硫酸木质素作为候选杀微生物剂预防HIV性传播研究

论文摘要

尽管预防和治疗HIV病毒感染的的手段不断发展和完善,但全球HIV/AIDS感染人群的比例仍在上升,研究表明,无保护的性交已成为当前感染HIV的最主要的途径,因此发展预防HIV性传播的杀微生物剂已经破在眉睫,本文旨在研究硫酸木质素是否能够作为候选杀微生物剂,预防和治疗HIV的性传播。本研究所用的硫酸木质素是植物来源的木质素经硫酸化得来的,平均分子量为8KDa,我们的研究表明,硫酸木质素具有高效的抗HIV的活性,能够有效地对抗各种HIV-1实验室毒株和临床分离株的感染,time-of-addition实验和细胞.细胞融合实验表明LSA是一种入胞抑制剂,经Ellisa检测发现,硫酸木质素主要是是通过干扰gp120和CD4分子的结合抑制病毒与靶细胞膜的融合,从而阻止HIV的进入。体外安全性实验表明,硫酸木质素对病毒作用的靶细胞和阴道上皮细胞安全无毒。这些结果说明了硫酸木质素具备了发展为理想杀微生物剂的基本条件：高效,安全,来源广泛,价格低廉,因此可作为预防HIV性传播的杀微生物剂进行研发。本文将硫酸木质素和逆转录酶抑制剂合用,结果发现硫酸木质素和逆转录酶抑制剂具有协同作用,能够提高疗效,减少药物的毒副作用,这为杀微生物剂的临床开发提供了新的思路。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1. 研究背景
• 1.1. 艾滋病的发现及在世界和我国的现状
• 1.2. HIV-1的传播途径
• 1.3. HIV-1的治疗策略和现状
• 2. 杀微生物剂现状及其必要性
• 2.1. 杀微生物剂概念
• 2.2. 杀微生物剂的研究进展
• 2.3. 杀微生物剂的应用前景及面临问题
• 3. 聚阴离子化合物抗HIV-1活性作用机理研究进展
• 3.1. 硫酸多糖抗HIV-1活性作用机理
• 3.2. 硫酸多糖的应用前景
• 3.3. LSA的结构及性质
• 参考文献
• 第二章 LSA体外抗HIV活性及机制研究
• 1. 前言
• 2. 材料与方法
• 2.1. 细胞及病毒质粒
• 2.2. 主要试剂
• 2.3. 主要仪器和设备
• 3. 实验步骤与方法
• 3.1. HIV假病毒的制备及滴度测定
• 3.1.1 HIV-1假病毒的制备
• 3.1.2 LSA对ghost毒性作用
• 3.2. LSA体外抗HIV-1活性检测
• 3.2.1 细胞培养,病毒和样品的准备
• 3.2.2 LSA对HIV-1的抑制作用
• 3.3. MTT法检测LSA体外对细胞毒性作用
• 3.3.1 LSA对ghost毒性作用
• 3.3.2 LSA对VK-2毒性作用
• 3.4 检测LSA对VSV-G的抑制作用
• 3.5 Time-of-drug-addition检测
• 3.6 细胞-细胞 融合检测
• 3.7 Elisa法检测LSA抑制gp120和CD4的结合
• 3.8 检测LSA和逆转录酶抑制剂nevirapine,AZT的协同作用
• 3.8.1 LSA和nevirapine的协同作用
• 3.8.2 LSA和AZT的协同作用
• 4 结果与分析
• 4.1 LSA能够有效抑制HIV-1假病毒
• 4.2 LSA对VK-2细胞的毒性作用
• 4.3 LSA对VSV-G假病毒的抑制作用
• 4.4 Time-of-drug-additon检测表明LSA作用于病毒的入胞阶段
• 4.5 LSA抑制细胞-细胞融合
• 4.6 LSA能够阻止gp120和CD4的结合
• 4.7 LSA与逆转录酶抑制剂AZT和nevirapine均能产生协同抗HIV-1作用
• 5 讨论
• 5.1 LSA抗病毒活性及其作用机制探讨
• 5.2 LSA安全性及可行性评估
• 5.3 LSA与逆转录酶抑制剂的协同应用
• 6 结论
• 参考文献
• 已发表文章列表
• 致谢