导读:本文包含了肝特异表达论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:小鼠,小家鼠,UCP2,解偶联
肝特异表达论文文献综述
商营利,潘晓晨,王友亮,程萱,杨晓[1]（2006）在《肝特异表达解偶联蛋白UCP2转基因小鼠的建立》一文中研究指出线粒体解偶联蛋白(Uncoupling Proteins,UCPs)是位于线粒体内膜的一类保守的家族蛋白。UCP2在不同组织广泛表达,但其生理功能还不完全清楚。已有的研究表明, UCP2在胰腺中调节胰岛素分泌,在免疫组织中抑制炎症发生, 并在神经退行性疾病以及心血管疾病的发生中有重要作用。在正常的肝细胞中,UCP2几乎不表达,但在氧化应激,脂肪变性和病原生物感染等情况下,UCP2表达量则升高。多种肝细胞瘤系中UCP2 表达量也升高。(本文来源于《第十次中国生物物理学术大会论文摘要集》期刊2006-05-01）
刘海兰[2]（2004）在《抗肝特异表达蛋白LFIRE-1/HFREP-1单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用》一文中研究指出肝细胞癌是原发性肝癌的主要类型，它的发病率及死亡率都很高，因此，对肝细胞癌的基础和临床研究以及探索更有效的诊断治疗方法显得尤为重要。单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具，在基因和蛋白质的结构和功能研究方面有着不可或缺的作用，同时也在肿瘤基础研究、临床诊断和治疗中得到了广泛应用。本研究制备了两株抗肝特异表达蛋白LFIRE-1/HFREP-1单克隆抗体，目的是为肝特异表达蛋白LFIRE-1/HFREP-1的功能研究提供实验用检测工具，其研究过程及结果如下： 利用原核表达的LFIRE-1/HFREP-1蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠，经叁次免疫后，分离血清，并建立间接ELISA检测方法为接下来的杂交瘤细筛选作准备。结果显示，最适抗原包被浓度为11靏／ml，血清最适稀释度为1:6400. BALB/c小鼠经LFIRE-1/HFREP-1抗原第四次免疫３天后，取脾细胞与SP2／O骨髓瘤细胞以9:1比例进行融合，PEG4000作融合剂，融合率为94:1%。间接ELISA方法筛选显示，阳性率为89%。应用有限稀释法3次亚克隆并以Westernblot进一步验证，最终筛选得到两株特异分泌LFIRE-I/HFREP-I抗体的杂交瘤细胞株，分别定名为LF307-1LF560-4.杂交瘤细胞株腹腔注射小鼠，体内诱生腹水，腹水单抗通过Protein G-argarose柱纯化。利用SDS-PAGE、ELISA等检测方法对所获单抗进行特性鉴定，结果表明：两株单抗LF307-1、LF560-4的分子量为156.4Kda:亚类分别为:Igg2a(K)、IgG1(K);腹水单抗效价均达1×107,LF307-1单抗的相对亲和力大于LF560-4.单抗的相对亲和力。 单克隆抗体进行初步检测应用：利用单抗检测LFIRE-I/HFREP-1蛋白在人正常肝、肝肿细胞株和其它肿瘤细胞株中表达情况，结果显示：LFIRE-I/HFREP-1蛋白在人正常肝中特异表达，在肝癌细胞株和其它肿瘤细胞株中表达下调或不表达。检测LFIRE-1/HFREP-1同源基因MFREP-1的蛋白在小鼠脏器中表达情况，结果显示：MFREP-1蛋白在小鼠肝组织中特异表达，其它脏器中不表达。最后，为了确定LFIRE-1/HFREP-1蛋白定位于所表达细胞何处．作者通过细胞免疫荧光法对LFIRE-1/HFREP-1蛋白进行了细胞内定位检测，结果显示：LFIRE-I/HFREP-I蛋白定位于表达细胞的细胞质中。 抗肝特异表达蛋白LFIRE-I/HFREP-1单克隆抗体的成功制备及初步应用为LFIRE-I/HFREP-1的进一步功能研究提供了很好的实验手段和检测工具。(本文来源于《东北农业大学》期刊2004-06-01）
