散发性乳腺癌BRCA1、BRCA2基因突变的研究

论文摘要

研究目的 遗传性乳腺癌和卵巢癌易感基因（hereditary breast and ovarian cancer susceptibility gene）包括BRCA1和BRCA2，是一种抑癌基因。本研究检测BRCA1和BRCA2基因在散发性乳腺癌中的突变情况，探讨BRCA1和BRCA2基因突变与乳腺癌的关系。 研究方法 选取144例乳腺癌患者标本作实验组，另取非癌乳腺组织标本30例作对照组。以上标本每一例分别捣碎，分别用酚-氯仿抽提法提取DNA，紫外分光光度仪测定DNA纯度及含量。针对各个外显子的碱基序列特征，有目的地设计有助于筛查基因碱基突变的PCR引物。每一例DNA标本用PCR扩增BRCA1基因的exon2、exon3、exon5、exon6、exon7、exon8、exon9、exon10、exon11、exon12、exon13、exon14、exon15、exon16、exon17、exon18、exon19、exon20、exon21、exon22、exon23和exon24共22个外显子和BRCA2基因的exon10和exon14共2个外显子。分别将每一例外显子的PCR扩增产物进行SSCP分析，对泳动变位或出现异常区带的PCR扩增产物进行DNA测序，对难于行SSCP分析的外显子（exon2和exon3）的PCR扩增产物直接测序。并对BRCA1突变相关性乳腺癌和非BRCA1突变乳腺癌病例的病理和免疫组化特点进行对照研究。 研究结果 30例非癌乳腺组织未检测出BRCA1和BRCA2基因突变，144例乳腺癌共检测出20例BRCA1基因碱基改变，其中2例为3外显子的同义突变（233G＞A，233G＞A），2例为5外显子的错义突变（273C＞G，287A＞T），1例为9外显子的错义突变（690G＞A），2例为11外显子的同义突变（2430T＞C，2630T＞G），8例为11外显子的错义突变（2532T＞G，2685T＞C（2例），3191C＞G，3232A＞G，3667A＞G（2例），3876C＞A），1例为12外显子的错义突变（4285G＞A），2例为17外显子的错义突变（5115T＞C，5116A＞G），2例为18外显子的错义突变（5214C＞T，5206T＞A）。BRCA2基因exon11和exon14未检测出突变。乳腺癌BRCA1的基因外显子的总突变率为13.9％（20／144），其中错义突变率为11.1％（16／144）。本研究对20例BRCA1单核苷酸改变的相关性乳腺癌的病理和免疫组化特点进行了研究，发现突变相关性乳腺癌与非BRCA1突变乳腺癌相比，具有发病年龄早，肿瘤分化

论文目录

• 缩略语表
• 一、论文：散发性乳腺癌BRCA1、BRCA2基因突变的研究
• 中文摘要（关键词）
• 英文摘要（关键词）
• 前言
• 1.实验材料与方法
• 1.1 主要仪器与试剂
• 1.2 缓冲液及凝胶等的组成
• 1.3 标本
• 1.4 DNA提取方法
• 1.5 PCR引物
• 2.实验程序
• 2.1 PCR扩增
• 2.2 SSCP分析
• 2.3 DNA序列分析
• 2.4 免疫组织化学检测
• 2.5 统计学方法
• 3.实验结果
• 3.1 PCR扩增结果
• 3.2 SSCP分析结果
• 3.3 DNA序列分析结果
• 3.4 病理免疫组化结果
• 3.5 BRCA基因突变相关性乳腺癌的病理和免疫组织化学特点
• 4.讨论
• 4.1 BRCA1基因突变与乳腺癌的关系
• 4.2 BRCA2基因在散发性乳腺癌中的突变情况
• 4.3 BRCA1基因突变与乳腺癌临床病理因素的关系
• 5.结论
• 参考文献
• 二、文献综述
• 1.综述内容
• 1.1.BRCA基因的定位、发现
• 1.2.1 BRCA基因的结构和功能
• 1.2.2 BRCA基因杂合性丢失（LOH）
• 1.3.BRCA基因在乳腺癌中的突变
• 1.3.1 BRCA基因在家族性乳腺癌中的突变
• 1.3.2 BRCA基因在散发性乳腺癌中的突变
• 1.4.BRCA基因突变与其它基因蛋白的关系
• 1.5.BRCA基因突变与乳腺癌预后的关系
• 1.6.结语
• 2.参考文献
• 致谢
• 个人简历
• 研究生阶段发表的文章
• 参加的会议