论文摘要
目的:探讨成年大鼠脊髓全横断损伤（SCT）后不同时相损伤部位两端脊髓内TGFβ1和GDNF的表达变化。 方法:成年SD大鼠50只,随机分5组:正常对照组、脊髓全横断损伤(于T9-T10完全横断脊髓)3d组、7d组、14d组和21d组,每组各10只动物。术后1d,3d,7d,14d及21d作BBB评分及SEP检测。每组取5只动物的脊髓,用TGFβ1和GDNF抗体行免疫组化SP法染色,另5只做Western blotting分析。在光镜下观察各组脊髓内TGFβ1和GDNF的分布及染色程度。Western blotting染色带用生物凝胶成像系统成像及Synaptic Gene Tool软件进行分析,测定阳性染色区带的光密度值。采用单因素的方差分析及LSD—q检验进行显著性检验。 结果:双下肢运动功能的BBB评分在术后为0,21d仅为1.17±0.11。SEP在损伤各组均未检测到。TGFβ1表达于正常脊髓前角运动神经元的胞浆及白质内的神经胶质细胞。损伤脊髓头端,前角神经元内TGFβ1免疫反应在损伤7d开始增强,21d达最高;损伤脊髓尾端,灰质神经元TGFβ1免疫反应损伤3d开始增强,21d达最高;两端脊髓白质内神经胶质细胞的免疫反应均在14d开始增强,21d达最高。Western blotting结果显示,各损伤组头端脊髓TGFβ1蛋白含量较正常时明显减少,至损伤21d,TGFβ1的蛋白含量有所回升,但仍未达正常水平;尾端脊髓TGFβ1含量损伤后无明显变化,直到损伤21d,TGFβ1含量才明显增高。GDNF主要表达于正常脊髓的前角运动神经元,中间带神经元,后角感觉神经元及白质内的神经胶质细胞;神经元内,免疫阳性反应产物定位于胞浆及胞核。损伤脊髓头端,神经元及白质内神经胶质细胞的GDNF免疫阳性反应于损伤3d和7d明显增强,14d及21d则较前稍有减弱,神经胶质细胞的GDNF免疫阳性反应持续性增强直到21d。损伤后,尾端脊髓灰质神经元的GDNF阳性反应,比正常时略强,到损伤21d,免疫反应强度较前减弱。神经胶质细胞的免疫反应强度在损伤14d开始增强,并持续直到21d。损伤3d始,多数前角的神经元表现为胞浆着色,胞核不着色,到21d,阳性反应物又同时
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