论文摘要
LOX-1在2型糖尿病大鼠血管病变中的表达及普罗布考的干预作用目的：凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）是血管内皮细胞表面氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）的主要受体，通过增加ox-LDL介导血管内皮细胞功能紊乱，引发动脉粥样硬化。本研究的主要目的如下：（1）探寻简单、经济、成功率高的2型糖尿病造模方法；（2）观察LOX-1在2型糖尿病大鼠大血管早期病变中的表达及其表达的影响因素；（3）分析普罗布考对2型糖尿病大鼠大血管病变处LOX-1表达的影响及其影响机制。方法：健康的SD雄性大鼠50只，随机分成四组：D组（正常对照组，10只，普通饲料），A组（高糖高脂饮食8周后加小剂量STZ诱导2型糖尿病模型成功后加普罗布考500mg／kg／d干预8周组，13只），B组（开始高糖高脂饮食时即加普罗布考500mg／kg／d干预8周后加小剂量STZ诱导2型糖尿病模型成功后继续给予普罗布考500mg／kg／d干预8周组，13只），C组（高糖高脂饮食8周后加小剂量STZ诱导2型糖尿病模型成功后8周组，14只）。随机分组后，给予A、B、C组高糖高脂饮食，6周后按1ml／100mg体重给予脂肪乳灌胃，第8周末测定血清胰岛素，计算并比较正常组与高糖高脂饮食组（即A、B、C组）胰岛素结果，显示高糖高脂饮食组胰岛素明显高于正常对照组。遂于次日清晨称取动物体重，按30mg／kg体重尾静脉注射STZ，3日后再次称量动物体重，按30mg／kg体重第二次尾静脉注射STZ。然后于第二次注射后一周经尾静脉测定血糖，血糖测定结果大于16.7mmol／1为2型糖尿病造模成功。造模后继续高糖高脂饮食饲养8周后处死，取血测定血清胰岛素及血脂，取大鼠主动脉冰冻切片测定原位活性氧（ROS）产量，RT-PCR和Westrn blot测定LOX-1表达量。所得数据用SPSS13.0统计软件分析。结果：高糖高脂饮食8周后，A、B、C组血清胰岛素明显高于D组（p=0.000），STZ诱导后A、B、C组2型糖尿病的成功率为91.67％。实验结束时，A、B、C组大鼠的血清TG、TC、LDL-C水平均明显高于D组（p=0.000；p=0.000；p=0.000；p=0.000），其中A组和B组的血清TC和LDL-C水平均明显低于C组，差异有统计学意义（p＜0.05；p＜0.05），A组和B组的血清TC和LDL-C水平之间的差别无统计学意义（p＞0.05）。C组大鼠主动脉出现早期的血管病变，A组和C组几乎无病变。各组大鼠主动脉原位ROS检测结果显示，C组ROS荧光强度最强，A、B组次之，D组最弱。与D组相比，A、B、C组大鼠主动脉血管组织LOX-1的mRNA表达水平和蛋白水平均明显增高，差异有统计学意义（p=0.000；p=0.000），A、B两个干预组的主动脉血管组织LOX-1的mRNA表达水平和蛋白水平明显低于C组，差异有统计学意义（p＜0.05；p＜0.05），A组和B组之间比较，LOX-1mRNA表达水平和蛋白水平的差别均无统计学意义（p＞0.05）。结论：（1）高糖高月旨饮食加小剂量多次注射STZ可以成功诱导SD大鼠的2型糖尿病模型，方法简单且成模率高；（2）LOX-1在2型糖尿病大鼠大血管病变早期表达增高，且与血管原位ROS有关；（3）普罗布考可以降低2型糖尿病血管LOX-1的表达水平，其机制可能与普罗布考降低TC、LDL-C和血管原位ROS水平有关；（4）普罗布考可以通过降低血管内皮细胞LOX-1表达影响糖尿病血管病变。