山慈姑（独蒜兰）种子无菌萌发与植株再生

论文摘要

兰科植物独蒜兰[Pleione bulbocodioides （Franch.） Rolfe]是生药山慈姑的基原植物,为常用中药,其假鳞茎具有清热化痰、解毒、消痈散结的作用。由于资源有限,加之近年来的过度开采,野生资源已临枯竭而成濒危物种。山慈姑（独蒜兰）种子数目众多,且种子是一团未分化的胚细胞,由于种子难透水、难透气、胚乳发育不完全等原因,在自然条件下几乎不萌发。本实验以山慈姑（独蒜兰）种子作为外植体,通过设计不同培养基组合来诱导种子高频率萌发,获得大量种子苗。在此基础上,利用组织培养方法对种子萌发出的原始球茎进行切割、扩繁,诱导产生愈伤组织和不定芽,以期获得大量试管苗。通过设计不同基本培养基、不同蔗糖浓度、不同活性炭浓度以及不同激素浓度等196种培养基处理对山慈姑种子无菌萌发的影响发现,MS基本培养基、1.0%的蔗糖、0.5%的活性炭这3种处理中萌发率较高,说明它们是山慈姑种子萌发较适的基本培养条件。激素实验中,只添加1.5mg/lIAA的萌发效果最好,萌发率为6.5%,且IAA单激素处理的种子萌发率整体较高,不仅诱导出原始球茎数量多,而且较大。添加了激素NAA的培养基较适宜山慈姑种子苗的生根。通过形态学观察发现,山慈姑种胚从突破种皮到形成原始球茎,最终发育成为完整植株这一过程具有一定的规律性。本实验还对种子萌发得到的原始球茎进行愈伤组织与不定芽的诱导。通过对激素浓度、生长素种类、分裂素种类、活性炭浓度、蔗糖浓度等5种因素进行正交设计,得到8种不同成分培养基。通过对出愈率、分化率、褐化率、愈伤化程度、生长状况等指标进行综合考量,进而筛选出较适宜诱导山慈姑愈伤组织与不定芽的培养基为1／2MS+1.0mg／12,4-D+1.0mg／1 BA+0.1%活性炭+2%蔗糖+0.55%琼脂。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 兰科植物种子培养研究进展
• 1.1.1 概述
• 1.1.2 兰科种子离体无菌萌发技术
• 1.1.3 影响兰科植物种子离体培养因素
• 1.1.4 人工种子
• 1.2 兰科植物组织培养研究进展
• 1.2.1 组织培养程序
• 1.2.2 外植体选择
• 1.2.3 培养基
• 1.2.4 培养方式
• 1.2.5 外源激素
• 1.2.6 培养条件
• 1.3 山慈姑（独蒜兰）研究进展
• 1.3.1 本草考证
• 1.3.2 种质资源
• 1.3.3 主要成分和药理作用
• 1.3.4 生物学特性及栽培现状
• 1.3.5 组培现状
• 第2章 不同培养基处理对山慈姑（独蒜兰）种子无菌萌发的影响
• 2.1 材料
• 2.2 方法
• 2.2.1 培养基配制
• 2.2.2 材料处理
• 2.2.3 培养基设计
• 2.2.4 培养条件
• 2.2.5 种子萌发率的计算
• 2.2.6 种子萌发的形态学观察
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 基本培养基对萌发的影响
• 2.3.2 蔗糖浓度对萌发的影响
• 2.3.3 活性炭浓度对萌发的影响
• 2.3.4 激素处理对萌发的影响
• 2.3.5 种子萌发的形态学观察
• 2.4 讨论
• 2.4.1 植物激素及其他因素对山慈姑（独蒜兰）种子无菌萌发的影响
• 2.4.2 种子萌发形态学观察
• 第3章 山慈姑（独蒜兰）愈伤组织诱导与植株再生
• 3.1 实验材料
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 培养基设计与愈伤组织诱导
• 3.2.2 形态学观察与数据处理
• 3.3 结果
• 3.3.1 不同培养基对愈伤组织的诱导
• 3.3.2 方差分析
• 3.3.3 愈伤组织形态观察
• 3.3.4 不同外植体对愈伤组织诱导的影响
• 3.4 讨论
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附录1
• 附录2
• 攻读硕士学位期间发表的论文及科研成果