论文题目: 白英抗肿瘤有效部位筛选及作用机制初探
论文类型: 硕士论文
论文专业: 药理学
作者: 任靖
导师: 王敏伟,孙立新
关键词: 白英,抗肿瘤,有效部位,凋亡,流式细胞术
文献来源: 沈阳药科大学
发表年度: 2005
论文摘要: 本文通过对白英乙醇提取物、乙酸乙酯部位、正丁醇部位体外对人肝癌BEL-7402、人胃腺癌SGC-7901及人宫颈癌HeLa细胞等肿瘤细胞的增殖抑制作用及体内对小鼠移植性肝癌H22和肉瘤S180肿瘤生长抑制作用的研究确定白英抗肿瘤作用主要有效部位,并对其体外诱导人宫颈癌HeLa细胞死亡机制进行初步研究。选取体外培养的人肝癌BEL-7402、人胃腺癌SGC-7901和人宫颈癌HeLa细胞为模型,以半数抑制浓度(IC50)为指标,采用MTT法初步筛选白英抗肿瘤作用主要有效部位;体内以小鼠移植性肿瘤肝癌H22和肉瘤S180为模型,以抑瘤率为指标,进一步确定白英抗肿瘤作用的主要有效部位;以体外培养的人宫颈癌HeLa细胞为模型,采用形态学荧光染色、LDH活力测定、流式细胞术分析等方法对白英乙酸乙酯部位的抗肿瘤作用机制进行初步研究。体外实验结果表明白英不同提取部位对体外培养的BEL-7402、SGC-7901和HeLa细胞均具有显著的细胞增殖抑制活性,且对细胞生长的抑制作用呈现显著的浓度、时间依赖关系,作用48h后对BEL-7402、SGC-7901和HeLa细胞的IC50值分别为:乙醇提取物:287.4±5.8μg·mL-1、176.1±5.2μg·mL-1和297.5±7.0μg·mL-1;乙酸乙酯部位:106.2±5.8μg·mL-1、65.4±6.0μg·mL-1和33.7±4.9μg·mL-1;正丁醇部位:180.2±6.3μg·mL-1、114.9±4.9μg·mL-1和59.3±4.8μg·mL-1。体内实验表明白英不同提取部位对小鼠移植性肉瘤S180均具有显著的抗肿瘤活性,其中乙醇提取物高剂量组和乙酸乙酯部位高剂量组对肉瘤S180及肝癌H22的生长抑制率均达到40%以上;正丁醇部位对小鼠移植性肉瘤S180的抑制作用显著而对肝癌H22的抑制作用不显著。50μg·mL-1白英乙酸乙酯部位处理的HeLa细胞经Hoechst 33258形态学荧光染色出现明显的凋亡小体;LDH活力分析实验表明,白英乙酸乙酯部位处理HeLa细胞诱导细胞死亡的过程中有一定的凋亡细胞的分布,合适剂量的白英乙酸乙酯部位诱导细胞凋亡;对其采用流式细胞术分析,适当剂量或作用时间后出现凋亡特征峰;随药物浓度增大或作用时间延长,乙酸乙酯部位处理的HeLa细胞各时相的细胞百分含量发生显著的变化,G0/G1期细胞百分含量呈显著上升趋势。由实验结果可见,白英乙酸乙酯部位是白英抗肿瘤作用主要有效部位;白英乙酸乙酯部位体外可诱导HeLa细胞凋亡,且对HeLa细胞呈现显著的细胞周期抑制作用,可将细胞周期阻滞在G0/G1期。
论文目录:
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
第二章 实验材料及试剂配制
第三章 实验方法
1 白英抗肿瘤有效部位筛选
1.1 白英不同提取部位对多种人癌细胞的体外增殖抑制活性
1.2 白英不同提取部位的最大给药量实验
1.3 白英不同提取部位的体内抗癌活性筛选
2 白英乙酸乙酯部位抗肿瘤作用机制研究
2.1 HeLa细胞形态学观察
2.2 HeLa细胞乳酸脱氢酶(LDH)活力测定
2.3 白英乙酸乙酯部位对HeLa细胞细胞周期的影响
第四章 实验结果
1 白英抗肿瘤有效部位筛选
1.1 白英不同提取部位对多种人癌细胞的体外增殖抑制活性
1.2 白英不同提取部位的最大给药量实验
1.3 白英不同提取部位的体内抗癌活性
2 白英乙酸乙酯部位抗肿瘤作用机制研究
2.1 HeLa细胞形态学观察
2.2 白英乙酸乙酯部位对HeLa细胞乳酸脱氢酶(LDH)活力的影响
2.3 白英乙酸乙酯部位对HeLa细胞细胞周期的影响
第五章 讨论
第六章 结论
参考文献
缩略词表
致谢
发布时间: 2006-12-14
参考文献
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