导读:本文包含了完全抗原论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:多克隆抗体,CIM,完全抗原
完全抗原论文文献综述
司艳芳,岳锋,李鹏,郭东光,朱艳平[1]（2019）在《西马特罗完全抗原的合成和多克隆抗体的制备》一文中研究指出西马特罗(Cimaterol,CIM)也叫做喜马特洛,塞曼特罗。属于β-受体激动剂的一种,临床上可以治疗支气管炎等疾病,但过量服用会引起人体中毒。西马特罗属于苯胺型β-受体激动剂中的一种。极性中等,k Pa值在9.5左右,多为白色晶体结构[1]。通常能溶于乙醚、氯仿、乙酸乙酯、甲醇等溶剂。不同的PH值也会影响其溶解状态。目前国内外一些无良养殖场将其添加在猪饲料中,以增加猪肉蛋白质量,减少脂肪量。研究目的:鉴于免疫学检测技术的特点,ELISA现在被作为初步筛选一些药物残留的检测方法。利用ELISA检测时,抗体质量的好坏与否对检测结果至关重要,然而得到特异性高的抗体又取决于高质量的免疫原。针对我国的食品安全问题,迫切的需要一种快捷简便的药残检测体系,为食品检测体系的健全提供支持。材料方法:影响人工抗原免疫原性的主要因素包括载体蛋白的性质、半抗原的分子空间结构、间隔臂的长度和分子结合比等[2]。对于带有氨基的半抗原与载体蛋白的偶联一般采用重氮化法、戊二醛和EDC法,有研究证实,重氮化法适用于芳香胺而GA法适合于脂肪胺的报道[3]。本研究根据CIM的结构综合各种方法的利弊之后采用重氮化法进行完全抗原的合成。用UV、SDS-PAGE、MALDI-TOF-MS叁种方法同时鉴定。用偶联成功的西马特罗-牛血清白蛋白(CIM-BSA)完全抗原,抗原50ug/只,与佐剂等体积乳化至"油包水"的状态,然后通过采用背部皮下多点注射的方法注射入兔子体内。先后进行叁次免疫,每次免疫间隔14-16天。在第叁次免疫后的第10天左右进行耳缘静脉采血。采用ELISA的方法对兔子血清效价进行检测。用包被液稀释偶联成功的西马特罗-鸡卵清白蛋白(CIM-OVA)至5ug/ml,加入至相应的酶标板,100ul/孔,4度包被过夜,次日用PBST洗板叁次并排干,用5%脱脂奶粉封闭2h以上。相同的方法洗板,排干后将取得的血清倍比稀释加入对应的孔,37℃条件下静置孵育0.5h后相同的方法洗板,排干后加入1:5000的羊抗兔-Ig G(HRP),最后加入TMB显色液,每孔100ul,用2MH2So4溶液终止显色反应,放在酶标仪中读数,以OD450约为1.00对应孔的血清的最大稀释倍数作为判断多抗血清效价的依据。结果:成功合成了完全抗原并采用叁种方法验证,免疫动物后获得了效价为1:204800的血清。说明此次成功的制备了完全抗原并达到了良好的免疫效果。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集》期刊2019-07-27）
曹金博,胡骁飞,王耀,李燕虹,曹夕丹[2]（2019）在《土霉素完全抗原的制备及ELISA检测方法的建立》一文中研究指出为制备土霉素(Oxytetracycline,OTC)完全抗原,获得免疫学特性良好的土霉素鼠源多抗血清并建立OTC免疫学检测方法,采用重氮化法在OTC分子上引入羧基,进而利用改进碳二亚胺法将其与载体蛋白偶联制备完全抗原,通过红外扫描、紫外扫描和凝胶电泳鉴定其偶联效果,然后将完全抗原免疫BLAB/c小鼠获得多抗血清(pAb)并对其免疫学特性进行鉴定,通过优化条件建立OTC间接竞争ELISA检测方法。结果表明,偶联效果良好,免疫的4只小鼠多抗血清效价均达到1∶12 800;4只小鼠多抗血清均有抑制效果,其中2号小鼠产生的多抗血清效果最佳,基于该多抗血清建立的OTC间接竞争ELISA检测方法半数抑制浓度(IC_(50))为32.92ng/mL,检测限(LOD)为1.3ng/mL,牛奶样品中添加回收率在84.70%～87.45%,与金霉素、四环素的交叉反应率分别为5.27%,4.10%,与其他竞争物交叉反应率<0.4%。该试验成功合成了OTC完全抗原,获得了免疫学特性良好的OTC多抗血清,并建立了OTC免疫学检测方法。(本文来源于《食品与机械》期刊2019年09期）
