Aspergillus sp136抗细菌耐药活性成分研究

论文摘要

基于广谱抗细菌耐药性这一思路,本研究中心建立了一套抗细菌耐药性化合物的筛选方法。由此从3000多种西南地区特殊生境的微生物和植物样品提取物中筛选获得17个抗细菌耐药性活性样品。对其中一株来自峨嵋山土样的微生物（Aspergillus sp136）进行了深入研究。通过TLC自显影等方法从其发酵产物中追踪分离得到抗耐药有效成分,并鉴定为烟曲霉酸。采用多种方法对烟曲霉酸的体外抗细菌耐药活性进行评价。在平板扩散法中,烟曲霉酸表现出对青霉素（β-内酰氨抗生素）的协同抗耐药能力,其活性大约3倍于克拉维酸。在MIC的测试实验中,烟曲霉酸表现出对青霉素（β-内酰氨抗生素）以及非β-内酰氨抗生素如红霉素、四环素、氯霉素、链霉素、卡那霉素、庆大霉素的抗耐药能力。在棋盘格杀菌以及时间致死曲线的研究中,烟曲霉酸也表现出对青霉素、红霉素、四环素的协同抗细菌耐药活性。在广泛的活性筛选中发现烟曲霉酸对LDLR基因具有上调活性,表明烟曲霉酸可能具有降血脂的活性。在研究中发现,同空白对照相比,烟曲霉酸使耐药菌（Bacillus cereus NCPF63509）细胞外β-内酰胺酶酶活大幅度下降,而细胞内β-内酰胺酶酶活仅略有上升,这表明烟曲霉酸对β-内酰胺酶分泌过程具有抑制作用。综述了β-内酰胺酶的研究进展。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一章 抗细菌耐药性化合物的筛选模型
• 1.1 引言
• 1.2 抗细菌耐药性化合物的筛选模型
• 1.2.1 筛选原理
• 1.2.2 筛选步骤
• 1.3 实验部分
• 1.3.1 材料
• 1.3.2 仪器
• 1.3.3 筛选方法
• 1.4 结果与讨论
• 1.4.1 筛选结果
• 1.4.2 讨论
• 1.5 参考文献
• 第二章 Aspergillus sp136 抗细菌耐药活性物质的追踪分离
• 2.1 Aspergillus sp136 的发酵
• 2.2 抗细菌耐药活性物质的追踪
• 2.2.1 追踪原理
• 2.2.2 实验部分
• 2.2.3 结果与讨论
• 2.3 抗细菌耐药活性物质的分离
• 2.3.1 分离原理
• 2.3.2 实验部分
• 2.3.3 结果与讨论
• 2.4 参考文献
• 2.5 烟曲霉酸有机谱图
• 第三章 烟曲霉酸体外活性研究
• 3.1 烟曲霉酸抗青霉素耐药活性测定
• 3.1.1 测定原理
• 3.1.2 材料与方法
• 3.2 烟曲霉酸抗耐药协同抑菌活性研究
• 3.2.1 测定原理
• 3.2.2 材料与方法
• 3.2.3 活性判定
• 3.3 烟曲霉酸抗耐药协同杀菌活性研究
• 3.3.1 测定原理
• 3.3.2 材料与方法
• 3.3.3 活性判定
• 3.4 烟曲霉酸抗菌活性研究
• 3.4.1 测定原理
• 3.4.2 材料与方法
• 3.4.3 活性判定
• 3.5 烟曲霉酸细胞毒活性研究
• 3.5.1 测定原理
• 3.5.2 材料与方法
• 3.5.3 活性判定
• 3.6 烟曲霉酸抗HSV-2 病毒活性筛选
• 3.6.1 测定原理
• 3.6.2 材料与方法
• 3.6.3 活性判定
• 3.7 烟曲霉酸LDLR 荧光素酶报告基因活性筛选
• 3.7.1 测定原理
• 3.7.2 实验部分
• 3.8 结果与讨论
• 3.8.1 烟曲霉酸抗青霉素耐药活性实验结果与讨论
• 3.8.2 烟曲霉酸抗耐药协同抑菌活性实验结果与讨论
• 3.8.3 烟曲霉酸抗耐药协同杀菌活性实验结果与讨论
• 3.8.4 烟曲霉酸抗菌活性实验结果与讨论
• 3.8.5 烟曲霉酸细胞毒和抗病毒（HSV-2）活性实验结果与讨论
• 3.8.6 烟曲霉酸LDLR 荧光素酶报告基因活性筛选结果与讨论
• 3.9 参考文献
• 第四章 烟曲霉酸抗细菌耐药性作用机理的研究
• 4.1 实验部分
• 4.1.1 实验材料
• 4.1.2 实验仪器
• 4.1.3 实验方法
• 4.2 实验结果
• 4.3 讨论
• 4.4 参考文献
• 第五章 β-内酰胺酶研究进展
• 5.1 A 型β-内酰胺酶
• 5.1.1 TEM
• 5.1.2 SHV
• 5.1.3 CTX-M
• 5.1.4 其它A 型β-内酰胺酶
• 5.2 B 型β-内酰胺酶
• 5.2.1 IMP
• 5.2.2 VIM
• 5.3 C 型β-内酰胺酶
• 5.4 D 型β-内酰胺酶
• 5.5 参考文献
• 小结
• 个人简历及攻读博士学位期间发表及待发表论文
• 致谢