论文题目: 神经干细胞移植治疗大鼠脑创伤的实验研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 外科学
作者: 张在金
导师: 卢亦成,董艳
关键词: 神经干细胞,培养,移植
文献来源: 第二军医大学
发表年度: 2005
论文摘要: 目的:探索神经干细胞的培养技巧,观察神经干细胞采集与其增殖、传代能力的关系;观察细胞因子和神经干细胞移植治疗脑创伤的作用。方法:取SD大鼠不同胎龄或相同胎龄不同部位脑组织进行神经干细胞培养。bFGF、运动皮层和海马组织来源的神经干细胞分别注射到运动皮层创伤区,进行行为学检测和免疫组化检测。结果:胎龄小或相同胎龄靠近生发中心的神经干细胞增殖和传代能力强。脑创伤后皮层内注射bFGF和神经干细胞以后运动功能障碍明显改善。神经干细胞运动皮层原位移植后运动功能远期改善较好。结论:神经干细胞存在固有的增殖、分化规律,细胞来源决定其增殖、传代能力。神经干细胞原位移植具有优越性。
论文目录:
缩略词表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 胚胎大鼠神经干细胞体外培养以及分化的研究
一、材料
(一) 实验材料
(二) 手术器械
(三) 主要仪器
(四) 主要试剂和溶液配制
(五) 其他实验材料
二、方法
(一) 常用溶液的配制
(二) 神经干细胞的原代培养
(三) 死活细胞的分离
(四) 神经干细胞的传代培养
(五) EGF、bFGF对细胞增殖的影响
(六) MTT法检测细胞增殖率
(七) 神经干细胞冻存与复苏
(八) 神经干细胞的nestin鉴定
(九) 神经干细胞的分化鉴定
(十) 统计学分析
三、结果
(一) 神经干细胞原代培养
(二) 死活细胞的分离
(三) 神经干细胞的传代培养
(四) EGF、bFGF对细胞增殖的影响
(五) MTT法检测细胞增殖率
(六) 神经干细胞的冻存
(七) 神经干细胞鉴定及其分化鉴定
四、讨论
(一) 取材部位与神经干细胞培养
(二) 孕龄与神经干细胞培养
(三) 神经干细胞培养的改进
(四) EGF、bFGF对细胞增殖的影响
(五) 显微镜观察
参考文献
第二部分 神经干细胞移植治疗大鼠液压打击脑损伤的实验研究
一、材料
(一) 主要仪器设备
(二) 主要抗体
(三) 主要试剂
(四) 其他试剂
二、方法
(一) 神经干细胞培养
(二) 实验动物分组
(三) 侧方液压打击脑损伤模型的建立
(四) 神经干细胞移植
(五) 标本取材和石蜡切片的制备
(六) 免疫组化ABC法步骤
(七) 神经行为学观察
(八) 统计学分析
三、结果
(一) 神经行为学观察
(二) 免疫组化检测
(三) 病理学观察
四、讨论
(一) 神经干细胞脑内移植治疗TBI的可行
(二) 细胞因子与神经干细胞移植
(三) 取材部位与神经干细胞移植
(四) 神经干细胞移植的时间窗
(五) 神经干细胞移植神经功能改善的机制
参考文献
实验照片
总结
文献综述
创伤性脑损伤神经替代治疗的进展
致谢
发布时间: 2006-05-08
参考文献
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