王奇奇[3]（2019）在《洛克沙胂完全抗原的制备及其单克隆抗体的研制》一文中研究指出洛克沙胂(Roxarsone,ROX)是有机砷制剂的一种,由于它具有抗球虫,促进生长等作用,被广泛应用于畜禽养殖中。但随着科学技术的发展,人们逐渐意识到了ROX带来的不良影响,欧盟、美国、中国都相继禁止ROX的使用或者规定了ROX的最低检测限,因此必须建立ROX的快速检测方法。目前检测ROX最常用的方法仍是仪器检测法,包括色谱法和质谱法等,但这些方法需要昂贵的仪器设备,且需专业人员进行操作;而免疫学快速检测方法具有快速,特异,且能大批量检测样品的特点,对ROX的现场快速筛查具有重要的意义。优质的抗体是建立免疫学快速检测方法的关键,目前针对ROX的免疫学快速检测方法主要是以多克隆抗体作为检测抗体,尚未有ROX单克隆抗体检测产品的相关报导。本研究旨在研制出高特异性、高灵敏度的抗体,为建立ROX免疫学快速检测方法打下基础。本研究以ROX的结构类似物3-氨基-4-羟基苯胂酸(HAPA)作为ROX的替代物,用碳二亚胺(EDC)将BSA与HAPA通过酰胺键相连,制备人工合成抗原HAPA-BSA;用戊二醛将OVA与HAPA的伯氨基相连,制备用于检验的包被抗原HAPA-OVA。用紫外扫描、SDS-PAGE鉴定合成的HAPA-BSA和HAPA-OVA,结果证明HAPA与BSA、OVA分别连接成功。用HAPA-BSA免疫3只小鼠,收集四次免疫后血清,测定效价为1:6.4×10~3,IC_(50)值为63.533μg/mL。利用细胞融合技术制备杂交瘤细胞,有限稀释法对阳性细胞亚克隆,筛选出一株可以稳定分泌抗ROX抗体的杂交瘤细胞株,命名为3G12。收集3G12细胞株培养液,间接ELISA测定效价为1:5.12×10~2,IC_(50)值为3.147μg/mL。随后以腹腔诱生腹水法大量制备单克隆抗体,收集腹水并用辛酸-硫酸铵法纯化,SDS-PAGE结果表明纯化后条带单一;间接ELISA测定纯化前后腹水效价,结果显示纯化前后腹水效价均可达到1:1.024×10~5,纯化后腹水的IC_(50)值为1.433μg/mL。综上所述本研究成功研制得到了抗ROX的单克隆抗体,为建立ROX的免疫学快速检测方法奠定了基础。(本文来源于《郑州大学》期刊2019-04-01）
刘红亮,王奇奇,张改平,祁艳华,周景明[4]（2019）在《洛克沙胂完全抗原的制备及其单克隆抗体的研制》一文中研究指出本研究以洛克沙胂(ROX)的结构类似物3-氨基-4-羟基苯胂酸(HAPA)为小分子半抗原,采用碳二亚胺法,分别将其与载体蛋白——牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,制备免疫抗原HAPA-BSA和检测抗原HAPA-OVA。经紫外光谱扫描及聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定后,以20μg/只剂量的HAPA-BSA免疫BALB/c小鼠;选择血清效价高、敏感性强的小鼠,取脾脏进行细胞融合,制备杂交瘤细胞株。利用间接ELISA法筛选得到1株可以稳定分泌抗ROX单克隆抗体的细胞株,命名为G12;间接ELISA法测定其细胞上清效价为1:512,间接竞争ELISA测定其半数抑制浓度IC_(50)为3.147 ng/μL。经小鼠体内诱生腹水,辛酸-硫酸铵法纯化获得纯度较高的单克隆抗体,间接ELISA测定其效价为1:102 400,IC_(50)为1.433 ng/μL,且具有良好的特异性。本试验成功合成了ROX人工抗原,并制备了可以分泌高敏感性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,为ROX免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。(本文来源于《中国动物检疫》期刊2019年02期）
