预的EAE组大鼠神经功能评分明显低于EAE模型组（P < 0.05）。3、4-AP干预组大鼠脑组织中IL-23P19、IL-12P40、IL-12P35、CTLA-8 mRNA表达以及IL-17细胞因子水平显著低于EAE模型组（P < 0.05）。4、MP干预组大鼠脑组织中IL-23P19、IL-12P40、IL-12P35、及CTLA-8 mRNA的表达较EAE组降低（P<0.05）,IL-17水平也显著低于EAE组（P<0.05）。结论1、本研究证实了IL-23/IL-17轴参与了EAE发病过程并起到重要作用。2、钾离子通道阻滞剂4-AP能改善EAE大鼠临床症状,并能通过抑制IL-23、IL-17的mRNA表达和IL-17产生而抑制IL-23/IL-17轴,从而起到调节炎症作用。3、甲基强的松龙也能抑制IL-23、IL-17的mRNA表达和IL-17产生,通过影响IL-23/IL-17轴而起到抗炎作用。
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标签：多发性硬化论文; 实验性自身免疫性脑脊髓炎论文; 钾离子通道阻滞剂论文; 甲基强的松龙论文;