论文摘要
背景支气管哮喘是由淋巴细胞、嗜酸性粒细胞和肥大细胞等多种炎性细胞、炎症介质和细胞因子共同参与的一种气道慢性炎症。免疫反应在哮喘的发病机制中占有重要地位。目前有人研究发现哮喘的发病的重要基础是辅助性T细胞两种亚型Th1和Th2细胞组成的比例和功能失衡。肺泡巨噬细胞可通过吞噬凋亡的嗜酸性粒细胞、中性粒细胞等而有利于哮喘气道炎症的消退,同时也可通过释放多种细胞因子和蛋白酶,参与哮喘免疫炎症反应及气道的修复和重构,为支气管哮喘的重要效应细胞之一。因此,研究巨噬细胞在支气管哮喘发病机制中的作用,调控巨噬细胞功能可能为支气管哮喘治疗提供一个新思路。CpG-ODN是含未甲基化的CpG二核苷酸的寡核苷酸序列,和细菌DNA一样具有强烈的免疫刺激作用,能激活哺乳动物巨噬细胞、树突状细胞等多种免疫细胞。CpG-ODN还能诱导Th1细胞因子产生,抑制Th2细胞因子的释放,诱导Th1反应,下调Th2反应,并使Th2反应向Th1反应转变,使Th1/Th2免疫反应达到平衡的状态。而调节Th1/Th2平衡对哮喘的治疗具有重要意义。其激活效应细胞途径是通过Toll样受体9（Toll like-receptor,TLR-9）介导的。TLR-9在识别CpG-ODN后,通过结构域募集髓样分化因子（Myeloid differentiation factor 88,MyD88）,核因子κB等多条信号途径,启动细胞活化进程,上调主要组织相容性复合物和共刺激分子表达等,进而诱导各种炎性细胞因子的表达。因此研究CpG-ODN与TLR-9相互识别后对巨噬细胞细胞因子的分泌,TLR-9自身表达的影响,对于揭开CpG-ODN调控巨噬细胞功能的分子机制具有重要意义。目的（1）从mRNA和蛋白水平分析CpG-ODN刺激鼠巨噬细胞后对鼠巨噬细胞TLR-9的表达。探讨CpG-ODN调控巨噬细胞TLR-9表达的特征。（2）检测CpG-ODN刺激前后巨噬细胞上清液中Th1类细胞因子TNF-α、IL-12及Th2类细胞因子IL-6的表达水平,了解CpG-ODN刺激鼠巨噬细胞后对Th1/Th2类细胞因子分泌的影响。探讨CpG-ODN调控巨噬细胞功能及TLR-9表达的分子机制。方法（1）本研究采用体外培养小鼠单核-巨噬细胞系RAW264.7细胞,分别用CpG-ODN,Non-CpG-ODN,CpG-ODN+氯喹和培养基刺激巨噬细胞24小时,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测并比较各组细胞TLR-9mRNA的表达情况,同时用免疫印迹法（Western blotting）进一步验证TLR-9蛋白的表达。（2）放免法检测各组巨噬细胞上清液中TNF-α、IL-6的表达水平。酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组巨噬细胞上清液中IL-12的表达水平。结果（1）刺激24小时后,CpG-ODN与CpG-ODN+氯喹组巨噬细胞上清中TLR-9mRNA的表达均显著高于Non-CpG-ODN及对照组（P＜0.05）,用Western blotting法进一步证实了CpG-ODN与CpG-ODN+氯喹组巨噬细胞上清中TLR-9蛋白的表达较Non-CpG-ODN及对照组明显增加（P＜0.05）。（2）巨噬细胞上清液中TNF-α水平CpG-ODN组明显高于其他组,差异有显著性（P＜0.05）。而各组巨噬细胞上清液中IL-6,IL-12水平无显著性差异（p＞0.05）。结论CpG-ODN刺激鼠巨噬细胞24小时后可引起鼠巨噬细胞TLR-9无论在蛋白水平还是在核酸水平表达均增高,并且能增加巨噬细胞上清液中Th1类细胞因子TNF-α水平,但不增加Th2类细胞因子IL-6及Th1类细胞因子IL-12水平,从而调节Th1/Th2类细胞因子的分泌。CpG-ODN能很好的调控巨噬细胞功能,将为支气管哮喘治疗提供一个新思路。
论文目录
相关论文文献