祁艳华,孙国苹,张改平,陈玉梅,刘燕凯[5]（2019）在《泰妙菌素人工完全抗原的制备及其单克隆抗体的研制》一文中研究指出目的研制灵敏度高、特异性好的抗泰妙菌素(TML)单克隆抗体。方法用肟化法和碳二亚胺法将TML分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,制备免疫原TML-BSA和包被原TML-OVA,用TML-BSA免疫BALB/c小鼠,经细胞融合并采用间接ELISA筛选抗TML杂交瘤细胞株,用体内诱生法制备腹水和辛酸-硫酸铵法纯化获得单克隆抗体,并用SDS-PAGE鉴定。结果成功筛选出2株杂交瘤细胞株3B3和4A7,其细胞上清效价分别为1∶1600和1∶6400。纯化后单克隆抗体4A7的效价为5.12×10~5,半数抑制剂量(IC_(50))为0.049 ng/mL,亲和力常数Kaff为1.47×10~9 L/mol,与类似物瑞他帕林有2.7%的交叉反应率,与沃尼妙林、氟罗沙星等其他抗生素均无交叉反应。结论成功研制了抗TML单克隆抗体。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2019年02期）
高子函,黄金林[6]（2019）在《喹乙醇代谢物完全抗原的合成与多克隆抗体的制备》一文中研究指出目的制备喹乙醇代谢物3-甲基-喹啉-2-羟酸的多克隆抗体,为食品安全快速检测喹乙醇代谢物提供支持。方法用乙酰甲喹制备喹乙醇代谢物3-甲基-喹啉-2-羧酸半抗原,再经以活化酯法制备喹乙醇代谢物-OVA(OLAOVA)与喹乙醇代谢物-BSA(OLA-BSA),用质谱分析鉴定完全抗原;采用长程免疫法免疫小鼠,用间接ELISA法检测抗体血清效价,用竞争ELISA法检测所得抗体特异性与灵敏度。结果成功制备了喹乙醇代谢物-OVA与喹乙醇代谢物-BSA完全抗原,长效免疫小鼠并获得血清抗体效价均达到1∶104以上。结论经过长程免疫法可以得到高效价抗体血清,为食品安全快速检测提供技术支撑。(本文来源于《解放军预防医学杂志》期刊2019年01期）
王奇奇,李金鸽,王琨,王爱萍[7]（2018）在《洛克沙胂完全抗原的制备和鉴定》一文中研究指出背景:有机砷化合物洛克沙胂(ROX)已被广泛用作饲料添加剂,以便提高饲料的转化率并增加动物体重。同时饲料中添加一定量的洛克沙胂也可以减少疾病的发生,洛克沙胂可以预防和治疗家禽的球虫病以及猪的出血性肠炎。然而,许多研究指出,洛克沙胂可以在动物体内积累,引起家畜中毒,具体表现为失明,肌肉震颤和四肢瘫痪等。另一方面,饲料中的洛克沙胂可随粪便排出并释放到环境中。在土壤和水环境中,洛克沙胂会发生生物化学降解,并转化为稳定但毒性更大的无机砷化合物,对人类健康和环境构成潜在风险。因此必须建立有效的检测洛克沙胂含量的方法。目的:本实验其目的在于合成洛克沙胂完全抗原,并进行鉴定,为后续制备洛克沙胂单克隆抗体打下基础。方法 :本实验最终采用碳二亚胺(EDC)法分别合成ROX-BSA和ROX-OVA。称取一定量的BSA或OVA,并同时加入EDC和NHS使其充分溶解于2mL PBS中,得到反应液A。称取一定量的ROX用2.5 mLPBS溶解,得到反应液B。将B液逐滴加入加入A液中,4℃搅拌过夜,PBS透析。结果 :用SDS-PAGE和分光光度计对合成的完全抗原进行鉴定,SDS-PAGE结果显示合成的完全抗原相比于BSA和OVA有明显的拖尾现象。紫外扫描的结果显示合成的完全抗原的紫外吸收峰相对于ROX、BSA和OVA的紫外吸收峰有明显的不同,表明完全抗原制备成功。结论 :以ROX-BSA为免疫原免疫小鼠,以ROX-OVA为包被原,并采用间接竞争ELISA的方法对免疫后的多抗血清进行检测。结果表明多抗血清可以有效的识别洛克沙胂。为后续制备可以识别洛克沙胂的单克隆抗体和建立有效的检测洛克沙胂免疫学方法打下了基础。(本文来源于《第十叁届全国免疫学学术大会摘要汇编》期刊2018-11-07）
