五种血小板抗体检测方法的比较及其优化

论文摘要

目的：血小板制品的广泛使用，大大减少了由于血小板减少所引起的致命出血性死亡病例的发生。然而，长期的血小板输注可能带来血小板输注无效的严重后果，从而导致输入的血小板功能无法得到充分的发挥。血小板的采集操作过程、病人的病情以及免疫因素是引起血小板输注无效的主要原因。至今，由免疫因素引起的血小板输注无效成为比较重要的限制血小板正常输注的因素之一。因此，同种免疫和血小板输注无效将成为血小板输注过程中始终困扰临床的一个问题。所以，如何找到一个有效的针对病人血小板抗体特异性的检测方法至关重要。 方法：由于大多数的抗体是HLA抗体，因此本研究应用下列5种血清学方法对67例非血小板自身存在疾病的输血病人的血液标本进行了检测。（1）固相酶联免疫吸附试验（ELISA方法），该方法运用亲和层析分离手段，用从数百份血小板混合制剂中提取的HLA抗原来检测病人血清中的HLA特异性IgG抗体；（2）糖蛋白特异性单克隆抗体固相血小板抗体试验（MASPAT），其原理应用免疫吸附试验来进行检测；（3）流式细胞术，该方法运用免疫荧光技术来进行血小板交叉配血和抗体检测，这有助于预测有免疫抗体的病人输注ABO配合的血小板后所产生的临床效果；（4）微柱凝胶法（MCGT），该方法比较方便；（5）简易致敏红细胞血小板血清检测（SEPSA）方法进行检测和筛选血小板抗体。通过对以上5种检测方法的比较来分析它们之间的优劣。在此基础上对MCGT方法进行了优化，并把它和MASPAT方法进行了对比性研究。另外，我们还建立了有755名苏州的互不相关人群组成的血小板供者库，用于提供HLA匹配的血小板给相关的病人，血小板供者库的HLA-A和HLA-B位点运用PCR-SSP技术进行了检测。 结果：MASPAT法样本组中检测到的抗体阳性率为8.96％，与文献报道的结果相符。ELISA方法可以区分HLA抗体和非HLA抗体，其敏感性和特异性接近于MASPAT方法。

论文目录

• 研究背景
• 第一部分 血小板抗体检测方法比较
• 第二部分 微柱凝胶法血小板抗体检测的方法改良
• 第三部分 苏州人群HLA-A、B基因分型及血小板供者库的建立
• 小结
• 附录
• 缩写词表
• 研究生学习期间已发表及待发表的论文
• 本课题所获的基金资助
• 致谢
• 详细摘要