论文摘要
目的 探讨槐耳清膏对人脐静脉内皮细胞体外构建新生血管的影响及其初步机制。 方法 经酶消化法分离人脐静脉内皮细胞进行体外培养,通过细胞形态学、细胞表型和细胞分泌蛋白鉴定血管形成。应用MTT实验、流式细胞仪、Matrigel实验,体外研究槐耳清音对血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）诱导的人脐静脉内皮细胞（Homo-umbilical vein endothelial cell,HUVECs）增殖和分化成血管能力的影响。用Western Blotting检测不同浓度槐耳清膏对ERK磷酸化水平及RT-PCR检测细胞增殖相关基因c-fos的表达,以初步探讨槐耳清膏抑制血管内皮的分子机制。 结果 血管内皮细胞分离种植后生长良好,流式细胞术检测细胞CD31和FVⅢ因子相关抗原均为阳性表达。浓度为0.1～10mg/ml槐耳清膏明显抑制VEGF诱导的内皮细胞增殖,呈量效关系;流式细胞仪检测表明,槐耳清膏阻止内皮细胞由S期进入G2/M期;槐耳清膏浓度为1mg/ml时,可以抑制内皮细胞体外分化成管样结构,浓度为10mg/ml时,则完全阻断内皮细胞体外分化成管样结构的能力。不同浓度的槐耳清膏处理血管内皮细胞后,对VEGF诱导的ERK磷酸化水平明显降低,VEGF诱导的c-fos表达减少。 结论 槐耳清膏体外对人脐静脉内皮细胞增殖及体外构建新生血管可能有抑制作用,这种抑制可能与ERK活化受抑制有关。
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