凋亡素重组蛋白导向治疗肿瘤的研究

凋亡素重组蛋白导向治疗肿瘤的研究

论文摘要

凋亡素是鸡贫血病毒(CAV)vp3基因编码一个功能性蛋白,主要引起鸡单核细胞凋亡。多年来对凋亡素研究证明它能够特异诱导肿瘤细胞发生凋亡而对正常体细胞无损伤作用。凋亡素在肿瘤的治疗中是一个独立的因子,凋亡素诱导的细胞凋亡不依赖于p53基因,在肿瘤细胞内高水平表达的Bcl-2能够促进凋亡素诱导的凋亡。凋亡素的这些特征在肿瘤治疗中体现了巨大的潜力,已成为肿瘤治疗研究领域的热点。为探索凋亡素蛋白导向治疗肿瘤的方法,本研究将凋亡素基因与生长抑素基因和绿脓杆菌外毒素转膜系统基因重组,重组蛋白能以生长抑素为导向富集于肿瘤组织,并通过绿脓杆菌外毒素转膜系统将凋亡素进入肿瘤细胞,以促进肿瘤细胞的凋亡。本研究首先采用原核表达系统表达了凋亡素蛋白并制备其抗体为下一步凋亡素重组蛋白的检测奠定基础,随后通过PCR重叠延伸技术将凋亡素基因与生长抑素基因和绿脓杆菌外毒素转膜系统基因重组,获得凋亡素重组蛋白基因,并在杆状病毒和酵母表达系统实现了凋亡素重组蛋白的表达。凋亡素重组蛋白在体外对肿瘤细胞的凋亡作用试验表明,凋亡素重组蛋白对肿瘤细胞有凋亡作用,能够抑制肿瘤细胞增殖,但不同肿瘤细胞凋亡率存在差异。通过上述实验,证实凋亡素重组蛋白能够诱导肿瘤细胞凋亡,为进一步利用凋亡素治疗肿瘤奠定基础。

论文目录

  • 前言
  • 第一篇:文献综述
  • 第一章 导向治疗的研究进展
  • 1 肿瘤导向治疗
  • 2 肿瘤导向治疗药物的研究进展
  • 3 导向治疗肿瘤的前景与展望
  • 第二章 细胞凋亡与肿瘤的发生和治疗
  • 1 细胞凋亡
  • 2 细胞凋亡的机制
  • 3 细胞凋亡与肿瘤的发生发展
  • 4 细胞凋亡与肿瘤的浸润和转移
  • 5 细胞凋亡的调控基因与肿瘤
  • 6 细胞凋亡与肿瘤治疗
  • 第三章 凋亡素重组蛋白各组件研究进展
  • 1 生长抑素
  • 2 绿脓杆菌外毒素(PEA)转膜系统
  • 3 Apoptin 的研究进展
  • 第二部分:研究内容
  • 第一章 凋亡素原核表达及其抗体的制备
  • 1 材料与方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 4 小结
  • 第二章 凋亡素重组蛋白在杆状病毒表达系统的表达
  • 1 材料与方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 4 小结
  • 第三章 凋亡素重组蛋白纯化及在体外对肿瘤细胞的抑制作用
  • 1 材料与方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 4 小结
  • 第四章 凋亡素重组蛋白在酵母表达系统中的表达
  • 1 材料与方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 4 小结
  • 结论
  • 参考文献
  • 攻读博士期间发表的主要论文
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 致谢
  • 导师简历
  • 个人简历
  • 相关论文文献

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