玉米蛋白水解物体外消化产物的抗氧化及ACE抑制活性研究

论文摘要

国内外研究表明,玉米醇溶蛋白水解物具有良好的体外抗氧化能力以及ACE抑制活性,但是有关玉米醇溶蛋白水解物体内抗氧化及ACE抑制活性的研究较少。本论文主要探讨玉米醇溶蛋白水解物抗氧化及ACE抑制活性的耐消化性,以及抗氧化能力与ACE抑制活性间的相关性。本论文的研究对于促进玉米蛋白在食品加工领域及保健食品领域的应用具有重要的理论和应用价值。本论文首先研究了玉米醇溶蛋白的碱性蛋白酶解产物（ZH）的抗氧化性,利用体外两阶段消化模型（在37 oC,胃蛋白酶作用1 h后由胰蛋白酶继续消化2 h）研究ZH的体内抗氧化特性。以ABTS+·自由基清除能力,DPPH·自由基清除能力,还原能力和Cu2+螯合能力为抗氧化指标,并利用氨基酸自动分析仪和高效凝胶排阻色谱（HPSEC）来测定消化过程中游离氨基酸和分子量分布的变化。结果表明,ZH具有很强的ABTS+·自由基清除能力、Cu2+螯合能力以及还原能力。在5 mg/mL时,ZH的还原能力是0.01 mg/mL Vc的2倍左右,ABTS+·自由基清除能力是0.01 mg/mL Vc的7倍左右,其Cu2+螯合能力比0.1 mg/mL BHA的螯合能力高5倍多（P < 0.05）。经过体外消化,ZH的还原能力几乎提高了一倍,并且保留了原有的ABTS+·自由基清除能力以及Cu2+螯合能力（P < 0.05）。低浓度的ZH消化产物（1 mg/mL）对ABTS+·的清除能力比8 mg/mL的消化产物对DPPH·自由基的清除能力高出近50倍的现象表明,ABTS+·自由基清除能力的测定更适用于水溶性肽抗氧化的评价。论文利用紫外分光光度法测定ZH及其体外消化产物的ACE抑制活性,通过SephadexG-15凝胶柱对ZH消化终产物进行分离,以ABTS+·自由基清除能力,还原能力,Cu2+螯合能力以及ACE抑制率为检测指标,研究了分离组分的抗氧化及ACE抑制活性,并探讨了氨基酸组成和分子量分布对于各组分抗氧化能力以及ACE抑制活性的影响。结果表明,ZH具有很好的ACE抑制活性（8 mg/mL蛋白浓度时抑制率达到80.6±2.67%）。经过体外消化,产物仍然具有良好的ACE抑制活性（83.8±2.03%）。ZH消化终产物经凝胶柱分离后得到四个组分,其中2号组分中分子量在120-568 Da的小肽占77.07%,具有抗氧化能力的氨基酸,碱性氨基酸,支链氨基酸以及疏水性氨基酸含量很高,具有最强的ABTS+·自由基清除能力,还原能力,金属离子螯合能力以及ACE抑制活性。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 立题背景及意义
• 1.2 玉米蛋白及其水解物的国内外研究进展
• 1.2.1 玉米醇溶蛋白的结构及特性研究
• 1.2.2 玉米醇溶蛋白的应用
• 1.2.3 玉米蛋白水解物的研究进展
• 1.2.4 抗氧化肽的抗氧化功效评估方法研究进展
• 1.3 课题研究的目的以及主要内容
• 第二章 玉米醇溶蛋白酶解产物抗氧化能力的耐消化性研究
• 2.1 引言
• 2.2 实验材料与设备
• 2.2.1 主要材料与试剂
• 2.2.2 主要仪器
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 玉米醇溶蛋白的碱性蛋白酶水解物（ZH）的制备
• 2.3.2 ZH 体外消化实验
• 2.3.3 水解度（DH）的测定
• 2.3.4 蛋白含量的测定
• 2.3.5 抗氧化性测定方法
• 2.3.6 游离氨基酸组成分析
• 2.3.7 分子量分布的测定
• 2.3.8 统计分析
• 2.4 结果与讨论
• 2.4.1 ZH 在体外模拟消化过程中的水解度变化
• 2.4.2 ZH 的抗氧化能力
• 2.4.3 ZH 体外消化过程中抗氧化能力的变化
• 2.4.4 ZH 体外消化过程中游离氨基酸组成的变化
• 2.4.5 ZH 体外消化过程中分子量分布的变化
• 2.5 本章小结
• 第三章 玉米醇溶蛋白水解物的体外ACE 抑制活性耐消化性研究
• 3.1 引言
• 3.2 实验材料与设备
• 3.2.1 主要材料与试剂
• 3.2.2 主要仪器
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 ACE 抑制活性的测定
• 3.3.2 Sephadex-G15 凝胶柱分离
• 3.3.3 总氨基酸组成分析
• 3.3.4 分子量范围的测定
• 3.3.5 抗氧化能力测定
• 3.3.6 统计分析
• 3.4 结果与讨论
• 3.4.1 ZH 的体外ACE 抑制活性耐消化性
• 3.4.2 ACE 抑制活性与分子量大小间的相关性研究
• 3.4.3 ACE 抑制活性与氨基酸组成间相关性探讨
• 3.5 结论
• 第四章 玉米醇溶蛋白水解物体外消化产物抗氧化能力与ACE 抑制活性间相关性探讨
• 4.1 引言
• 4.2 实验材料与设备
• 4.2.1 主要材料与试剂
• 4.2.2 主要仪器
• 4.3 实验方法
• 4.3.1 ACE 抑制活性的测定
• 4.3.2 抗氧化能力测定
• 4.3.3 统计分析
• 4.4 结果与讨论
• 4.4.1 ZH 体外消化过程中抗氧化能力与ACE 抑制活性间的相关性
• 4.4.2 凝胶柱分离组分抗氧化能力与ACE 抑制活性间的相关性
• 4.5 结论
• 主要结论
• 展望
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 攻读硕士学位期间发表的论文