气相色谱质谱联用技术对水产品中激素多残留检测的研究

论文摘要

激素化合物能提高饲料转化率并促进动物生长而被广泛用于水产养殖行业。然而残留在动物组织中的天然和合成激素对人体健康具有潜在的致癌性等危害,已被许多国家限制或禁止其在食用性动物养殖中使用。但由于利益驱动,这些化合物仍然被滥用,因此,很有必要建立可靠的分析方法对水产品中激素残留量进行监控。本文通过建立气相色谱质谱联用测定方法对水产品中多种激素残留检测进行了研究。1、建立了不同鱼贝类肌肉组织中以氘代同位素为内标测定β-雌二醇残留量的气相色谱-质谱（GC-MS）方法。样品中加入内标β-雌二醇-D2和乙酸钠缓冲溶液匀质后,用乙腈超声提取,经过正己烷脱脂,C18固相萃取柱净化和柱前三甲基硅烷化后,进行GC-MS分析。根据β-雌二醇和内标衍生物保留时间、主要特征离子及其相对丰度定性;选择离子监测（SIM）模式下,根据β-雌二醇和内标衍生物定量离子质量色谱图的峰面积比值,内标法定量。实验结果表明,在0.005～0.25μg/mL范围内,衍生物定量离子峰面积比值与β-雌二醇浓度呈现良好线性关系,相关系数为0.9995;方法定量检测限为0.2μg/kg;当添加水平为0.2～5.0μg/kg时,回收率为68.5%～100.1%,相对标准偏差为4.8%～10.1%,获得了良好的灵敏度和准确性。通过对市场上鱼贝类的检测,表明该法可实现对样品进行灵敏、准确的定性定量分析,同时,实验室验证结果,进一步证明本方法可靠,能满足实际样品检测的要求。2、通过对样品前处理、衍生化技术、仪器分析条件等方面进行探索,建立了水产品中26种促蛋白合成同化性激素多残留的气相色谱-质谱方法。样品中加入内标β-雌二醇-D2和乙酸钠缓冲溶液,匀质,β-葡糖苷酸酶/硫酸酯酶酶解后,用乙腈、正己烷、乙酸乙酯超声提取,经过正己烷脱脂和固相萃取双柱体系净化,MSTFA-DTE-TMIS、HFBA、MSTFA分别衍生化后,进行GC-MS分析。SIM模式下,根据保留时间、主要特征离子及其相对丰度定性;基质匹配内标标准曲线或单点法校准定量。实验结果表明,激素化合物在各自浓度范围内线性关系良好,相关系数大于0.98;方法定量检测限为0.1～2.0μg/kg;平均加标回收率为61.1%～115.3%,相对标准偏差为1.0%～14.1%,能达到国内外技术法规的要求。通过对市售常见鲜活水产品的抽检,进一步证明本方法可行有效,能灵敏、准确的对样品进行定性定量分析。通过初步调研水产动物食品来源的激素组成与含量情况,并与其它动植物源及人体自身分泌情况相比较,简单评价了激素残留引发的水产品食用安全。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 1 激素简介
• 1.1 激素的定义、生理作用、分类和结构
• 1.2 兽药用激素及其残留的危害
• 1.3 各国对动物源性食品中激素残留的要求
• 2 激素残留分析测定的国内外研究进展
• 2.1 激素残留的提取方法
• 2.2 样品的净化方法
• 2.3 激素残留的检测方法
• 2.4 水产品中激素残留的分析测定
• 3 本研究的目的和意义
• 1 水产品中β-雌二醇残留的气相色谱-质谱测定法的建立
• 1.1 引言
• 1.2 实验材料
• 1.2.1 实验试剂
• 1.2.2 实验溶液
• 1.2.3 实验仪器与设备
• 1.3 实验方法
• 1.3.1 测定步骤
• 18固相萃取柱净化条件的选择'>1.3.2 C₁₈固相萃取柱净化条件的选择
• 1.3.3 衍生化条件的选择
• 1.3.4 标准曲线的绘制
• 1.3.5 方法回收率及精密度的测定
• 1.3.6 方法定量检测限的测定方法
• 1.4 结果与讨论
• 1.4.1 提取溶剂的选择
• 1.4.2 脱脂净化方法的选择
• 18固相萃取柱净化条件的优化'>1.4.3 C₁₈固相萃取柱净化条件的优化
• 1.4.4 衍生化条件的优化
• 1.4.5 色谱及质谱条件的确定
• 1.4.6 线性范围、方法定量检测限
• 1.4.7 方法回收率及精密度
• 1.4.8 样品实测
• 1.4.9 方法验证
• 1.5 小结
• 2 水产品中促蛋白合成同化性激素多残留的气相色谱-质谱测定法的建立
• 2.1 引言
• 2.2 实验材料
• 2.2.1 实验试剂
• 2.2.2 实验溶液
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 测定步骤
• 2.3.2 SPE净化体系的优化
• 2.3.3 衍生化条件的选择
• 2.3.4 内标物浓度的选择
• 2.3.5 激素热稳定性和加工耐热性
• 2.3.6 基质匹配标准曲线的绘制
• 2.3.7 方法回收率及精密度的测定
• 2.3.8 方法定量检测限的测定方法
• 2.4 结果与讨论
• 2.4.1 衍生化试剂的选择
• 2.4.2 衍生化产物稳定性
• 2.4.3 激素热稳定性和加工耐热性
• 2.4.4 内标物及其浓度的选择
• 2.4.5 酶解条件、提取溶剂和提取方法的选择
• 2.4.6 SPE净化体系的优化
• 2.4.7 色谱质谱条件及定性定量方法
• 2.4.8 线性范围、方法定量检测限
• 2.4.9 方法回收率及精密度
• 2.4.10 样品实测及水产品食用安全初步评价
• 2.5 小结
• 3 结论
• 参考文献
• 附录1
• 附录2
• 附录3
• 致谢
• 个人简历、发表的学术论文