李金鸽,祁艳华,张晨阳,张瑶,王爱萍[8]（2018）在《氨苯砷酸完全抗原的合成及鉴定》一文中研究指出背景:氨苯砷酸(Arsanilic acid,ASA)是一种抗菌剂,饲料添加剂,可用于促进猪、鸡等家畜的生长。ASA还可使机体同化作用加强,促进蛋白质合成,改善机体营养,增强骨髓的造血机能。但是,许多研究都指出使用氨苯砷酸添加剂高于推荐值水平时可导致氨苯砷酸在动物体内累积。另一方面,饲料中的氨苯砷酸在动物体内不能被吸收和分解而随粪便排出,这些被污染的有机肥被用在农田中会造成环境污染。因此我们需要一种有效的方法检测出饲料中过量的ASA。现如今,最常用的检测方法为仪器分析法和免疫分析法。仪器分析法包括质谱法(MS)和高效液相色谱法(HPLC)。该方法往往需要昂贵的仪器、操作繁琐且需要专业的技术人员,不适用于检测大量样品。目的 :本实验的目的是从免疫分析法的角度着手,合成氨苯砷酸完全抗原,为后续制备氨苯砷酸单克隆抗体打下基础,从而建立快速、灵敏的ASA残留的检测方法。方法 :本研究利用重氮化法把ASA和牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)偶联合成免疫原ASABSA,把ASA和鸡卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)偶联合成检测原ASA-OVA。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和紫外扫描的方法鉴定合成的抗原,结果显示紫外扫描波峰有明显偏移初步鉴定合成成功。并用考马斯亮蓝蛋白含量测试盒测得制备的完全抗原ASA-BSA的蛋白浓度为2 mg/m L,ASA-OVA的蛋白浓度为1.6 mg/m L。最后用ASA-BSA免疫6-8周龄的Balb/c雌性小鼠,采用皮下多点注射的方法,四免后尾部采血测得小鼠血清抗体效价,最高可达1:6400,半数抑制浓度(IC_(50))为1.22 ng/uL。结果 :实验结果表明ASA-BSA免疫的小鼠产生了免疫应答,成功制备了ASA-BSA完全抗原,为下一步获得特异性的单克隆抗体奠定了基础。(本文来源于《第十叁届全国免疫学学术大会摘要汇编》期刊2018-11-07）
牛艳,刘燕凯,王奇奇,李金鸽,张静[9]（2018）在《洛克沙胂完全抗原的制备及鉴定》一文中研究指出背景:洛克沙胂(Roxarsone, ROX)对多种肠道致病菌有较强的抑制和杀灭作用,促进畜禽生长,提高饲料转化率,促进畜色素沉积,改善动物外观。同时对防止猪腹泻、鸡球虫、黑头病有良好的效果,在畜牧生产中广泛用作猪和鸡的饲料添加剂。美国食品和药物管理局(FDA)在对鸡肉进行实验研究后发现,洛克沙砷可能致使鸡体中含有致癌物质砷。我国农业部公布自2019年5月1日起,停止经营、使用洛克沙胂的原料药及各种制剂。目前,主要采用高效液相色谱法(HPLC)对土壤、畜禽粪便、饲料添加剂、组织样品或者鸡蛋中的洛克沙胂含量进行检测,该方法存在需要昂贵的仪器,对操作人员要求较高,不能满足大众基层单位一次性大量快速检出的要求等缺点。因此运用免疫学方法对洛克沙胂进行高效、快速检测具有广泛的应用价值。目的 :洛克沙胂属于半抗原物质,不能刺激机体产生相应抗体,只有与大分子蛋白偶联制备洛克沙胂完全抗原后才能刺激动物产生免疫反应,才具有免疫原性。因此,合成具有强免疫原性的洛克沙胂人工抗原是获得抗ROX单克隆抗体的关键。方法 :本研究用混合酸酐法将半抗原洛克沙胂偶联至载体牛血清白蛋白(BSA),制备了免疫原ROX-BSA。同时将半抗原洛克沙胂偶联至载体卵清白蛋白(OVA),制备了包被原ROX-OVA。对制备的免疫原和包被原做紫外扫描和SDS-PAGE鉴定,通过紫外扫描可观察到波峰有偏移,且电泳图谱观察到目的蛋白条带(ROX-BSA、ROX-OVA)较对照条带(BSA、OVA)在位置上有明显滞后性,可初步判定偶联成功。并用考马斯亮蓝蛋白含量测试盒测得制备的完全抗原ROX-BSA的蛋白浓度为0.8 mg/mL,ROX-OVA的蛋白浓度为1.34 mg/mL。最后用ROX-BSA免疫3只6-8周龄的雌性Balb/c小鼠,采用皮下多点注射的方法,四免后10天尾部采血,间接ELISA法检测小鼠血清抗体效价,最高可达1:2.56×10~4。结果 :ROX-BSA能够刺激小鼠产生高效价的抗ROX抗体,成功制备了ROX完全抗原,为下一步获得高亲和力和高特异性的抗ROX单克隆抗体奠定了基础。(本文来源于《第十叁届全国免疫学学术大会摘要汇编》期刊2018-11-07）
