温莪术中β-榄香烯的分离鉴定及抑制肿瘤细胞增殖作用研究

论文摘要

目的：利用CO2超临界流体萃取技术结合柱层析方法从温莪术中提取分离β-榄香烯,为β-榄香烯的制剂研究提供基础。方法与结果：利用CO2超临界流体萃取技术提取温莪术中的挥发油,通过正交试验,以β-榄香烯的得率为指标,结果最佳萃取条件为：萃取压力30MPa、萃取温度40℃、CO2流量24L/h、萃取时间90 min。以200-300目的柱层析硅胶装柱,30-60℃石油醚洗脱,分离出β-榄香烯,并用质谱、红外色谱、核磁共振氢谱、核磁共振碳谱等方法进行鉴定。MTT法分别做了不同浓度β-榄香烯对人喉鳞癌Hep-2细胞、人胰腺癌细胞、乳腺癌MCF-7/S细胞、白血病Raji细胞增殖作用的实验,结果β-榄香烯对四种癌细胞增殖都有抑制作用,并随浓度增大抑制作用增强。结论：CO2超临界流体萃取技术结合柱层析方法可获得高纯度的β-榄香烯,工艺方法切实可行,稳定可靠,体外抑制癌细胞增殖实验为β-榄香烯制剂研究提供了理论基础。

论文目录

• 提要
• Abstract
• 引言
• 第一部分 选题依据
• 1 研究的目的与意义
• 2 温莪术的研究概述
• 2.1 来源及功效
• 2.2 有效成分
• 3 β-榄香烯的研究进展
• 3.1 化学成分
• 3.2 药代动力学
• 3.3 药理作用
• 3.4. 临床应用
• 2超临界流体萃取技术简介'>4 CO₂超临界流体萃取技术简介
• 4.1 原理
• 4.2 优点
• 2超临界萃取β-榄香烯的工艺研究'>第二部分 CO₂超临界萃取β-榄香烯的工艺研究
• 1 仪器与材料
• 2 方法与结果
• 2超临界萃取实验方法'>2.1 CO₂超临界萃取实验方法
• 2超临界萃取工艺的优选'>2.2 CO₂超临界萃取工艺的优选
• 2.3 β-榄香烯含量测定方法
• 2.4 验证试验
• 2.5 讨论
• 第三部分 β-榄香烯的分离及鉴定
• 1 层析法简介
• 1.1 层析法分类
• 1.2 柱层析
• 2 提取分离步骤
• 2.1 仪器与材料
• 2.2 层析装置
• 2.3 样品胶的制备
• 2.4 装柱
• 2.5 胶柱的洗脱
• 2.6 薄层层析检测
• 2.7 样品的收集
• 2.8 纯度测定
• 3 鉴定
• 3.1 仪器与试剂
• 3.2 色谱条件和质谱条件
• 3.3 结果
• 4 讨论
• 第四部分 β-榄香烯对癌细胞增殖作用的实验研究
• 1 仪器
• 2 试剂
• 3 溶液的配制
• 3.1 RPMI-1640培养基
• 3.2 PBS
• 3.3 胰蛋白酶（1:250）
• 3.4 胎牛血清灭活
• 3.5 MTT储存液
• 3.6 抗储存液
• 4 实验方法
• 4.1 细胞传代培养
• 4.2 MTT法检测β-榄香烯对细胞的增殖作用
• 5 实验结果
• 6 讨论
• 结语
• 参考文献
• 发表论文
• 致谢
• 中文详细摘要