- [1].HIV-1感染鼠巨噬细胞功能的检测[J]. 现代检验医学杂志 2008(01)
- [2].人脐带来源间充质干细胞对佐剂性关节炎大鼠巨噬细胞功能的影响[J]. 中国临床药理学与治疗学 2019(12)
- [3].大鼠巨噬细胞感染弓形虫的基因表达谱分析[J]. 中国人兽共患病学报 2016(04)
- [4].黄连素对H9c2心肌细胞缺氧性损伤大鼠巨噬细胞功能的影响[J]. 医学新知杂志 2019(03)
- [5].康艾注射液对大鼠巨噬细胞酶活性的影响[J]. 中国应用生理学杂志 2014(05)
- [6].槲皮素对矽肺纤维化大鼠巨噬细胞和核因子-κB的影响[J]. 工业卫生与职业病 2015(04)
- [7].miRNA-223靶向FoxO3抑制肺结核大鼠巨噬细胞凋亡研究[J]. 浙江医学 2019(15)
- [8].miR-144负性调节大鼠巨噬细胞TOLL样受体2的表达[J]. 南方医科大学学报 2015(03)
- [9].黑沙蒿的化学成分及其生物活性研究[J]. 化学与生物工程 2016(03)
- [10].基于NLRP3炎性体信号通路研究桂枝芍药知母汤对尿酸钠诱导大鼠巨噬细胞炎性信号表达的影响[J]. 中国中医基础医学杂志 2016(04)
- [11].FITC标记的GSTP1蛋白在鼠巨噬细胞中的定位[J]. 南京师大学报(自然科学版) 2008(02)
- [12].MeCP2促进山姜素对鼠巨噬细胞炎性因子表达的抑制及其分子机制[J]. 现代免疫学 2019(04)
- [13].电针丰隆穴对高脂血症模型大鼠巨噬细胞炎症因子表达的影响[J]. 中国中西医结合杂志 2013(10)
- [14].白细胞介素-17对脱氧皮质酮/盐诱导的高血压心肌纤维化大鼠巨噬细胞极化的影响[J]. 中国现代医学杂志 2019(24)
- [15].甲磺酸多黏菌素对大鼠巨噬细胞免疫功能的影响[J]. 中国临床药理学杂志 2017(05)
- [16].细茎石斛中抗氧化的有效成分研究[J]. 中国现代药物应用 2012(02)
- [17].CpG-ODN对鼠巨噬细胞TLR-9及Th1/Th2类细胞因子分泌的影响[J]. 安徽医科大学学报 2008(01)
- [18].脂肪间充质干细胞移植对输血相关急性肺损伤大鼠巨噬细胞表面TLR4及CD40的影响[J]. 中国老年学杂志 2018(24)
- [19].兰州市大气细颗粒物对大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响[J]. 环境与健康杂志 2008(03)
- [20].化瘀通阳方对溃疡性结肠炎大鼠巨噬细胞炎性蛋白-2的影响[J]. 中国中西医结合杂志 2018(01)
- [21].非甲基化的CpG寡核苷酸对鼠巨噬细胞Toll样受体9及Th1/Th2类细胞因子分泌的影响[J]. 中华哮喘杂志(电子版) 2008(01)
- [22].日本血吸虫感染鼠巨噬细胞IL-13Rα2的表达[J]. 中国人兽共患病学报 2011(07)
- [23].结核分枝杆菌eis基因对鼠巨噬细胞Raw264.7自噬影响的研究[J]. 中国微生态学杂志 2014(07)
- [24].五种生物材料对大鼠巨噬细胞肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β表达的影响[J]. 中国组织工程研究与临床康复 2008(32)
- [25].瘦素与动脉粥样硬化的相关性研究现状[J]. 岭南心血管病杂志 2011(S1)
- [26].HSP 70各亚型在染尘体外细胞模型中表达[J]. 中国公共卫生 2009(08)
- [27].PMMA骨水泥颗粒对大鼠巨噬细胞RANK表达的影响[J]. 中国骨质疏松杂志 2009(04)
- [28].桂枝芍药知母汤对尿酸钠诱导的大鼠巨噬细胞Toll-MyD88信号通路炎性信号表达的影响[J]. 中医学报 2017(05)