GDNF在胰腺癌神经侵袭中的作用初步探讨

论文摘要

研究背景:胰腺癌是恶性度极高的恶性肿瘤之一,患者发现时多属晚期,仅有10%-15%有手术切除的机会,5%-7.5%能根治。但是它术后复发率高,预后差,5年生存率仅为5%左右。胰腺癌主要是通过淋巴道、神经及血液等途径发生转移。在各种转移途径中,神经侵袭（Neuralinvasion,NI）在胰腺癌的患者中早期即可发生,并且发生率较高,被认为是该肿瘤的特殊转移途径。由胰腺内外的神经组织产生的许多神经营养因子、粘附分子参与了胰腺癌的神经侵袭过程。其中胶质细胞源神经营养因子（GDNF）在胰腺癌神经侵袭（NI）中的作用日益引起人们的重视。目的:建立裸鼠原位胰腺癌模型,探讨GDNF及其受体、MMP9与裸鼠原位胰腺癌动物模型中神经侵袭的关系。胰腺癌细胞培养,探讨GDNF对胰腺癌细胞的化学趋化作用和增殖的影响。研究探讨GDNF对于MMP-9表达的影响。方法:利用胰腺癌细胞系MIAPaCa-2和Capan-2建立裸鼠原位胰腺癌模型,通过大体标本观察、HE染色及免疫组化染色,探讨GDNF及其受体、MMP9与动物模型中神经侵袭的关系。胰腺癌细胞培养,利用trans-Well小室、细胞计数、MTT和流式细胞法测定GDNF对胰腺癌细胞的趋化作用和增殖的影响。用RT-PCR、Elisa方法测定GDNF对于MMP-9表达的影响。结果:胰腺癌具有神经侵袭的倾向,胰腺癌在疾病早期,其他转移无或很少时即有神经侵袭的发生。GDNF及其受体RET的表达与胰腺癌神经侵袭有关。培养体系中加入不同浓度GDNF,胰腺癌细胞增殖明显增强,Trans-well中胰腺癌细胞透壁数目明显增多并且呈剂量依赖关系。培养体系中加入GDNF,胰腺癌细胞MMP-9mRNA表达增强,培养介质中MMP-9蛋白的表达明显增高。结论:（1）.胰腺癌具有神经侵袭的倾向,在疾病早期即有神经侵袭的发生,GDNF及其受体RET的表达与胰腺癌神经侵袭有关。（2）.GDNF对于胰腺癌细胞具有化学趋化和促增殖作用。（3）.GDNF具有上调胰腺癌细胞MMP-9表达的作用,从而增强胰腺癌细胞的侵袭能力。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 符号说明
• 前言
• 一.建立胰腺癌原位动物模型
• 材料和方法
• 胰腺癌细胞体外培养
• 裸鼠原位胰腺癌模型建立
• 结果
• 讨论
• 小结
• 二.模型中GDNF及受体、MMP-9的表达
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 三.GDNF对胰腺癌细胞增殖的影响
• 一 细胞计数法检测GDNF对胰腺癌细胞增殖的影响
• 1 材料
• 2 方法
• 3.实验结果
• 二 MTT法检测GDNF对胰腺癌细胞增殖的影响
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 三 流式细胞仪检测GDNF对胰腺癌细胞周期的影响
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 讨论
• 小结
• 四.Transwell法检测GDNF对胰腺癌细胞的化学趋化作用
• 一 材料
• 二 方法
• 三 结果
• 四 讨论
• 小结
• 五.GDNF对MMP—9表达的影响
• 一 RT-PCR法检测胰腺癌细胞中GFRα-1、RET、MMP-9的表达以及GDNF对MMP-9表达的影响
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 二 Elisa法检测GDNF对MMP-9蛋白表达的影响
• 1 材料
• 2.方法
• 3 结果
• 讨论
• 小结
• 结论
• 参考文献
• 综述一
• 综述正文 胰腺癌神经侵袭研究进展
• 参考文献
• 综述二
• 综述正文 GDNF在胰腺癌神经侵袭中的作用
• 参考文献
• 在学期间发表文章
• 致谢