LUNX mRNA为主要分子标志物联合检测非小细胞肺癌淋巴结微转移

LUNX mRNA为主要分子标志物联合检测非小细胞肺癌淋巴结微转移

论文摘要

本文探讨了LUNX、CK19、CD326等分子标志物mRNA的表达与非小细胞肺癌患者淋巴结微转移发生发展的关系,尝试从分子水平重新评价淋巴结N分期,有助于将来进一步指导术后辅助治疗及评价预后。该实验共采集了23例非小细胞肺癌患者的19例肺癌组织和116组淋巴结,3例良性肺疾病患者的11组淋巴结,肺癌患者术前均未经过任何抗肿瘤治疗。每组淋巴结标本一半用常规病理组织学检查。一半用巢式RT-PCR方法检测淋巴结中LUNX、CK19、CD326基因mRNA的表达,并以此来检测淋巴结微转移。用卡方检验比较两种方法结论的差异。23例非小细胞肺癌患者中,组织学检测检测出5例患者的14组淋巴结存在癌转移。用巢式RT-PCR法检测LUNX基因的mRNA的表达,19例肺癌组织标本均为阳性。淋巴结标本中共检测出22例患者的73组淋巴结阳性,并且组织学检测证实存在癌转移的14组淋巴结也全部是阳性。在23例患者的102组组织学检测未检出转移的淋巴结中有22例患者的59组淋巴结检测出了微转移。3例良性肺疾病患者的11组淋巴结,都没有检测到LUNX mRNA表达。组织学检测检测淋巴结转移和巢式RT-PCR法检测LUNX mRNA表达的阳性率分别为12.07%(14/116)和63.79%(74/116)(P<0.05),从病例上统计,两种方法淋巴结转移率分别为21.74%(5/23),95.65%(22/23)(P<0.05)。用巢式RT-PCR法检测CK19和CD326基因的mRNA,发现23例非小细胞肺癌患者的19例肺癌组织、116组淋巴结和3例良性肺疾病患者的11组淋巴结都是阳性。该研究结果提示用巢式RT-PCR法检测淋巴结组织中LUNX基因的mRNA的表达,是检测非小细胞肺癌淋巴结微转移的一种敏感而特异的方法,它对于精确患者的N分期有很高的价值,其对于患者预后以及个体化治疗的有重大的意义。研究结果提示没有癌转移的淋巴结中可能存在着表达CK19 mRNA和CD326 mRNA的上皮细胞,所以用这两种标志物以非形态学方法定性检测淋巴结微转移可能存在阳性率过高的问题,结果未必可靠。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 前言
  • 材料与方法
  • 一、病例选择
  • 二、实验标本
  • 三、主要仪器和试剂
  • 四、总RNA 的提取
  • 五、cDNA 第一链的合成
  • 六、PCR 反应条件的优化
  • 七、PCR 反应条件
  • 八、人肺癌细胞系的培养和掺入实验
  • 结果
  • 一、总RNA 提取的结果
  • 二、巢式RT-PCR 条件的优化
  • 三、掺入实验结果
  • 四、临床实验结果
  • 讨论
  • 一、用巢式 RT-PCR 方法检测淋巴结微转移的优点
  • 二、微转移检测标志物的选择
  • 三、巢式 RT-PCR 方法检测淋巴结微转移假阳性和假阴性产生的原因和解决办法
  • 四、巢式RT-PCR 法检测淋巴结微转移对非小细胞肺癌患者N 分期的影响
  • 五、检测淋巴结微转移的意义
  • 参考文献
  • 淋巴结微转移的研究进展
  • 一、微转移的定义
  • 二、检测淋巴结微转移的意义
  • 三、哨兵淋巴结微转移的研究方法和意义
  • 四、淋巴结微转移的研究方法
  • 五、常用于淋巴结微转移检测的标志物
  • 六、问题与展望
  • 参考文献
  • 致谢
  • 相关论文文献

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