ESW和低剂量间歇rhPTH1-34刺激对ROB增殖分化的影响及其细胞内信号转导机制

论文摘要

现已知各种物理因素及化学刺激在成骨过程中起重要的调节作用,这些因素综合作用,共同完成对成骨的调节。目前医学界尚未完全探明这些机制,这些机制的阐明对于临床上骨病及骨创伤的治疗皆有重要意义。成骨细胞和骨细胞一直被认为是主要的应力感受细胞。低能体外冲击波（ESW）作为一种物理能量,能够穿透外层组织直接作用于成骨细胞,引起多种生物效应从而影响成骨。近来研究证实,ESW作用于成骨细胞后会激活蛋白激酶C（PKC）、丝裂酶原激活蛋白激酶（MAPK）等促进细胞增殖。但其作用的具体细胞内信号转导机制尚有待于进一步明确。目前研究表明甲状旁腺素PTH也对骨形成具有调节作用。正常人体内PTH的分泌遵循两种时相原则:①PTH分泌量在频繁活动中,这种浓度特点可以调节血钙平衡。②PTH分泌状态高度稳定,每天的分泌次数、分泌量都有一定规律,这一浓度变化特点有助于骨形成。研究也证实:连续给予较高剂量PTH可使实验动物体内骨形成减少;而周期性低剂量给予PTH可使实验动物体内成骨增加。但其机制并未完全明了。本研究采用可促进成骨的物理刺激—ESW和能促进成骨的化学刺激—低剂量间歇性人重组甲状旁腺素1-34（rhPTH1-34）刺激作用于体外培养的大鼠成骨细胞（ROB）,来观察它们对ROB体外成骨的影响,并探讨其分子机制。另外,PTH作用于成骨细胞的体内环境中,由于液体流动、活体运动等因素,也是处于持续的应力刺激之下;因而本课题进一步在体外将应力刺激ESW和低剂量间歇式rhPTH1-34刺激因素结合起来,模拟ROB生长的体内环境观察两者对体外培养ROB成骨的影响,在体外证明ESW刺激可通过“ESW→PKC（某些亚型）→p38 MAPK→ROB成骨分化”信号转导通路起作用;而间歇性人重组甲状旁腺素1-34（rhPTH1-34）刺激可通过“间歇性rhPTH1-34→PKC（另外一些亚型）→ROB成骨分化”信号转导通路起作用;两种刺激共同作用的效果比各自单独作用效果显著增强。这也为临床应用ESW和rhPTH1-34促进骨折愈合提供理论依据。

论文目录

• 提要
• 英文缩略词表
• 绪论
• 第一部分 体外冲击波、甲状旁腺素与成骨—综述
• 1、体外冲击波原理与成骨
• 2、人甲状旁腺素与成骨
• 3、研究现状及展望
• 第二部分 大鼠成骨细胞原代培养、鉴定
• 1、前言
• 2、材料和方法
• 3、结果
• 4、讨论
• 5、结论
• 第三部分 ESW和低剂量间歇rhPTH1-34刺激对体外培养ROB增殖分化的影响
• 1、前言
• 2、材料和方法
• 3、实验结果
• 4、讨论
• 5、结论
• 第四部分 ESW和低剂量间歇rhPTH1-34刺激促进体外培养ROB增殖分化的细胞内信号转导机制
• 1、前言
• 2、材料和方法
• 3、实验结果
• 4、讨论
• 5、结论
• 第五部分 结论
• 参考文献
• 附图
• 攻读博士期间发表论文
• 中文摘要
• Abstract
• 致谢