三种试剂盒检测盐酸克伦特罗残留的比较研究

论文摘要

盐酸克伦特罗（clenbuterol hydrochloride,CL）是一种β2-肾上腺素受体激动剂,20世纪70年代起,被作为“营养重分配剂”及“促生长剂”用于饲料生产中,借以提高动物瘦肉率和减少脂肪率。但由于盐酸克伦特罗具有吸收快、分布广、脂溶性高以及残留性积累和半衰期长的特性,易在动物体内积蓄残留,造成人食用后引起中毒,我国和欧州等国家都明令禁止在畜牧业生产中使用此药。目前,检测盐酸克伦特罗的方法很多,但应用最广的是酶联免疫吸附测定法（ELISA）。但盐酸克伦特罗试剂盒对温度和反应时间的要求很严格,本文就是在这种背景下,研究不同的ELISA试剂盒（德国拜发试剂盒、比利时BIX-O试剂盒和北京望尔试剂盒）,在不同的温度和反应时间下的差别。试验结果表明:温度对ELISA试剂盒的检测结果影响显著,但在一定温度范围内（20℃-37℃）,对检测结果的判断没有影响;反应时间对ELISA试剂盒的影响不显著（反应时间的变化范围为30±5min）;3种试剂盒之间差异不显著,这说明不同竞争类型的试剂盒对检测结果没有影响。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 前言
• 1.1 盐酸克伦特罗的结构和性质
• 1.2 盐酸克伦特罗的药理作用
• 1.3 盐酸克伦特罗的生化功能
• 1.4 盐酸克伦特罗在机体内的吸收、代谢和残留分布
• 1.4.1 盐酸克伦特罗在机体内的吸收
• 1.4.2 盐酸克伦特罗在机体内的代谢
• 1.4.3 盐酸克伦特罗在机体内的残留分布
• 1.5 盐酸克伦特罗的残留检测标准
• 1.6 盐酸克伦特罗检测样品的选择
• 1.7 盐酸克伦特罗检测样品的前处理
• 1.8 盐酸克伦特罗的检测方法
• 1.8.1 高效液相色谱法（HPLC）
• 1.8.2 气相色谱—质谱法联用法（GC-MS）
• 1.8.3 毛细管区带电泳法（CE）
• 1.8.4 酶免疫分析法（IA）
• 1.8.5 滴金免疫技术（DIGFA）
• 1.8.6 时间分辨荧光免疫分析技术（TRFIA）
• 1.8.7 生物传感器技术（BS）
• 1.9 酶联免疫吸附测定方法
• 1.9.1 间接法
• 1.9.2 双抗体夹心法
• 1.9.3 竞争法
• 1.10 商品化盐酸克伦特罗检测试剂盒的原理
• 2 材料与方法
• 2.1 试验设计
• 2.2 试验材料
• 2.2.1 所需仪器
• 2.2.2 试剂盒
• 2.2.3 检测样品
• 2.3 样品处理
• 2.4 测定程序
• 2.4.1 拜发试剂盒测定程序
• 2.4.2 BIX-O试剂盒测定程序
• 2.4.3 望尔试剂盒测定程序
• 3 结果与分析
• 3.1 试验结果
• 3.2 三种试剂盒的温度—吸光值曲线分析
• 3.2.1 拜发试剂盒在25min时的温度—吸光值曲线分析
• 3.2.2 拜发试剂盒在30min时的温度—吸光值曲线分析
• 3.2.3 拜发试剂盒在35min时的温度—吸光值曲线分析
• 3.2.4 BIX-O试剂盒在25min时的温度—吸光值曲线分析
• 3.2.5 BIX-O试剂盒在30min时的温度—吸光值曲线分析
• 3.2.6 BIX-O试剂盒在35min时的温度—吸光值曲线分析
• 3.2.7 望尔试剂盒在25min时的温度—吸光值曲线分析
• 3.2.8 望尔试剂盒在30min时的温度—吸光值曲线分析
• 3.2.9 望尔试剂盒在35min时的温度—吸光值曲线分析
• 3.2.10 小结
• 3.3 三种试剂盒在不同温度下各个反应时间的吸光值分析
• 3.3.1 拜发试剂盒在20℃时各个反应时间的吸光值变化分析
• 3.3.2 拜发试剂盒在25℃时各个反应时间的吸光值变化分析
• 3.3.3 拜发试剂盒在30℃时各个反应时间的吸光值变化分析
• 3.3.4 拜发试剂盒在37℃时各个反应时间的吸光值变化分析
• 3.3.5 BIX-O试剂盒在20℃时各个反应时间的吸光值变化分析
• 3.3.6 BIX-O试剂盒在25℃时各个反应时间的吸光值变化分析
• 3.3.7 BIX-O试剂盒在30℃时各个反应时间的吸光值变化分析
• 3.3.8 BIX-O试剂盒在37℃时各个反应时间吸光值变化分析
• 3.3.9 望尔试剂盒在20℃时各个反应时间的吸光值变化分析
• 3.3.10 望尔试剂盒在25℃时各个反应时间的吸光值变化分析
• 3.3.11 望尔试剂盒在30℃时各个反应时间的吸光值变化分析
• 3.3.12 望尔试剂盒在37℃时各个反应时间的吸光值变化分析
• 3.3.13 小结
• 3.4 三种试剂盒中阳性标样吸光值图分析
• 3.4.1 三种试剂盒阳性标样在反应时间为25min的吸光值图
• 3.4.2 三种试剂盒阳性标样在反应时间为30min的吸光值图
• 3.4.3 三种试剂盒阳性标样在反应时间为35min的吸光值图
• 3.4.4 小结
• 3.5 方差分析
• 3.5.1 温度和试剂盒的可重复双因素分析
• 3.5.2 反应时间和试剂盒的可重复双因素分析
• 3.5.3 温度和反应时间的可重复双因素分析
• 4 讨论
• 4.1 环境温度对三种试剂盒测定结果的影响
• 4.2 反应时间对三种试剂盒的影响
• 4.3 三种试剂盒对检测结果的影响
• 5 全文小结
• 参考文献
• 致谢
• 德国拜发试剂盒使用说明书
• 比利时BIX-O试剂盒使用说明书
• 北京望尔试剂盒（Ⅱ型）使用说明书