论文摘要
本文研究了宁夏鹅绒藤地上部分化学成分,应用系统分离方法对鹅绒藤的地上部分的水提物进行了分离纯化,得到7个单体化合物,并对它们进行了体外抗氧化活性实验和抑制人宫颈癌Hale细胞生长实验;利用大孔树脂对鹅绒藤中的总生物碱进行了富集工艺的研究,并对总生物碱的抑制人宫颈癌HaLe细胞生长活性进行了初步的研究。具体内容摘要如下:1.鹅绒藤地上部分单体化合物的分离,鉴定:应用系统分离方法,利用硅胶柱色谱,凝胶柱色谱,薄层色谱,反复重结晶等方法分离出7个化合物,利用化学方法和现代波谱技术鉴定了其中5个,分别为:正三十三烷醇(Ⅰ),正三十八烷(Ⅱ),胡萝卜苷(Ⅲ),山奈酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(Ⅴ),7-O-α-L-鼠李吡喃糖基-山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(Ⅵ)即山奈苷。其中化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ为首次从鹅绒藤中分离得到,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ首次从鹅绒藤属中得到。2.鹅绒藤中的总生物碱的提取及富集工艺的研究:首先以提取物的量为考察指标,通过三因素三水平正交设计实验对鹅绒藤的提取条件进行研究,确定最佳提取工艺条件为A1B1C3,即70%的乙醇,提取温度为70℃,提取时间为3h;以最佳提取条件为基础,进一步利用大孔树脂对鹅绒藤中的总生物碱进行了富集工艺的研究,以常用的酸碱滴定法测定生物碱的含量,以生物碱的摩尔数为标准。首先通过静态吸附法确定了大孔树脂树脂型号D-101,其次确定总生物碱富集在20%乙醇洗脱部分,最后通过三因素三水平正交设计实验确定鹅绒藤中的总生物碱富集工艺最佳条件为A3B1C3,即6倍柱体积的洗脱剂,径高比为1:8,洗脱剂流速为1mL/min。3.体外抗氧化活性的研究:(1)首先对鹅绒藤的水提物浸膏进行了清除DPPH自由基的研究,发现其具有清除自由基的作用,随着浓度的增加呈一定的正性线性关系。(2)对鹅绒藤水提物的石油醚萃取部分,乙酸乙酯萃取部分,正丁醇萃取部分进行了清除DPPH自由基的研究,发现其都具有清除自由基的作用,随着浓度的增加呈一定的正性线性关系;但正丁醇部分的清除作用最强,其次为乙酸乙酯部分,最后为石油醚部分。(3)对分离得到的两个黄酮苷类化合物Ⅴ和Ⅵ进行了清除DPPH自由基的研究,发现其都具有清除自由基的作用,随着浓度的增加呈一定的正性线性关系;但化合物Ⅴ的清除作用明显强于Ⅵ,与维生素C进行对照,虽清除作用低于维生素C,但清除作用相差不大。(4)进一步对化合物Ⅴ进行了细胞水平的抗氧化实验。4.对人宫颈癌HaLe细胞抑制作用的研究:以人宫颈癌Hale细胞为评价对象,对鹅绒藤的总生物碱以及各萃取部分,部分单体化合物进行了抑制Hale细胞生长活性的实验,发现仅仅只有总生物碱浓度为1.5mg/mL时对Hale细胞的生长抑制率达到50%以上;其他的各组分及各个单体化合物对Hale细胞的生长抑制率都较低。
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