论文摘要
第一部分鼠外周血内皮祖细胞体外培养与鉴定目的探讨鼠外周血来源的血管内皮祖细胞（EPCs）体外培养及鉴定的方法。方法从大鼠心脏采集外周血,以密度梯度离心法分离单个核细胞（MNC）,置于ECM-2培养基中培养。用Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白（Dil-acLDL）摄取试验和FITC标记的荆豆凝集素（FITC-UEA-1）结合试验,免疫荧光法检测其Dil-acLDL、FITC-UEA-1的表达。结果从大鼠外周血MNC中可成功地培养出EPCs。培养获得的EPCs可吞噬acLDL并与UEA-1相结合,其表型为Dil-acLDL+、FITC-UEA-1+。结论用密度梯度离心法从大鼠外周血MNC中可成功地培养出EPCs。第二部分内皮祖细胞移植对大鼠心肌梗死后缺血心肌血管再生及心功能的影响目的探讨大鼠内皮祖细胞（EPCs）移植对大鼠心肌梗死后血管再生及对心功能的影响。方法分离培养大鼠EPCs,免疫荧光法检测其Dil-acLDL、FITC-UEA-1的表达。将Wistar大鼠冠状动脉左前降支结扎复制急性心肌梗死模型后,在梗死心肌处植入Brdu标记的EPCs（实验组）及EBM-2培养液（对照组）。另设假手术组15只为正常对照。移植后4周,心脏超声检查心功能,并对梗死区心肌组织进行移植细胞形态学检查及毛细血管密度测定。结果培养获得EPCs,其表型为Dil-acLDL+、FITC-UEA-1+。植入梗死区的EPCs可以分化为血管内皮细胞,实验组梗死心肌处血管密度较对照组明显增高（P<0.01）。移植后4周,实验组大鼠左心室射血分数及左心室短轴缩短率较对照组明显提高（P<0.01）免疫组化显示试验组心肌瘢痕区边缘有BrdU阳性细胞存在。结论同种异体EPCs移植到心肌梗死大鼠缺血心肌能分化为毛细血管内皮细胞,促进梗死后心肌血管新生,改善心功能。