严俊[3]（2002）在《肝特异表达基因LFIRE-1/HFREP-1的功能研究及Tributyrin在胃癌治疗中应用的初步研究》一文中研究指出本文的目的在于探讨肝脏特异表达基因LFIRE-1／HFREP-1及其小鼠同源基因MFREP-1的结构、及其在肝癌形成过程／肝脏再生模型中的功能和生物学意义。其次，作者还探讨了天然短链脂肪酸甘油叁酯tributyrin对胃癌细胞作用的分子机制。 (1)本实验室已通过DD-PCR的方法克隆了一个人肝脏特异表达cDNA序列——LFIRE-1。我们发现它与功能未知的序列HFREP-1是一个共同的基因——LFIRE-1／HFREP-1的两个不同剪切体。LFIRE-1／HFREP-1基因定位于人染色体8p22，由8个外显子组成。LFIRE-1／HFREP-1基因编码一个全长为312个氨基酸残基的分泌蛋白。LFIRE-1／HFREP-1基因只在正常人肝脏组织中表达，并且Northern blot杂交和RT-PCR证明，在58.3％的肝癌组织样品中表达量下降。免疫组织化学分析也佐证了这一现象。反义寡聚核苷酸法降低HepG2细胞内源LFIRE-1／HFREP-1的表达，可导致细胞的生长速率加快；而高表达LFIRE-1／HFREP-1能抑制BEL-7402和BEL-7404肝癌细胞的生长和成瘤能力。比较LFIRE-1／HFREP1位点的等位基因状态和表达情况，我们发现17例存在LOH的肝细胞癌中有12例LFIRE-1／HFREP-1的表达下调，相反，在其余9例没有LOH的肿瘤中只有1例肿瘤组织存在下调现象。PCR-SSCP分析和序列测定，在45例肝细胞癌中发现3例肝细胞癌存在LFIRE-1／HFREP-1基因的体细胞突变，其中2例还丢失了剩余的另一个等位基因。上述结果显示，肝脏特异表达基因LFIRE-1／HFREP-1在肝细胞癌中经常发生表达量下调，并可能对肝癌细胞具有生长抑制活性。 (2)我们首次克隆了LFIRE-1／HFREP-1的小鼠同源基因——MFREP-1。该基因编码一个全长为314个氨基酸残基的蛋白，与HFREP-1／LFIRE-1蛋白有80.4％的同源性。MFREP-1也是一个肝脏特异表达基因，在70％部分肝切除的肝再生模型中表达量上升，并在肝再生后期仍然维持一个高表达水平。这提示了MFREP-1蛋白可能在肝再生过程中参与了细胞生长调节。 (3)我们研究了天然中性短链脂肪酸甘油叁酯tributyrin对胃癌细胞SGC-7901的生长、DNA合成以及凋亡的影响。这些结果首次显示tributyrin能有效地通过抑制DNA合成和诱导细胞凋亡达到抑制胃癌细胞生长的作用，细胞凋亡与Bcl-2表达量下调和Bax表达量上升有关。因此，tributyrin可能是一个非常有应用前景的预防和治疗胃癌的天然化学药物。(本文来源于《中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）》期刊2002-12-01）
赵忠良[4]（1996）在《同源引物差示PCR方法的建立及胎肝特异表达基因的差示筛选》一文中研究指出胎肝是一种正处于生长发育阶段的组织，能分泌多种促进细胞生长的因子，特别是近几年来广泛应用的”肝细胞生长素”就是直接从胎肝组织提取的一种混合蛋白多肽成份。但是，由于蛋白纯化方面的原因，以及成分的非单一性，至今也未克隆出它的基因。这也是传统从蛋白到基因研究方法中的一个主要问题。有鉴于此，许多研究人员致力于直接寻找新基因，并发展了一些相应的新技术。其中利用细胞间基因表达差异来筛选新基因的方法是近来受到热切关注的一项重要研究课题，这不仅是因为通过这种途径可以获得大量的与某种细胞功能相关的表达基因信息，更重要的是它还可以揭示许多疾病的发生过程。如肿瘤细胞与正常细胞之间的差异，同一肿瘤在发展过程中不同阶段的差异，这些都将有助于揭示肿瘤发生发展的机理。 目前在利用细胞间基因表达差异来筛选新基因的技术研究方面获得了巨大进展，特别是1992年梁鹏等人建立的mRNA差示PCR技术，极(本文来源于《第四军医大学》期刊1996-05-01）
