Cre/loxP位点特异性重组酶系统联合SV40LTAg诱导人黑素细胞可逆性永生化

Cre/loxP位点特异性重组酶系统联合SV40LTAg诱导人黑素细胞可逆性永生化

论文摘要

白癜风是一种常见的后天性局部脱色素性皮肤病,据国内外统计其发病率约为0.52%,且有逐年增高趋势。白癜风的病因和发病机制尚未明确,病理表现为皮损局部表皮和毛囊中的黑素细胞(melanocytes,MC)减少或缺失,从而使黑素合成减少或缺失,临床表现为境界清楚的色素脱失斑。近年来,国外学者研究表明,白癜风患者皮损局部和全身均可检测到针对MC表面抗原的自身抗体和细胞毒性CD8+T细胞,认为白癜风是一种自身免疫性脱色素性皮肤病。白癜风的治疗比较困难,目前有很多治疗方法,主要包括光化学治疗、内服药物治疗、外用药物治疗以及外科治疗,前三种治疗方法都存在疗效个体差异大、副作用大等不足,外科治疗主要包括自体表皮移植、自体MC移植和异体MC移植等方法,其中自体MC移植是疗效最肯定、副作用最小的方法,因而外科治疗已经成为白癜风治疗研究的热点。目前临床应用于移植治疗的MC主要来源于患者自身正常皮肤分离的MC体外培养。成人表皮中MC含量极少,只占表皮细胞的2%左右,正常情况下体外培养的MC生长缓慢、增殖能力极为有限,常需使用促MC生长因子如经典的霍乱毒素(cholera toxin,CT)、十四烷酰佛波醇乙酯(12-o-tetradecanoylphorbol-13-acetate,TPA)以及近年逐渐被重视的碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、转铁蛋白、氢化可的松、牛垂体提取物等。我们应用黑素细胞专用培养基M254及添加剂HMGS(包含TPA、bFGF、转铁蛋白、氢化可的松和牛垂体提取物等),进行成人正常表皮MC的分离与培养,经系列生物学鉴定细胞表型和生物学功能正常,同时观察到MC体外传代最多不超过10代,能得到的MC数量有限,远不能满足临床移植治疗所需,极大地限制了MC移植治疗的临床应用。因此,MC的来源已经成为白癜风及其它脱色素性皮肤病外科治疗发展的瓶颈,需要积极探索MC体外大量培养的有效方法和途径,为自体MC移植提供安全、有效且可大量反复使用的移植供体。组织工程学的原理是利用人工的功能性组织替代功能障碍的器官或组织,其中,细

论文目录

  • 英文缩写
  • 英文摘要
  • 中文摘要
  • 论文正文 Cre/loxP 位点特异性重组酶系统联合 SV40LTAg 诱导人黑素细胞可逆性永生化
  • 前言
  • 第一部分 细胞永生化载体 SV40LTAg-loxP-EGFP-neo 的构建
  • 前言
  • 材料与方法
  • 结果
  • 讨论
  • 第二部分 SV40LTAg 诱导的人永生化黑素细胞
  • 前言
  • 材料与方法
  • 结果
  • 讨论
  • 第三部分 Cre/loxP 位点特异性重组酶系统诱导的人可逆性永生化黑素细胞
  • 前言
  • 材料与方法
  • 结果
  • 讨论
  • 第四部分 白癜风动物模型的制备与可逆性永生化黑素细胞移植实验
  • 前言
  • 材料与方法
  • 结果
  • 讨论
  • 全文结论
  • 致谢
  • 参考文献
  • 文献综述一 SV40 LTAg 诱导细胞永生化的机制
  • 参考文献
  • 文献综述二 位点特异性重组酶系统及其应用
  • 参考文献
  • 攻读博士期间发表文章
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    • [3].Cre/loxp位点特异性重组系统在转基因植物中的应用[J]. 福建农业学报 2008(02)
    • [4].Cre/loxP位点特异性重组系统在植物中应用的研究进展[J]. 中国农业科学 2010(06)
    • [5].Cre/loxP位点特异性重组系统及其在口腔医学领域中的应用[J]. 国际口腔医学杂志 2011(01)
    • [6].Cre/Loxp系统在转基因拟南芥杂交后代中的删除效率分析[J]. 西南师范大学学报(自然科学版) 2015(07)
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    • [9].Cre/LoxP系统联合SV40 LTag诱导可复性永生化大鼠皮肤成纤维细胞系的建立[J]. 中国医科大学学报 2011(11)
    • [10].Cre/Loxp重组酶系统与转基因[J]. 安徽农业科学 2010(08)
    • [11].基于Cre/loxP重组系统的多基因载体构建及烟草转化研究[J]. 北京林业大学学报 2010(05)
    • [12].植物无标记转化的诱导表达Cre/loxP重组系统的构建[J]. 石河子大学学报(自然科学版) 2008(01)
    • [13].利用信息肽诱导和Cre/LoxP系统构建猪链球菌基因缺失株[J]. 中国预防兽医学报 2019(02)
    • [14].用Cre/LoxP和CRISPR基因工程技术构建猪肌肉生长抑制素双等位基因敲除细胞系[J]. 中国生物化学与分子生物学报 2017(03)
    • [15].应用Cre/loxp系统构建含有BAC序列的重组伪狂犬病毒[J]. 中国动物传染病学报 2017(02)
    • [16].Cre/loxP系统介导删除酿酒酵母ALD_4基因研究[J]. 中国酿造 2009(03)
    • [17].基于Cre/loxP系统的无筛选标记转耐低磷转录因子GmPTF1大豆种质创制与分析[J]. 作物学报 2019(05)
    • [18].Cre/LoxP系统介导的位点特异性重组技术[J]. 安徽农学通报(上半月刊) 2009(15)
    • [19].利用Cre/loxP系统和rd29A启动子构建诱导型植物标记基因删除载体[J]. 分子植物育种 2009(05)
    • [20].一种利用Cre/loxP系统进行标记基因删除与靶基因置换的细胞模型研究(英文)[J]. 生物化学与生物物理进展 2008(06)
    • [21].利用CRISPR-Cas9技术和Cre/loxP系统构建猪伪狂犬病病毒gE基因缺失疫苗株[J]. 畜牧与兽医 2020(10)
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