论文摘要
目的研究凋亡抑制基因bcl-2反义寡核苷酸（ASODN）和促凋亡基因bax联合转染对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响以及对裸鼠皮下移植瘤的生长抑制作用，进而探求其放射增敏作用。方法用逆转录病毒颗粒感染Hela细胞，获得Hela-bax细胞，然后，将bcl-2ASODN转染Hela及Hela-bax细胞，36h后放射治疗，通过MTT法、细胞形态学及流式细胞仪检测细胞增殖与凋亡，半定量RT-PCR测定bcl-2及bax基因的表达。运用Balb／c裸鼠建立宫颈癌移植瘤模型，随机分成正常对照组、bcl-2 SODN治疗组、bcl-2ASODN组、bax组和双基因联合治疗组，分别处理后定期测量肿瘤体积，并计算抑瘤率，并在治疗结束后应用缺口末端脱氧核苷酸转移酶标记技术（TUNEL法）检测移植瘤细胞的凋亡。结果Hela细胞经bcl-2ASODN及bax联合转染并放疗后，光镜观察有明显凋亡趋势，MTT法及流式细胞仪检测其凋亡率明显高于单基因转染+放疗组（P＜0.05），RT-PCR结果显示bax基因表达显著增强，而bcl-2基因表达较各对照组则明显减弱。体内实验25只裸鼠2周后均达成瘤标准，并在治疗第17天后，bcl-2ASODN组及bax组的抑瘤率与对照组、SODN组比较开始有显著性差异（P＜0.01）；治疗第21天时，采用60Coγ射线6Gy对移植瘤单次照射；治疗结束时双基因组抑瘤率为40.0％，与其他组比较均有统计学意义（P＜0.01）；TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡结果显示，高倍镜视野下双基因组凋亡阳性细胞数为40.5±4.9个，与其他组比较有显著性差异（P＜0.01）。结论凋亡抑制基因bcl-2ASODN和促凋亡基因bax联合转染诱导Hela细胞凋亡效果明显优于单基因转染，可有效提高Hela细胞的放射敏感性。bcl-2ASODN与bax联合治疗比单基因治疗能更有效的促进人宫颈癌Hela细胞裸鼠皮下移植瘤细胞凋亡、抑制肿瘤生长。