郉云瑞,孙亚宁,姚静静,王英华,郝慧芳[10]（2018）在《T-2毒素完全抗原制备及免疫学检测方法的建立》一文中研究指出为建立小分子霉菌毒素中T-2毒素残留的检测方法,合成并鉴定T-2毒素完全抗原,通过制备敏感性强的抗T-2毒素多抗血清,建立T-2毒素免疫学检测方法。采用N,N'-羰基二咪唑(CDI)法合成完全抗原T-2-BSA和包被原T-2-OVA,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)和动物免疫试验对合成的完全抗原进行鉴定,优化ELISA反应条件,建立T-2毒素间接竞争ELISA检测方法。SDS-PAGE结果显示,完全抗原T-2-BSA合成成功;动物试验结果显示,制备的完全抗原能够刺激小鼠产生针对T-2毒素的特异性抗体;基于该抗体所建立的T-2毒素间接竞争ELISA检测方法的灵敏度(IC50)为8.34 ng/m L,检测限(LOD)为0.048 ng/m L。综上,成功合成了完全抗原T-2-BSA,获得了效价高、敏感性强的抗T-2毒素的鼠源多克隆抗体,并初步建立了T-2毒素免疫学检测方法。(本文来源于《河南农业科学》期刊2018年04期）
完全抗原论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为制备土霉素(Oxytetracycline,OTC)完全抗原,获得免疫学特性良好的土霉素鼠源多抗血清并建立OTC免疫学检测方法,采用重氮化法在OTC分子上引入羧基,进而利用改进碳二亚胺法将其与载体蛋白偶联制备完全抗原,通过红外扫描、紫外扫描和凝胶电泳鉴定其偶联效果,然后将完全抗原免疫BLAB/c小鼠获得多抗血清(pAb)并对其免疫学特性进行鉴定,通过优化条件建立OTC间接竞争ELISA检测方法。结果表明,偶联效果良好,免疫的4只小鼠多抗血清效价均达到1∶12 800;4只小鼠多抗血清均有抑制效果,其中2号小鼠产生的多抗血清效果最佳,基于该多抗血清建立的OTC间接竞争ELISA检测方法半数抑制浓度(IC_(50))为32.92ng/mL,检测限(LOD)为1.3ng/mL,牛奶样品中添加回收率在84.70%～87.45%,与金霉素、四环素的交叉反应率分别为5.27%,4.10%,与其他竞争物交叉反应率<0.4%。该试验成功合成了OTC完全抗原,获得了免疫学特性良好的OTC多抗血清,并建立了OTC免疫学检测方法。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
完全抗原论文参考文献
[1].司艳芳,岳锋,李鹏,郭东光,朱艳平.西马特罗完全抗原的合成和多克隆抗体的制备[C].中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集.2019
[2].曹金博,胡骁飞,王耀,李燕虹,曹夕丹.土霉素完全抗原的制备及ELISA检测方法的建立[J].食品与机械.2019
[3].王奇奇.洛克沙胂完全抗原的制备及其单克隆抗体的研制[D].郑州大学.2019
[4].刘红亮,王奇奇,张改平,祁艳华,周景明.洛克沙胂完全抗原的制备及其单克隆抗体的研制[J].中国动物检疫.2019
[5].祁艳华,孙国苹,张改平,陈玉梅,刘燕凯.泰妙菌素人工完全抗原的制备及其单克隆抗体的研制[J].细胞与分子免疫学杂志.2019
[6].高子函,黄金林.喹乙醇代谢物完全抗原的合成与多克隆抗体的制备[J].解放军预防医学杂志.2019
[7].王奇奇,李金鸽,王琨,王爱萍.洛克沙胂完全抗原的制备和鉴定[C].第十叁届全国免疫学学术大会摘要汇编.2018
[8].李金鸽,祁艳华,张晨阳,张瑶,王爱萍.氨苯砷酸完全抗原的合成及鉴定[C].第十叁届全国免疫学学术大会摘要汇编.2018
[9].牛艳,刘燕凯,王奇奇,李金鸽,张静.洛克沙胂完全抗原的制备及鉴定[C].第十叁届全国免疫学学术大会摘要汇编.2018
[10].郉云瑞,孙亚宁,姚静静,王英华,郝慧芳.T-2毒素完全抗原制备及免疫学检测方法的建立[J].河南农业科学.2018