肝特异表达论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
肝细胞癌是原发性肝癌的主要类型，它的发病率及死亡率都很高，因此，对肝细胞癌的基础和临床研究以及探索更有效的诊断治疗方法显得尤为重要。单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具，在基因和蛋白质的结构和功能研究方面有着不可或缺的作用，同时也在肿瘤基础研究、临床诊断和治疗中得到了广泛应用。本研究制备了两株抗肝特异表达蛋白LFIRE-1/HFREP-1单克隆抗体，目的是为肝特异表达蛋白LFIRE-1/HFREP-1的功能研究提供实验用检测工具，其研究过程及结果如下： 利用原核表达的LFIRE-1/HFREP-1蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠，经叁次免疫后，分离血清，并建立间接ELISA检测方法为接下来的杂交瘤细筛选作准备。结果显示，最适抗原包被浓度为11靏／ml，血清最适稀释度为1:6400. BALB/c小鼠经LFIRE-1/HFREP-1抗原第四次免疫３天后，取脾细胞与SP2／O骨髓瘤细胞以9:1比例进行融合，PEG4000作融合剂，融合率为94:1%。间接ELISA方法筛选显示，阳性率为89%。应用有限稀释法3次亚克隆并以Westernblot进一步验证，最终筛选得到两株特异分泌LFIRE-I/HFREP-I抗体的杂交瘤细胞株，分别定名为LF307-1LF560-4.杂交瘤细胞株腹腔注射小鼠，体内诱生腹水，腹水单抗通过Protein G-argarose柱纯化。利用SDS-PAGE、ELISA等检测方法对所获单抗进行特性鉴定，结果表明：两株单抗LF307-1、LF560-4的分子量为156.4Kda:亚类分别为:Igg2a(K)、IgG1(K);腹水单抗效价均达1×107,LF307-1单抗的相对亲和力大于LF560-4.单抗的相对亲和力。 单克隆抗体进行初步检测应用：利用单抗检测LFIRE-I/HFREP-1蛋白在人正常肝、肝肿细胞株和其它肿瘤细胞株中表达情况，结果显示：LFIRE-I/HFREP-1蛋白在人正常肝中特异表达，在肝癌细胞株和其它肿瘤细胞株中表达下调或不表达。检测LFIRE-1/HFREP-1同源基因MFREP-1的蛋白在小鼠脏器中表达情况，结果显示：MFREP-1蛋白在小鼠肝组织中特异表达，其它脏器中不表达。最后，为了确定LFIRE-1/HFREP-1蛋白定位于所表达细胞何处．作者通过细胞免疫荧光法对LFIRE-1/HFREP-1蛋白进行了细胞内定位检测，结果显示：LFIRE-I/HFREP-I蛋白定位于表达细胞的细胞质中。 抗肝特异表达蛋白LFIRE-I/HFREP-1单克隆抗体的成功制备及初步应用为LFIRE-I/HFREP-1的进一步功能研究提供了很好的实验手段和检测工具。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
肝特异表达论文参考文献
[1].商营利,潘晓晨,王友亮,程萱,杨晓.肝特异表达解偶联蛋白UCP2转基因小鼠的建立[C].第十次中国生物物理学术大会论文摘要集.2006
[2].刘海兰.抗肝特异表达蛋白LFIRE-1/HFREP-1单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用[D].东北农业大学.2004
[3].严俊.肝特异表达基因LFIRE-1/HFREP-1的功能研究及Tributyrin在胃癌治疗中应用的初步研究[D].中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）.2002
[4].赵忠良.同源引物差示PCR方法的建立及胎肝特异表达基因的差示筛选[D].第四军医大学.1996