PRRSV不同毒株对仔猪致病性比较及其灭活疫苗免疫效果观察

论文摘要

猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproduction and respiratory syndrome,PRRS）是以母猪繁殖障碍、仔猪呼吸道症状为主要特征的具有高度传染性的病毒病。该病1987年最早发现于美国,目前该病在我国大部分地区已经广泛流行。不同时间不同地区分离的毒株其致病性有所不同。目前该病给我国当前的养猪业带来了非常严重的危害,但尚无有效的防制方法。2006年,在我国南方地区暴发了以高致病性PRRSV为主要病原的以高热、高发病率为特征的传染病,本实验室在流行病原调查的基础上分离获得一株PRRSV SY0608高变异株。本文进一步评价了该变异毒株的致病特性并研制出了针对高致病性PRRSV的灭活疫苗,以期获得比较理想的免疫效果。PRRSV不同分离株对仔猪致病性的比较研究:本研究采用11头30日龄PRRSV阴性仔猪,随机分为3组。第一组5头接种S1毒株,第二组4头接种SY0608毒株,第三组2头作为空白对照。攻毒后通过观察临床症状、病理学变化和病毒在组织中的分布,进一步研究该高变异病毒株对仔猪的致病特性。结果为:（1）SY0608毒株感染组仔猪表现明显临床症状,接种3天后体温急剧升高至41.8℃;白细胞数急剧减少（降低了45%）;病理学变化严重,肺泡膈增宽,大部分肺组织肺泡不张;而S1株感染组仔猪仅出现轻微临床症状和病理变化。（2）SY0608毒株感染组仔猪病毒血症持续时间较S1毒株感染组长,病毒在脏器中的分布更为广泛。（3）SY0608株感染组血清ELISA抗体水平明显高于S1株感染组。结果表明SY0608毒株对仔猪致病作用要明显强于S1毒株猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗制备与免疫效果观察:本研究选用本实验室分离鉴定的PRRSV-SY0608强毒株病毒液,分别采用细菌多糖和白油为佐剂制成油乳剂PRRS灭活疫苗。采用商品化仔猪进行免疫保护试验,二免后3周用SY0608强毒株攻毒。结果为:（1）PRRSV白油佐剂灭活疫苗免疫后35天,用同源PRRSV强毒攻击,其临床症状病理变化与非免疫攻毒对照组无明显差异。（2）PRRSV-多糖白油佐剂灭活苗免疫组间隔3周,加强免疫,结果ELISA抗体则有明显升高。非免疫对照组仔猪出现明显临床症状病理变化,免疫组仔猪也出现临床症状,但症状轻微,病程缩短,病理学变化也明显轻微,病毒血症,鼻、肛排毒及不同组织中PRRSV阳性率则无显著差别。本研究结果表明SY0608毒株致病性明显强于十年前我国分离的传统毒株S1,其组织嗜性明显广泛;通过免疫保护试验证实,该研究制备的PRRSV-多糖白油佐剂灭活疫苗具有一定保护作用,其免疫保护效果优于PRRSV白油佐剂灭活疫苗仍不是很理想,需进一步改进。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 猪繁殖与呼吸综合征研究进展
• 1 病原学
• 1.1 形态特征
• 1.2 理化特征
• 1.3 生物学特征
• 1.4 基因组成及其功能
• 1.5 基因型与基因变异
• 2 流行病学
• 3 发病机制
• 4 临床症状
• 4.1 急性感染型
• 4.2 慢性型
• 4.3 亚临床型
• 5 病理变化
• 6 诊断方法
• 6.1 临床诊断
• 6.2 组织病理学诊断
• 6.3 血清学诊断
• 6.4 病毒的分离
• 6.5 分子生物学诊断
• 6.6 免疫组化法
• 7 疫苗研究进展
• 7.1 弱毒疫苗
• 7.2 灭活苗
• 7.3 亚单位疫苗
• 7.4 基因工程重组疫苗
• 7.5 DNA疫苗
• 8 结语
• 参考文献
• 第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒不同分离株对仔猪致病性的比较
• 1 材料和方法
• 1.1 病毒
• 1.2 细胞及细胞培养液
• 1.3 主要试剂和仪器
• 50的测定'>1.4 病毒TCID₅₀的测定
• 1.5 仔猪人工感染试验
• 1.6 血相检测
• 1.7 病理学检查
• 1.8 RT-PCR检测PRRSV
• 1.9 PRRSV特异性ELISA抗体检测
• 2 结果
• 2.1 ELISA抗体
• 2.2 临床症状比较
• 2.3 血相检测比较
• 2.4 病理变化
• 2.5 病毒血症
• 2.6 不同组织中PRRSV检测
• 3 讨论
• 4 小结
• 参考文献
• 第三章 猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗制备与免疫效果观察
• 1 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.2 PRRSV的增殖及其滴度测定
• 1.3 PRRSV的灭活及检验
• 1.4 油乳剂灭活苗的制备
• 1.5 油佐剂灭活疫苗的质量检验
• 1.6 免疫保护试验设计
• 1.7 组织病理学检查
• 1.8 PRRSV RT-PCR检测
• 1.9 ELISA试验
• 2 结果
• 2.1 PRRSV增殖及其滴度测定
• 2.2 灭活病毒的检验
• 2.3 灭活疫苗物理性状测定
• 2.4 疫苗安全性
• 2.5 仔猪免疫保护试验
• 3 讨论
• 4 小结
• 参考文献
• 全文总结
• 致谢